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Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫原性
被引量：
2
1
作者
李晖
李榕
+3 位作者
钟森
罗月贝
任红
邓存良
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期597-600,共4页
目的:构建克隆结核分枝杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗,并在COS7细胞中表达,研究该疫苗的免疫原性。方法:克隆Mtb8.4/hIL12嵌合基因,并导入真核表达载体pCIneo中,构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组真核质粒。用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列...
目的:构建克隆结核分枝杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗,并在COS7细胞中表达,研究该疫苗的免疫原性。方法:克隆Mtb8.4/hIL12嵌合基因,并导入真核表达载体pCIneo中,构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组真核质粒。用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列测定等鉴定后,转染COS7细胞,用RTPCR和Westernblot鉴定Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平的表达。用Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫C57BL/6N小鼠,收集脾细胞培养上清检测细胞因子的水平,并用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞毒性T细胞(CTL)的杀伤作用。结果:pCIneoMtb8.4/hIL12重组质粒构建成功。以其转染COS7细胞后,Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平获得表达。Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,IFNγ和IL2的分泌增加,IL4的分泌减少,特异性CTL的杀伤活性增强。结论:成功地构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组质粒,并在COS7细胞中表达。构建的Mtb8.4/hIL12基因疫苗具有较强的免疫原性,可明显诱导CTL的杀伤活性。
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关键词
结核病
MTB8.4
hIL.12
嵌合基因
免疫原性
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职称材料
结核病Mtb8.4基因疫苗构建、表达及诱导的细胞免疫应答
2
作者
李晖
李榕
+4 位作者
钟森
李强
任红
罗月贝
王明勇
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期556-558,共3页
目的制备结核病Mtb8.4基因疫苗,并研究其免疫原性。方法克隆结核杆菌新抗原Mtb8.4基因,导入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组质粒pcDNA3.1(+)Mtb8.4,转染COS7细胞后,用RTPCR检测Mtb8.4基因在细胞内正确表达。将Mtb8.4基因疫苗肌肉注射...
目的制备结核病Mtb8.4基因疫苗,并研究其免疫原性。方法克隆结核杆菌新抗原Mtb8.4基因,导入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组质粒pcDNA3.1(+)Mtb8.4,转染COS7细胞后,用RTPCR检测Mtb8.4基因在细胞内正确表达。将Mtb8.4基因疫苗肌肉注射免疫C57BL/6N小鼠,第3次DNA免疫后4周,处死小鼠,制备免疫小鼠脾细胞,脾细胞培养上清检测细胞因子水平;并按效、靶比例分别为100∶1、50∶1、10∶1进行CTL杀伤检测。结果Mtb8.4基因疫苗组免疫小鼠脾细胞培养上清中γ干扰素(IFNγ)和白细胞介素2(IL2)含量分别为787.317±45.586pg/ml和319.953±57.978pg/ml,BCG组分别为1486.540±39.600pg/ml和767.043±50.269pg/ml,BCG组IL4的含量为90.580±10.998pg/ml,明显高于其他各组(P<0.01)。效靶比为100∶1、50∶1、10∶1时,Mtb8.4基因疫苗组的CTL活性分别为55.3%、35.7%、9.2%,BCG组分别为28.9%、21.4%、9.8%。Mtb8.4基因疫苗主要使抗原特异性Th1型细胞免疫应答增强,细胞因子IFNγ和IL2分泌增加,IL4分泌减少,CTL活性增加;而BCG使IFNγ、IL2和IL4分泌均增加。结论结核病Mtb8.4基因疫苗能诱导较强的Th1型细胞免疫应答,可作为结核病的候选疫苗。
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关键词
结核病
MTB8.4
基因疫苗
质粒构建
表达
细胞免疫应答
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职称材料
题名
Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫原性
被引量：
2
1
作者
李晖
李榕
钟森
罗月贝
任红
邓存良
机构
泸州
医学
院附属医院感染病科
江西省南昌市血站
山东医科大学临床医学系
重庆
医科大
学第二
临床
学院感染科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期597-600,共4页
基金
四川省青年科技基金(川青科基20021)
四川省重点学科重点建设项目资助(SZD0241)
文摘
目的:构建克隆结核分枝杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗,并在COS7细胞中表达,研究该疫苗的免疫原性。方法:克隆Mtb8.4/hIL12嵌合基因,并导入真核表达载体pCIneo中,构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组真核质粒。用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列测定等鉴定后,转染COS7细胞,用RTPCR和Westernblot鉴定Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平的表达。用Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫C57BL/6N小鼠,收集脾细胞培养上清检测细胞因子的水平,并用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞毒性T细胞(CTL)的杀伤作用。结果:pCIneoMtb8.4/hIL12重组质粒构建成功。以其转染COS7细胞后,Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平获得表达。Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,IFNγ和IL2的分泌增加,IL4的分泌减少,特异性CTL的杀伤活性增强。结论:成功地构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组质粒,并在COS7细胞中表达。构建的Mtb8.4/hIL12基因疫苗具有较强的免疫原性,可明显诱导CTL的杀伤活性。
关键词
结核病
MTB8.4
hIL.12
嵌合基因
免疫原性
Keywords
tuberculosis
Mtb8. 4
hIL-12
chimeric gene
immunogenicity
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
结核病Mtb8.4基因疫苗构建、表达及诱导的细胞免疫应答
2
作者
李晖
李榕
钟森
李强
任红
罗月贝
王明勇
机构
泸州泸州
医学
院附属医院感染病科
江西省南昌市血站
成都中医药
大学
附属医院
重庆
医科大
学病毒性肝炎研究所
山东医科大学临床医学系
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期556-558,共3页
基金
四川省青年科技基金资助(川青科基[2002]1号)
四川省重点学科重点建设项目资助(SZD0241)
文摘
目的制备结核病Mtb8.4基因疫苗,并研究其免疫原性。方法克隆结核杆菌新抗原Mtb8.4基因,导入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组质粒pcDNA3.1(+)Mtb8.4,转染COS7细胞后,用RTPCR检测Mtb8.4基因在细胞内正确表达。将Mtb8.4基因疫苗肌肉注射免疫C57BL/6N小鼠,第3次DNA免疫后4周,处死小鼠,制备免疫小鼠脾细胞,脾细胞培养上清检测细胞因子水平;并按效、靶比例分别为100∶1、50∶1、10∶1进行CTL杀伤检测。结果Mtb8.4基因疫苗组免疫小鼠脾细胞培养上清中γ干扰素(IFNγ)和白细胞介素2(IL2)含量分别为787.317±45.586pg/ml和319.953±57.978pg/ml,BCG组分别为1486.540±39.600pg/ml和767.043±50.269pg/ml,BCG组IL4的含量为90.580±10.998pg/ml,明显高于其他各组(P<0.01)。效靶比为100∶1、50∶1、10∶1时,Mtb8.4基因疫苗组的CTL活性分别为55.3%、35.7%、9.2%,BCG组分别为28.9%、21.4%、9.8%。Mtb8.4基因疫苗主要使抗原特异性Th1型细胞免疫应答增强,细胞因子IFNγ和IL2分泌增加,IL4分泌减少,CTL活性增加;而BCG使IFNγ、IL2和IL4分泌均增加。结论结核病Mtb8.4基因疫苗能诱导较强的Th1型细胞免疫应答,可作为结核病的候选疫苗。
关键词
结核病
MTB8.4
基因疫苗
质粒构建
表达
细胞免疫应答
Keywords
tuberculosis
Mtb8. 4
gene vaccine
construction
expression
celluar immune response
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫原性
李晖
李榕
钟森
罗月贝
任红
邓存良
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
结核病Mtb8.4基因疫苗构建、表达及诱导的细胞免疫应答
李晖
李榕
钟森
李强
任红
罗月贝
王明勇
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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职称材料
已选择
0
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