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ALV-Jgp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种雏鸡诱导免疫保护的研究被引量：5: 1; 作者窦文文李宏梅 +5 位作者成子强刘建柱刘海港井维芳崔治中郭慧君《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期232-236,共5页; 为研究原核表达J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85囊膜蛋白诱导雏鸡产生保护性抗体及抗ALV-J感染的作用,本研究采用ALV-J gp85重组蛋白与不同免疫佐剂接种雏鸡,检测其免疫后血清抗体变化,并在二免后第35 d进行攻毒,检测鸡体内病毒血症。结... 展开更多; 关键词 J亚群禽白血病病毒囊膜蛋白gp85基因免疫佐剂免疫保护; 在线阅读下载PDF 职称材料

山羊β雌激素受体多克隆抗体的制备及免疫组化方法的建立被引量：3: 2; 作者刘海港李宏梅 +5 位作者王树迎成子强刘法孝窦文文井维芳郭慧君《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期302-308,共7页; 本研究旨在克隆济宁青山羊雌激素受体β(ERβ)基因,进行原核表达,制备多克隆抗体,建立免疫组化分析方法,检测济宁青山羊卵巢和子宫内ERβ分布。根据GenBank发布的绵羊ERβ基因序列设计一对引物,应用RT-PCR方法从济宁青山羊卵巢组织中扩... 展开更多; 关键词山羊雌激素受体Β 多克隆抗体免疫组化; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达J亚群禽白血病病毒gp85蛋白重组表达质粒的免疫原性研究被引量：1: 3; 作者井维芳任庆亚 +3 位作者聂杰张丹丹郭慧君李宏梅《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期727-730,共4页; 为评价J亚群禽白血病病毒(ALV-J)囊膜蛋白gp85基因作为ALV-J DNA疫苗的免疫原性,本研究通过PCR扩增ALV-J的gp85基因(930 bp),将其克隆于真核表达载体pVAX1中构建重组真核表达质粒pVAX1-gp85。间接免疫荧光检测结果显示gp85在转染的哺乳... 展开更多; 关键词 J亚群禽白血病病毒 GP85基因 DNA疫苗免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

高效价猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白多克隆抗体的制备及应用被引量：1: 4; 作者张文刘照贞 +1 位作者李俊硕商营利《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期72-79,共8页; 猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)衣壳蛋白(Capsid protein,Cap)是病毒主要的抗原蛋白,在病毒感染和宿主免疫应答中起重要作用。为了制备抗PCV2b Cap蛋白的高效价多克隆抗体,利用大肠杆菌表达系统对不含核定位信号肽的PCV2b Cap进行... 展开更多; 关键词猪圆环病毒Ⅱ型衣壳蛋白原核表达多克隆抗体病毒检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ALV-Jgp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种雏鸡诱导免疫保护的研究被引量：5: 1; 作者窦文文李宏梅成子强刘建柱刘海港井维芳崔治中郭慧君; 机构山东农业大学动物科技学院山东省生物工程与疫病防治重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期232-236,共5页; 基金公益性行业(农业)科研专项经费(201203055); 文摘为研究原核表达J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85囊膜蛋白诱导雏鸡产生保护性抗体及抗ALV-J感染的作用,本研究采用ALV-J gp85重组蛋白与不同免疫佐剂接种雏鸡,检测其免疫后血清抗体变化,并在二免后第35 d进行攻毒,检测鸡体内病毒血症。结果显示单一gp85重组蛋白只能诱导少部分雏鸡产生抗体,抗体效价较低、维持时间短;而弗氏佐剂(F)和CpG(C)佐剂联合重组蛋白能够使所有的免疫鸡产生抗体,效价较高,维持时间约56 d;二次免疫可以增强免疫效果,高效价抗体维持时间进一步延长。重组蛋白免疫组减少病毒血症的免疫保护率为33.3%,而F佐剂组及F和C佐剂与重组蛋白联合免疫组免疫保护率分别为53.8%和66.7%;另外,F和C佐剂与重组蛋白联合免疫明显增强机体对病毒的抵抗力。以上结果表明使用F和C佐剂可以增强gp85重组蛋白的免疫原性,产生较好免疫保护作用,为开发有效的ALV-J亚单位疫苗提供实验依据。; 关键词 J亚群禽白血病病毒囊膜蛋白gp85基因免疫佐剂免疫保护; Keywords avian leucosis virus of subgroup J envelope protein gp85 gene immunoadjuvants immunoprotection; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山羊β雌激素受体多克隆抗体的制备及免疫组化方法的建立被引量：3: 2; 作者刘海港李宏梅王树迎成子强刘法孝窦文文井维芳郭慧君; 机构山东农业大学动物科技学院、山东省生物工程与疫病防治重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期302-308,共7页; 基金山东省中青年科学家奖励基金(2008BS07005) 国家自然科学基金项目(30871832) +1 种基金山东省科技攻关项目(2008GG30008018); 文摘本研究旨在克隆济宁青山羊雌激素受体β(ERβ)基因,进行原核表达,制备多克隆抗体,建立免疫组化分析方法,检测济宁青山羊卵巢和子宫内ERβ分布。根据GenBank发布的绵羊ERβ基因序列设计一对引物,应用RT-PCR方法从济宁青山羊卵巢组织中扩增ERβ部分基因。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体pET32a(+),构建重组表达载体pET32a(+)-ERβ,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定;经Ni-NTA纯化融合蛋白后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并检测抗体效价及特异性;使用该抗体检测济宁青山羊卵巢和子宫组织细胞中的ERβ分布。结果表明,成功扩增出ERβ部分基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量约为53ku的融合蛋白;Western blotting证明该融合蛋白能与兔抗人的ERβ多克隆抗体特异性反应。制备的多克隆抗体经ELISA检测效价达到1∶213,以此抗体代替购置的标准兔抗人ERβ抗体,进行Western blotting反应,特异性良好;使用该抗体建立免疫组化方法检测结果表明济宁青山羊卵巢颗粒细胞和子宫内膜上皮细胞、平滑肌细胞存在ERβ的分布。本研究获得特异性兔抗山羊ERβ多克隆抗体,使用该抗体建立免疫组化方法首次报道了济宁青山羊卵巢和子宫ERβ的分布表达,为进一步研究β雌激素受体的生物学功能奠定了方法学和形态学基础。; 关键词山羊雌激素受体Β 多克隆抗体免疫组化; Keywords goat estrogen receptor β（ERβ） polyclonal antibody immunohistochemistry assay; 分类号 S852 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达J亚群禽白血病病毒gp85蛋白重组表达质粒的免疫原性研究被引量：1: 3; 作者井维芳任庆亚聂杰张丹丹郭慧君李宏梅; 机构山东农业大学动物科技学院山东省生物工程与疫病防治重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期727-730,共4页; 基金公益性行业(农业)科研专项经费资助(201203055); 文摘为评价J亚群禽白血病病毒(ALV-J)囊膜蛋白gp85基因作为ALV-J DNA疫苗的免疫原性,本研究通过PCR扩增ALV-J的gp85基因(930 bp),将其克隆于真核表达载体pVAX1中构建重组真核表达质粒pVAX1-gp85。间接免疫荧光检测结果显示gp85在转染的哺乳动物Hela细胞和鸡成纤维细胞均能够表达。将该重组质粒免疫雏鸡,利用ELISA试剂盒动态检测血清ALV-J抗体,结果显示pVAX1-gp85能够诱导大部分鸡只产生ALV-J抗体,并且抗体效价随加强免疫次数逐渐升高。本研究为开展ALV-J DNA疫苗的研究提供了实验依据。; 关键词 J亚群禽白血病病毒 GP85基因 DNA疫苗免疫原性; Keywords avian leukosis virus subgroup J gp85 gene DNA vaccine immunogenicity; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高效价猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白多克隆抗体的制备及应用被引量：1: 4; 作者张文刘照贞李俊硕商营利; 机构山东农业大学动物科技学院山东省动物生物工程与疫病防治重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期72-79,共8页; 基金山东省重点研发计划项目(2019GNC106097) 山东省“双一流”学科建设经费资助。; 文摘猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)衣壳蛋白(Capsid protein,Cap)是病毒主要的抗原蛋白,在病毒感染和宿主免疫应答中起重要作用。为了制备抗PCV2b Cap蛋白的高效价多克隆抗体,利用大肠杆菌表达系统对不含核定位信号肽的PCV2b Cap进行了原核表达,获得了可溶性重组蛋白。将纯化后的重组蛋白免疫新西兰白兔,制备抗血清,并进一步以辛酸-硫酸铵沉淀法提纯IgG。ELISA检测显示所制备抗体效价可达到1∶10^7,表明抗体具有较高效价。应用该抗体对人工感染PCV2b的PK-15细胞、小鼠组织进行了免疫印迹、间接免疫荧光和免疫组织化学检测,结果表明该抗体在多种检测方法中均能与目的抗原发生特异性结合。该研究制备的高效价抗体为PCV2b的临床检测及科学研究提供了候选工具。; 关键词猪圆环病毒Ⅱ型衣壳蛋白原核表达多克隆抗体病毒检测; Keywords porcine circovirus type 2 capsid protein prokaryotic expression polyclonal antibody virus detection; 分类号 S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	ALV-Jgp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种雏鸡诱导免疫保护的研究	窦文文李宏梅成子强刘建柱刘海港井维芳崔治中郭慧君	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	山羊β雌激素受体多克隆抗体的制备及免疫组化方法的建立	刘海港李宏梅王树迎成子强刘法孝窦文文井维芳郭慧君	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	表达J亚群禽白血病病毒gp85蛋白重组表达质粒的免疫原性研究	井维芳任庆亚聂杰张丹丹郭慧君李宏梅	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	高效价猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白多克隆抗体的制备及应用	张文刘照贞李俊硕商营利	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料