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乳腺癌组织来源的γδ1 T细胞通过产生IL-17D诱导初始CD4+T细胞免疫衰老 被引量：3
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作者 阮俊霞 张秀萍 +4 位作者 姚少波 张艳丽 黄玉强 邱吉刚 马春玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期623-632,共10页
目的探讨乳腺癌组织分离的γδ1 T细胞诱导免疫衰老发挥免疫抑制作用及其逆转的机制。方法乳腺癌组织分离出的γδ1 T细胞与健康人外周血分离的初始CD4^(+)T细胞共培养后,采用CCK-8法检测初始CD4^(+)T细胞的增殖能力,衰老相关β半乳糖苷... 目的探讨乳腺癌组织分离的γδ1 T细胞诱导免疫衰老发挥免疫抑制作用及其逆转的机制。方法乳腺癌组织分离出的γδ1 T细胞与健康人外周血分离的初始CD4^(+)T细胞共培养后,采用CCK-8法检测初始CD4^(+)T细胞的增殖能力,衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测初始CD4^(+)T细胞的衰老;诱导获得的衰老CD4^(+)T细胞与健康人外周血来源初始CD4^(+)T细胞共培养后,通过CCK-8法检测处理后CD4^(+)T细胞的增殖,以流式细胞仪检测处理后CD4^(+)T细胞的凋亡,SA-β-Gal染色检测处理后CD4^(+)T细胞的衰老,Western blot法检测处理后CD4^(+)T细胞周期相关蛋白P53、P21、P16的表达;γδ1 T细胞与初始CD4^(+)T细胞共培养后,利用细胞因子芯片法分析上清中抑制性细胞因子白细胞介素17D(IL-17D)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子α(TGF-α)等的表达差异;IL-17D单克隆抗体处理乳腺癌γδ1 T细胞与初始CD4^(+)T细胞共培养体系后,通过CCK-8法检测处理后CD4^(+)T细胞增殖能力的变化;通过ELISA检测Toll样受体8(TLR8)的配体单链RNA40(ssRNA40)及TLR8短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体对γδ1 T细胞分泌细胞因子IL-17D浓度的影响,通过SA-β-Gal染色、Western blot法分析验证ssRNA40对γδ1 T细胞诱导免疫衰老作用的影响。结果乳腺癌组织来源的γδ1 T细胞诱导初始CD4^(+)T细胞发生免疫衰老,且衰老CD4^(+)T细胞进一步发挥免疫抑制作用;细胞因子芯片检测结果表明γδ1 T细胞的分泌上清中的抑制性因子中IL-17D含量最高;IL-17D单克隆抗体可以降低γδ1 T细胞对初始CD4^(+)T细胞的增殖抑制作用;TLR8配体ssRNA40可以抑制γδ1 T细胞分泌IL-17D,进而可以部分逆转γδ1 T细胞对初始CD4^(+)T细胞的增殖抑制及免疫衰老诱导。结论乳腺癌组织来源的γδ1 T细胞通过产生IL-17D诱导初始CD4^(+)T细胞免疫衰老发挥免疫抑制作用;ssRNA40通过降低γδ1 T细胞分泌IL-17D,可以部分逆转γδ1 T细胞对初始CD4^(+)T细胞免疫衰老的诱导作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 γδ1 T细胞 免疫衰老 免疫抑制 IL-17D
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