无细胞短棒状杆菌纳米级制剂抗肿瘤作用及机理研究 被引量：10

1

作者 高尚先 宋静 +6 位作者 刘星霞 康国华 王群 张萍 李伟 张利宁 李守悌 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期101-104,共4页

目的 :研究无细胞短棒状杆菌纳米级制剂 (NCPP)体内抗肿瘤作用及机理。方法 :小鼠腹腔注射NCPP与短棒状杆菌制剂 (CPP) 14d后测定脾指数。小鼠腹腔注射艾氏腹水癌细胞 ,于注射癌细胞前 1d及注射后次日起 ,连续 (间隔 1d)腹腔注射NCPP与C... 目的 :研究无细胞短棒状杆菌纳米级制剂 (NCPP)体内抗肿瘤作用及机理。方法 :小鼠腹腔注射NCPP与短棒状杆菌制剂 (CPP) 14d后测定脾指数。小鼠腹腔注射艾氏腹水癌细胞 ,于注射癌细胞前 1d及注射后次日起 ,连续 (间隔 1d)腹腔注射NCPP与CPP 5次 ,计算小鼠存活率。小鼠腹腔注射NCPP和CPP 10d后测定腹腔巨噬细胞 (Mφ)吞噬率、吞噬指数、过氧化氢 (H2 O2 )和一氧化氮 (NO)水平、脾脏自然杀伤 (NK)细胞杀伤率及T细胞增殖指数。结果 :NCPP组和CPP组与对照组相比 :均有明显的抑瘤作用 ;脾指数均大于 2 .0 ;腹腔Mφ吞噬率、吞噬指数、产生过氧化氢 (H2 O2 )和一氧化氮 (NO)水平均有显著性提高 (P <0 .0 1) ;脾脏NK细胞杀伤率均有明显提高 (P <0 .0 5 ) ;脾脏T细胞增殖指数均无明显差异。上述所有实验中 ,NCPP和CPP 2组间均无明显差异。结论 :NCPP具有与CPP相同的脾激活及抑瘤作用 ,其机理主要是通过激活Mφ及NK细胞吞噬、杀伤功能所致。 展开更多

关键词 短棒状杆菌 纳米级制剂 抗肿瘤作用 机理 研究

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降钙素对人乳腺癌细胞系T47D作用的体内外研究 被引量：2

2

作者 赵丽 曹英林 +1 位作者 孙汶生 张志强 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第3期186-189,共4页

目的 :研究降钙素对人乳腺癌细胞系T47D的作用。方法 :将鲑鱼降钙素 (sCT)作用于体外培养的T47D细胞 ,MTT法观察细胞生长抑制率 ,PCR ELISA法分析细胞端粒酶活性 ,透射电镜观察细胞凋亡。将T47D细胞接种至裸鼠皮下并肌注sCT ,3 0d后测... 目的 :研究降钙素对人乳腺癌细胞系T47D的作用。方法 :将鲑鱼降钙素 (sCT)作用于体外培养的T47D细胞 ,MTT法观察细胞生长抑制率 ,PCR ELISA法分析细胞端粒酶活性 ,透射电镜观察细胞凋亡。将T47D细胞接种至裸鼠皮下并肌注sCT ,3 0d后测量瘤体直径 ,扫描电镜比较第三腰椎的结构。结果 :sCT能抑制T47D细胞的生长 ,降低端粒酶活性 ,诱导细胞凋亡。体内试验未观察到瘤体缩小 ,扫描电镜发现sCT使第三腰椎骨质结构增粗致密。结论 :降钙素诱导T47D细胞凋亡并降低其端粒酶活性是其抑制乳腺癌细胞体外生长的新机制。体内试验未得到理想的抑瘤效果 ,可能与机体复杂的内分泌反应有关。对于无骨质疏松的裸鼠 。 展开更多

关键词 降钙素 乳腺癌 端粒酶 细胞凋亡 体内试验 体外试验

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CD137(人4-1BB)在dhfr-CHO中的表达及活性研究 被引量：2

3

作者 万兵 张利宁 +4 位作者 马春红 宋静 曹英林 李长菲 孙汶生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期678-681,共4页

目的 :构建CD137真核高效表达系统 ,深入研究CD137及其配体在细胞信号转导中的作用。方法 :将构建有CD137全长cDNA序列的pCDNA3质粒 (CMV ILA SEN ,CIS)及pSV2 dhfr(含二氢叶酸还原酶基因 ) ,运用脂质体介导法共转染二氢叶酸还原酶缺陷... 目的 :构建CD137真核高效表达系统 ,深入研究CD137及其配体在细胞信号转导中的作用。方法 :将构建有CD137全长cDNA序列的pCDNA3质粒 (CMV ILA SEN ,CIS)及pSV2 dhfr(含二氢叶酸还原酶基因 ) ,运用脂质体介导法共转染二氢叶酸还原酶缺陷的CHO细胞 (dhfr CHO) ;用G4 18筛选出阳性克隆 ;MTX压力选择系统诱导CD137在dhfr CHO细胞的高效表达 ;RT PCR、免疫细胞化学法及流式细胞术测定CD137的表达情况 ;3H TdR掺入法进行活性研究。结果 :CD137为膜型表达 ,CIS转化dhfr CHO细胞CD137表达率为 96 0 7% ;活性研究显示CD137膜蛋白轻度促进抗CD3单抗诱导的PBMC增殖。结论 :获得高效表达CD137的CHO细胞株 ,CD137膜蛋白促进抗CD3单抗诱导的PBMC增殖。 展开更多

关键词 共刺激分子 CD137 真核表达系统 dhfr-CHO

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脂质体介导EndostatinIL-12基因联合治疗移植型鼠肝癌的实验研究 被引量：1

4

作者 王晓燕 马春红 +4 位作者 张艳 高立芬 朱法良 郭春 刘华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第16期951-954,共4页

目的:探讨脂质体介导Endostatin及IL-12基因联合治疗肝癌的可行性。方法:将已构建的Endostatin和IL-12真核表达载体给荷瘤BALB/c鼠瘤内注射,每周两次测量瘤体积。ELISA法检测肿瘤局部IL-12、IL-2、Endostatin含量,MTT法检测NK细胞杀伤活... 目的:探讨脂质体介导Endostatin及IL-12基因联合治疗肝癌的可行性。方法:将已构建的Endostatin和IL-12真核表达载体给荷瘤BALB/c鼠瘤内注射,每周两次测量瘤体积。ELISA法检测肿瘤局部IL-12、IL-2、Endostatin含量,MTT法检测NK细胞杀伤活性,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:联合治疗组肿瘤体积明显小于其它各组(P<0.05);肿瘤局部IL-12、IL-2、Endostatin的表达明显高于pVAX1空载体和生理盐水对照组(P<0.05);NK细胞杀伤率和肿瘤细胞凋亡率分别为52.0%和48.2%。结论:联合应用Endostatin和IL-12基因可有效抑制鼠肝癌的生长。 展开更多

关键词 ENDOSTATIN IL-12真核 载体 肝细胞 癌

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人树突状细胞体外直接抑瘤作用研究

5

作者 王群 张利宁 +5 位作者 丁培芳 王晓燕 刘军莉 张蘋 冯照雷 孙汶生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期328-331,共4页

目的 :诱导获得人外周血树突状细胞 (DCs) ,研究其体外直接抑瘤作用及机制。方法 :自正常人外周血分离获得单核细胞 ,体外rhGM CSF和rhIL 4联合诱导培养 ,观察细胞形态并检测其相关表型 ;利用MTT法检测所诱导DCs及其培养上清对不同肿瘤... 目的 :诱导获得人外周血树突状细胞 (DCs) ,研究其体外直接抑瘤作用及机制。方法 :自正常人外周血分离获得单核细胞 ,体外rhGM CSF和rhIL 4联合诱导培养 ,观察细胞形态并检测其相关表型 ;利用MTT法检测所诱导DCs及其培养上清对不同肿瘤细胞系的体外直接抑瘤效应。结果 :诱导 5～ 7天后的悬浮细胞具有典型的DCs形态 ,流式分析显示HLA DR表达率为 6 4 0 2 % ,CD14表达率为 2 34% ;抑瘤实验显示 :DCs对HT2 9、Hela及HepG2 2 15三种肿瘤细胞系的生长具有明显抑制 ,其抑制率分别为 2 0 16 % ,2 5 4 4 % ,75 4 1% ,而对Lovo和HepG2两种肿瘤细胞系 ,则无明显的抑制作用。DCs培养上清均未见明显的抑瘤效应。结论 :人类DCs可对某些肿瘤细胞的生长产生直接抑制作用 ,但对不同的肿瘤细胞其作用不同。此作用可能由DCs与肿瘤细胞的直接接触而触发 ,而与DCs分泌的细胞因子关系不大。 展开更多

关键词 树突状细胞 单核细胞 肿瘤 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素4

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重组人分泌型endostatin的纯化及其抑癌活性探讨 被引量：5

6

作者 王晓燕 孙汶生 +6 位作者 马春红 张利宁 李欣 曹英林 刘素侠 宋静 韩丽辉 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期136-139,共4页

目的:纯化毕赤酵母菌GS115株表达的分泌型人endostatin蛋白,并对其抑癌活性进行研究。方法:利用SepharoseG-25及Heparin亲和层析柱纯化重组蛋白,并以MTT法测定重组endostatin对人脐静脉血管内皮细胞(ECV～304)增殖的抑制活性;另以HepG2.... 目的:纯化毕赤酵母菌GS115株表达的分泌型人endostatin蛋白,并对其抑癌活性进行研究。方法:利用SepharoseG-25及Heparin亲和层析柱纯化重组蛋白,并以MTT法测定重组endostatin对人脐静脉血管内皮细胞(ECV～304)增殖的抑制活性;另以HepG2.2.15细胞注射裸鼠成瘤后,体内验证重组蛋白的抑瘤活性。结果:MTT结果显示纯化后的endostatin在体外可特异性抑制人脐静脉内皮细胞的增殖,最高抑制率为86.0%;动物实验证明其可明显抑制荷瘤动物肿瘤的生长。结论:经纯化后的重组endostatin具有较强抑癌活性,将为临床抗血管生成治疗实体瘤研究奠定基础。 展开更多

关键词 肿瘤 内皮抑素 毕赤酵母菌 分泌型人内皮抑素蛋白 抑癌活性 人脐静脉血管内皮细胞

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PDCD4基因在胶质瘤细胞系的稳定表达及其对肿瘤细胞生长的影响 被引量：5

7

作者 张霞 王晓燕 +2 位作者 高琦 高飞 张利宁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第4期347-350,共4页

目的:建立稳定表达程序性死亡4基因(programmed cell death4,PDCD4)的人神经胶质瘤U251细胞系,观察PDCD4基因对人神经胶质瘤细胞增殖及细胞周期的影响。方法:将构建好的携带PDCD4重组真核表达载体pEGFP-PDCD4转染U251细胞,经过G418筛选... 目的:建立稳定表达程序性死亡4基因(programmed cell death4,PDCD4)的人神经胶质瘤U251细胞系,观察PDCD4基因对人神经胶质瘤细胞增殖及细胞周期的影响。方法:将构建好的携带PDCD4重组真核表达载体pEGFP-PDCD4转染U251细胞,经过G418筛选获得稳定细胞系;用RT-PCR及Western blotting检测PDCD4mRNA和蛋白的表达情况,通过锥虫蓝染色活细胞计数法及克隆形成实验检测外源PDCD4转染对细胞增殖和克隆形成能力的影响,以流式细胞术检测细胞周期。结果:成功建立稳定表达PDCD4的胶质瘤细胞U251-PDCD4。未转染的U251及空载体转染的U251细胞均不表达PDCD4,而pEGFP-PDCD4转染的U251-PDCD4细胞表达高水平的PDCD4mRNA和蛋白质;转染PDCD4基因的细胞生长速度明显减慢(P<0.01)、克隆形成率明显降低(P<0.01);细胞周期检测显示,转染PDCD4的细胞较其他两对照组细胞S期升高、G2/M期明显降低(P<0.05)。结论:PDCD4通过干扰细胞周期明显抑制胶质瘤U251细胞的细胞增殖及克隆形成能力。 展开更多

关键词 程序性死亡4基因 神经胶质瘤 转染 细胞周期 细胞增殖

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选择性环氧合酶-2抑制剂对结肠癌细胞的 生长抑制作用及机制探讨(英文) 被引量：2

8

作者 贾晓青 韩丽辉 +5 位作者 钟宁 孟繁立 阎明 李文捷 李延青 张尚忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期985-989,共5页

目的研究NS-398(一种选择性环氧合酶-2抑制剂)对结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用并探讨其机制。方法通过MTT法检测细胞的增殖情况,通过流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,通过RT-PCR检测bcl-2mRNA和baxmRNA表达,通过共聚焦激光扫描显... 目的研究NS-398(一种选择性环氧合酶-2抑制剂)对结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用并探讨其机制。方法通过MTT法检测细胞的增殖情况,通过流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,通过RT-PCR检测bcl-2mRNA和baxmRNA表达,通过共聚焦激光扫描显微镜观察细胞骨架成分F-actin的变化。结果NS-398 对结肠癌HT-29细胞生长的抑制具有时间和剂量依赖性。流式细胞术结果显示NS-398可剂量依赖地诱导HT- 29细胞凋亡,使其停滞于G0/G1期。经不同浓度的NS-398处理72h后,bcl-2mRNA在HT-29细胞的表达降低, bcl-2/bax比值降低。细胞骨架成分F-actin主要分布在HT-29细胞核周围,呈环状结构,NS-398作用后细胞核周围的环状结构消失。结论NS-398可显著抑制结肠癌细胞的体外生长并诱导其凋亡,这与下调bcl-2/bax比值以及细胞骨架的破坏有关。 展开更多

关键词 环加氧酶抑制剂 细胞凋亡 结肠肿瘤

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调节性T细胞与肿瘤 被引量：8

9

作者 张利宁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第3期201-205,共5页

调节性T(regulatoryT,Treg)细胞是一群具有抑制其他免疫细胞功能的负调控细胞,包括CD4+Treg、CD8+Treg、NKTTreg和双阴性(doublenegative,DN)Treg细胞等四大类。研究显示,肿瘤微环境中Treg细胞数量升高,且这些升高的Treg细胞能抑制抗肿... 调节性T(regulatoryT,Treg)细胞是一群具有抑制其他免疫细胞功能的负调控细胞,包括CD4+Treg、CD8+Treg、NKTTreg和双阴性(doublenegative,DN)Treg细胞等四大类。研究显示,肿瘤微环境中Treg细胞数量升高,且这些升高的Treg细胞能抑制抗肿瘤免疫、降低肿瘤免疫治疗的效果。寻找肿瘤微环境中Treg细胞升高的原因及清除Treg细胞的方法,已经成为肿瘤免疫的研究热点。现已证实,肿瘤可诱导肿瘤特异性Treg细胞的产生、肿瘤特异性CD4+CD25+Treg细胞在肿瘤局部募集和扩增、普通CD4+CD25-T细胞向Treg细胞的转化可能是肿瘤微环境中的Treg细胞数量升高的原因。抗CD25抗体能清除Treg细胞,但也同时清除了活化的效应细胞;新近发现,某些TLR信号通路的活化可抑制Treg细胞的功能,该发现为联合应用某些TLR配体和抗原肽改善肿瘤免疫治疗效果提供了新的思路。 展开更多

关键词 调节性T细胞 肿瘤 TOLL样受体 免疫治疗

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睾丸酮类激素在艾滋病治疗中的综合正向作用 被引量：1

10

作者 迟阿鲁 高立芬 史中锋 《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第2期168-170,共3页

本文主要综述睾丸酮改善人体免疫功能、性功能、消瘦和抑郁的正向作用及对艾滋病的治疗作用。介绍雄性激素在艾滋病治疗中的促进作用。

关键词 获得性免疫缺陷综合征 睾丸酮 雄性激素

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人源性TAT-Fab抗体的表达优化及生物活性测定

11

作者 王群 刘军莉 +2 位作者 高飞 张蘋 张利宁 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期651-655,共5页

为了提高抗体的表达水平,获得有保护作用的人源性破伤风抗毒素Fab(TAT-Fab)抗体,对人源性TAT-Fab抗体在大肠杆菌中的表达条件进行优化并测定其体内外生物学活性.ELISA显示所表达的TAT-Fab抗体可特异性结合破伤风外毒素,且优化后的表达... 为了提高抗体的表达水平,获得有保护作用的人源性破伤风抗毒素Fab(TAT-Fab)抗体,对人源性TAT-Fab抗体在大肠杆菌中的表达条件进行优化并测定其体内外生物学活性.ELISA显示所表达的TAT-Fab抗体可特异性结合破伤风外毒素,且优化后的表达水平较优化前提高近5倍;表达产物经超滤分离浓缩后,Western-blot显示在分子量约50 kDa处有一TAT-Fab抗体的特异性表达条带;小鼠保护实验显示其可特异性中和破伤风外毒素,明显延长小鼠的生存时间.以上结果表明所制备的人源性TAT-Fab抗体在体内外均具有中和破伤风外毒素的效应,为人源性破伤风抗毒素的研制和生产提供了实验依据. 展开更多

关键词 破伤风抗毒素 噬菌体展示 FAB 抗体

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应用抗CD137L单克隆抗体阻断CD137/CD137L信号通路抑制小鼠SGVHD的发生

12

作者 刘兴田 张利宁 +6 位作者 王玉坤 王群 高立芬 李娜 张刘 军莉 高飞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期619-622,628,共5页

目的:探讨抗CD137L单克隆抗体阻断CD137/CD137L信号通路在小鼠同基因型移植物抗宿主病(SGVHD)诱导中的作用,以阐明SGVHD的发生机制。方法:用致死剂量的X射线照射受体小鼠后,移植同基因骨髓细胞,从移植的当天开始连续21天腹腔注射环孢素A... 目的:探讨抗CD137L单克隆抗体阻断CD137/CD137L信号通路在小鼠同基因型移植物抗宿主病(SGVHD)诱导中的作用,以阐明SGVHD的发生机制。方法:用致死剂量的X射线照射受体小鼠后,移植同基因骨髓细胞,从移植的当天开始连续21天腹腔注射环孢素A(CsA)诱导SGVHD。于诱导的第10天起给治疗组小鼠腹腔注射抗CD137L单克隆抗体进行干预治疗。观察各组小鼠的临床症状(体重下降,腹泻)、组织病理学和细胞因子改变。结果:抗CD137L单克隆抗体治疗组小鼠SGVHD的发生率明显低于诱导组小鼠SGVHD的发生率(25%vs 67%),两者差异具有统计学意义(P<0.01)。SGVHD小鼠肝脏和结肠组织病理学呈严重炎症细胞浸润,组织中细胞因子IL-12、IFN-γ、TNF-αmRNA水平升高。而抗体治疗组小鼠织病理学呈轻度炎症细胞浸润,组织中细胞因子IL-12、IFNγ-、TNF-αmRNA水平较低或检测不到。结论:单独用抗CD137L单克隆抗体阻断CD137/CD137L信号通路可明显抑制小鼠SGVHD的发生,提示CD137/CD137L信号通路在小鼠SGVHD免疫反应中是较为重要的通路之一。 展开更多

关键词 抗体 骨髓移植 同基因型移植物抗宿主病 C3H/HeJ小鼠

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小鼠同基因型移植物抗宿主病发生机制及其意义

13

作者 刘兴田 张利宁 +6 位作者 王玉坤 王晓燕 高丽芬 王群 李娜 张蘋 高飞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2005年第4期244-248,共5页

目的：初步探讨小鼠同基因型移植物抗宿主病(SGVHD)的发生机制,为研究移植物抗白血病效应奠定基础。方法：用同基因骨髓细胞重建致死剂量X线照射的小鼠,用环孢素A(CsA)腹腔注射诱导治疗21d。停药后每日观察小鼠临床症状,在小鼠出现GYHD... 目的：初步探讨小鼠同基因型移植物抗宿主病(SGVHD)的发生机制,为研究移植物抗白血病效应奠定基础。方法：用同基因骨髓细胞重建致死剂量X线照射的小鼠,用环孢素A(CsA)腹腔注射诱导治疗21d。停药后每日观察小鼠临床症状,在小鼠出现GYHD样症状时,取肝脏、结肠、耳朵、皮肤和胸腺进行组织学检查,并检测肝脏、结肠组织细胞因子和协同刺激分子的表达。结果：67％(19／28)的模型组小鼠产生GVHD样症状,组织病理检查发现GVHD样小鼠结肠和肝脏有组织坏死和大量炎细胞浸润,而移植对照组均未出现GVHD样症状,组织学未见明显异常。R7-PCR检测发现GVHD样小鼠结肠和肝脏组织中共刺激分子CD137mRNA水平和细胞因子IL-12、IFN-Υ和TNF-α mRNA水平较移植对照组小鼠的水平升高。结论：CsA可诱导同基因型骨髓移植小鼠产生GVHD样症状,Th1类细胞因子参与了SGVHD的发生,为进一步研究$GVHD的抗肿瘤机制建立了技术平台。 展开更多

关键词 同基因型移植物抗宿主病 细胞因子 抗肿瘤

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人CD137胞外区噬菌体展示系统的构建及鉴定

14

作者 李娜 张利宁 +2 位作者 王群 刘成虎 刘兴田 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期294-298,共5页

目的:以噬菌体展示具有天然结构的人CD137分子胞外区,检测其抗原性和生物活性,为以CD137为靶点体外筛选CD137拮抗性类肽药物奠定基础。方法:PCR方法从CIS质粒扩增人CD137胞外区,将其克隆入噬菌粒载体pComb3HSS,构建的重组载体电转入受体... 目的:以噬菌体展示具有天然结构的人CD137分子胞外区,检测其抗原性和生物活性,为以CD137为靶点体外筛选CD137拮抗性类肽药物奠定基础。方法:PCR方法从CIS质粒扩增人CD137胞外区,将其克隆入噬菌粒载体pComb3HSS,构建的重组载体电转入受体菌XL1Blue,并加辅助噬菌体VCSM13共感染,使CD137胞外区展示在噬菌体表面。采用ELISA法检测噬菌体展示CD137的抗原性,MTT法检测CD137噬菌体对抗CD137抗体刺激的人外周血淋巴细胞增殖作用的影响检测其生物活性。结果:成功构建表达人CD137分子胞外区的重组噬菌粒载体pComb3HCD137,并以噬菌体展示系统展示CD137分子胞外区。ELISA结果显示噬菌体展示CD137可与抗人CD137抗体特异性结合,证实CD137分子成功展示于噬菌体表面,且具有抗原性。体外生物活性实验显示,展示在噬菌体表面的CD137可抑制抗CD137抗体刺激的人外周血淋巴细胞增殖反应,证实噬菌体展示的CD137有与其配体结合的生物活性结构域。结论:利用噬菌体展示系统成功展示CD137胞外区,噬菌体展示CD137具有抗原性及生物活性。 展开更多

关键词 噬菌体展示 CD137 抗原性 生物活性

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协同刺激分子与移植物抗宿主病

15

作者 张蘋 张利宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期799-800,F0003,共3页

关键词 刺激分子 移植物抗宿主病 骨髓移植 免疫调节 细胞凋亡

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骨骼肌生长调控信号通路 被引量：3

16

作者 张磊 杨永杰 张燕君 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期70-72,76,共4页

骨骼肌能够根据环境刺激的变化改变其质量,可以通过细胞融合或提高蛋白质水平来增加它的大小。介绍了参与骨骼肌生长发育调控的两个关键性信号通路——胰岛素样生长因子1和肌肉生长抑制素信号通路中新的且重要的研究结果,这对于了解肌... 骨骼肌能够根据环境刺激的变化改变其质量,可以通过细胞融合或提高蛋白质水平来增加它的大小。介绍了参与骨骼肌生长发育调控的两个关键性信号通路——胰岛素样生长因子1和肌肉生长抑制素信号通路中新的且重要的研究结果,这对于了解肌肉的发育和成年期肌肉稳态的维持,并寻找肌肉相关疾病潜在的治疗靶点非常有意义。 展开更多

关键词 骨骼肌 胰岛素样生长因子1 肌肉生长抑制素

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通过差减文库筛选文昌鱼神经胚中特异表达的基因

17

作者 张磊 杨永杰 张燕君 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1178-1181,共4页

目的:构建文昌鱼12 h神经胚与6 h原肠胚的差减cDNA文库,以期从中挑选出在神经、肌肉、体轴发育过程中特异表达的基因,以便对文昌鱼早期胚胎的发育调控机制进行进一步研究。方法:分别从文昌鱼12 h胚胎和6 h胚胎提取总RNA,反转录成cDNA,... 目的:构建文昌鱼12 h神经胚与6 h原肠胚的差减cDNA文库,以期从中挑选出在神经、肌肉、体轴发育过程中特异表达的基因,以便对文昌鱼早期胚胎的发育调控机制进行进一步研究。方法:分别从文昌鱼12 h胚胎和6 h胚胎提取总RNA,反转录成cDNA,以文昌鱼12 h胚胎的cDNA作为tester,并以6 h胚胎的cDNA作为driver,经过两轮杂交和抑制性PCR扩增,产物与T载体连接,经蓝白斑筛选,提取质粒DNA,EcoR I酶切鉴定插入片段,由此构建文昌鱼早期两个不同发育时期的差减cDNA文库。结果:对200个文库克隆进行了测序,筛选到一些可能在文昌鱼12 h神经胚中特异表达的基因。结论:成功构建了文昌鱼12 h/6 h胚胎差减cDNA文库,所获得的12 h神经胚中特异表达的基因,为进一步对文昌鱼早期发育调控机制进行研究提供了材料。 展开更多

关键词 文昌鱼 抑制性差减杂交 差减CDNA文库 特异表达基因

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