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同时针对VEGF和p53腺病毒干扰载体的构建及干扰作用 被引量:2
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作者 褚衍六 赵幼安 +4 位作者 李文通 郭成浩 宋现让 迟伟玲 魏玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2005年第3期189-192,共4页
目的:构建能同时干扰VEGF和p53基因表达的RNAi腺病毒干扰载体,观察其对肿瘤细胞VEGF和p53的干扰作用。方法:先分别构建能干扰p53和VEGF的质粒载体,依次将构建干扰载体的干扰序列和H1启动子序列切下并连接到pAdTrack上,构建成pAdTrack/VE... 目的:构建能同时干扰VEGF和p53基因表达的RNAi腺病毒干扰载体,观察其对肿瘤细胞VEGF和p53的干扰作用。方法:先分别构建能干扰p53和VEGF的质粒载体,依次将构建干扰载体的干扰序列和H1启动子序列切下并连接到pAdTrack上,构建成pAdTrack/VEGF/p53,将构建的质粒转染含有pAdEasy-1的BJ5183工程菌中,回收并酶切鉴定重组腺病毒载体,将阳性腺病毒载体感染293细胞并收集病毒,采用荧光定量PCR检测腺病毒干扰载体同时降低VEGF和p53表达的作用。结果:经过酶切鉴定,pad/VEGE/p53载体中含有插入的2个启动子和干扰序列。转染腺病毒干扰载体后,肿瘤细胞中的VEGF和p53 mRNA表达量显著降低。结论:构建能同时干扰VEGF和p53基因的腺病毒干扰载体可以显著降低MCF-7 细胞中VEGF和p53 mRNA的表达。 展开更多
关键词 RNA干扰 腺病毒 基因治疗 血管内皮生长因子 P53
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