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肝内胆管癌hTR反义RNA及锤头状核酶基因真核表达载体的构建
1
作者
靳斌
姜希宏
+6 位作者
刘贤锡
刘博
刘师莲
王伟
胡海燕
卢翌
耿昭
《山东医药》
CAS
北大核心
2002年第16期3-5,共3页
用反转录PCR法 ,调取肝内胆管癌细胞内的端粒酶RNA(hTR)基因 ,并针对其序列设计反义RNA封闭基因及锤头状核酶切割基因序列 ,将其构建入真核表达载体pTriEx 4内。根据hTRcDNA序列设计引物 ,经RT PCR法从体外培养的肝内胆管癌细胞内调取hT...
用反转录PCR法 ,调取肝内胆管癌细胞内的端粒酶RNA(hTR)基因 ,并针对其序列设计反义RNA封闭基因及锤头状核酶切割基因序列 ,将其构建入真核表达载体pTriEx 4内。根据hTRcDNA序列设计引物 ,经RT PCR法从体外培养的肝内胆管癌细胞内调取hTR模板区基因 ,根据其测序结果 ,合成反义RNA基因及核酶基因 ,与经相应酶切的真核表达载体连接 ,酶切鉴定重组体的正确性。经RT PCR从细胞内调出 68bp序列 ,与hTRcDNA比较 ,与模板区域碱基序列一致 ,反义RNA与核酶基因重组子经酶切鉴定序列正确。肝内胆管癌细胞内端粒酶的活性明显增高 ,RT PCR法可调出其hTR基因有效片段 ;
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关键词
肝内肝管癌
锤头状核酶基因
真核表达载体
真核表达
反转录聚合酶链反应
端粒酶
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职称材料
题名
肝内胆管癌hTR反义RNA及锤头状核酶基因真核表达载体的构建
1
作者
靳斌
姜希宏
刘贤锡
刘博
刘师莲
王伟
胡海燕
卢翌
耿昭
机构
山东大学
齐鲁医院
山东大学医学分子生物学实验中心
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2002年第16期3-5,共3页
文摘
用反转录PCR法 ,调取肝内胆管癌细胞内的端粒酶RNA(hTR)基因 ,并针对其序列设计反义RNA封闭基因及锤头状核酶切割基因序列 ,将其构建入真核表达载体pTriEx 4内。根据hTRcDNA序列设计引物 ,经RT PCR法从体外培养的肝内胆管癌细胞内调取hTR模板区基因 ,根据其测序结果 ,合成反义RNA基因及核酶基因 ,与经相应酶切的真核表达载体连接 ,酶切鉴定重组体的正确性。经RT PCR从细胞内调出 68bp序列 ,与hTRcDNA比较 ,与模板区域碱基序列一致 ,反义RNA与核酶基因重组子经酶切鉴定序列正确。肝内胆管癌细胞内端粒酶的活性明显增高 ,RT PCR法可调出其hTR基因有效片段 ;
关键词
肝内肝管癌
锤头状核酶基因
真核表达载体
真核表达
反转录聚合酶链反应
端粒酶
Keywords
RT PCR Antisense RNA Ribozyme Real nucleus expression Vector
分类号
R735.8 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
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1
肝内胆管癌hTR反义RNA及锤头状核酶基因真核表达载体的构建
靳斌
姜希宏
刘贤锡
刘博
刘师莲
王伟
胡海燕
卢翌
耿昭
《山东医药》
CAS
北大核心
2002
0
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