山东及周边部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的变异与遗传演化分析 被引量：6

1

作者 胡栋 徐煜琳 +8 位作者 朱迎春 赵情 王亭亭 庞恒 李传刚 于江 常维山 吴家强 彭军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1249-1260,共12页

为了解中国山东及周边部分地区自2017年以来猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行株的分子流行病学特征、基因组变化规律,作者收集来自山东省、河南省和江苏省的部分猪场采集及送检的疑似PRRS症状猪组织样品70份,利用RT-PCR方法对其进行PR... 为了解中国山东及周边部分地区自2017年以来猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行株的分子流行病学特征、基因组变化规律,作者收集来自山东省、河南省和江苏省的部分猪场采集及送检的疑似PRRS症状猪组织样品70份,利用RT-PCR方法对其进行PRRSV检测。对部分阳性病料中PRRSV的基因重组、决定中国高致病性PRRSV(HP-PRRSV)致病性和复制力的Nsp9第561、586和592位氨基酸等进行分析,以探明该区域PRRSV的遗传演化规律。结果显示,PRRSV检出率为55.7%,从上述样品筛选11株PRRSV分离株。Nsp2序列分析显示,与经典美洲毒株VR-2332相比,7株PRRSV分离株的Nsp2蛋白分别在第481及533-561位发生了30个氨基酸的不连续缺失,这与我国自2006年以来流行的HP-PRRSV的缺失特征相同;2株PRRSV分离株的Nsp2蛋白在481、533-561及595-597位发生了三个部位的共33个不连续氨基酸的缺失;2株PRRSV分离株的Nsp2蛋白在475-518及533-561位出现了两个部位的共73个不连续氨基酸的缺失。该研究中PRRSV分离毒株的Nsp2基因已发生了明显的新型缺失。采用基因重组分析软件RDP4分析显示,以上后4株新型缺失株存在较大的基因重组,且重组部位和重组片段数量不相同;4株病毒均以高致病性毒株JXA1作为重组的主要亲本毒株,多数重组变化集中在Nsp2蛋白区域,在其他非结构蛋白和次要蛋白区域也可见部分重组变化。另外,Nsp9第561、586和592位氨基酸变异分析显示,该4株病毒在上述三个氨基酸位点与中国HP-PRRSV相符。本研究为深入探索PRRSV的遗传变异规律及相关生物学特性研究积累了数据。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2基因 Nsp9基因 新型缺失 基因重组

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Wnt/β-连环蛋白信号通路在哺乳动物毛囊发育中的调控作用 被引量：7

2

作者 李凡 陈晓阳 +1 位作者 杨国雨 李福昌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2186-2194,共9页

毛囊是哺乳动物皮肤上重要附属结构,是控制被毛生长最重要的器官。毛囊发育主要包括毛囊形态发生以及毛囊再生。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在毛囊发育中起重要作用,引起学者及研究机构的广泛关注。本文综述了Wnt/β-catenin... 毛囊是哺乳动物皮肤上重要附属结构,是控制被毛生长最重要的器官。毛囊发育主要包括毛囊形态发生以及毛囊再生。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在毛囊发育中起重要作用,引起学者及研究机构的广泛关注。本文综述了Wnt/β-catenin信号通路调节机制和核内激活,Wnt/β-catenin对毛囊形态发生和毛囊再生的调控作用以及成骨细胞抑制因子(Dkk)和营养物质对毛囊发育的调控作用。为Wnt/β-catenin信号通路调控哺乳动物毛囊发育的研究提供借鉴。 展开更多

关键词 毛囊 WNT/Β-CATENIN 形态发生 再生 Dkk

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鸭坦布苏病毒山东流行株的分离鉴定及其基因组序列分析 被引量：2

3

作者 赵君 姜胜男 +3 位作者 李刚 杨玉栋 李宁 刘思当 《中国动物检疫》 CAS 2021年第1期35-42,共8页

为了解山东省鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)的流行与变异情况,对2018年下半年至2019年上半年泰安、济宁和淄博等地送检的临床病鸭样品进行了DTMUV病原学检测,并对阳性病料进行病毒分离鉴定及分离株的全基因组序列分析。结果显... 为了解山东省鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)的流行与变异情况,对2018年下半年至2019年上半年泰安、济宁和淄博等地送检的临床病鸭样品进行了DTMUV病原学检测,并对阳性病料进行病毒分离鉴定及分离株的全基因组序列分析。结果显示:从102份样品中,共检测到8份DTMUV阳性,阳性率检出率为7.8%,从阳性病料中分离到3株DTMUV分离株;3个分离株基因全长均为10993 bp,彼此间的氨基酸同源性为99.2%~99.3%,与24个参考毒株的同源性为95.8%~99.9%,均属于中国株I型;与参考毒株相比,分离株的核衣壳蛋白C、囊膜蛋白E和非结构蛋白NS1的同源性相对较低,分别为86.1%~99.2%,95.0%~99.4%和92.3%~99.7%,同时存在数量不等的氨基酸突变位点,但关键的蛋白结构和潜在的糖基化位点无差异。结果表明,DTMUV在山东部分地区仍有流行,但流行毒株基因结构及致病特性与经典毒株相比无明显变化,但应持续关注和深入研究。 展开更多

关键词 鸭坦布苏病毒 分离鉴定 序列分析 遗传进化

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硒代蛋氨酸的生物学功能及其在猪生产中的应用 被引量：14

4

作者 张少涛 李敏 +2 位作者 解玉怀 程振峰 杨维仁 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第9期2824-2832,共9页

硒(Se)是机体必需的微量元素,其生理作用主要表现在抗氧化、免疫和抗肿瘤等方面。机体缺硒会引发骨骼肌变性或坏死、肝坏死和心肌纤维变性等疾病,因此,硒在人和动物营养方面越来越被人们重视。硒代蛋氨酸(Se-Met)作为有机硒的一种,比亚... 硒(Se)是机体必需的微量元素,其生理作用主要表现在抗氧化、免疫和抗肿瘤等方面。机体缺硒会引发骨骼肌变性或坏死、肝坏死和心肌纤维变性等疾病,因此,硒在人和动物营养方面越来越被人们重视。硒代蛋氨酸(Se-Met)作为有机硒的一种,比亚硒酸钠等无机硒具有更高的生物利用率和更低的毒性,是替代无机硒的有效有机硒源。应现阶段动物生产中对硒的需要,作者以Se-Met为研究对象,介绍了Se-Met在动物机体中的吸收代谢机制,并在此基础上与无机硒进行了比较分析,突出了Se-Met作为有机补硒剂的优越性;简述了Se-Met在机体抗氧化、免疫和抗肿瘤方面的功能、作用机制以及在猪生产中的应用效果;并进一步阐释了Se-Met在猪生产中的应用现状,通过对日增重、日采食量和料重比等生长指标,以及猪肉的pH、滴水损失、硒沉积量和肉色等肉品质指标的分析,进一步确定了Se-Met在猪生产中广泛应用的可能性,为今后猪营养中Se-Met等有机硒广泛替代无机硒提供了参考依据和理论基础,并期望为后续研究提供参考。 展开更多

关键词 硒代蛋氨酸 吸收代谢 生物学功能 猪生产

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我国猪群H1N1亚型流感病毒流行情况与生物学特性 被引量：6

5

作者 赵玉仲 桑浩田 +3 位作者 肖一红 刘思当 韩乐斌 侯衍猛 《中国动物检疫》 CAS 2023年第1期35-41,共7页

感染猪群的流感病毒(swine influenza virus,SIV)对养猪业和公共卫生均构成一定威胁。对H1N1亚型SIV监测发现,经典猪H1N1(classical swine H1N1,CS H1N1)、欧亚类禽H1N1(Eurasian avian-like H1N1,EA H1N1)、人源H1N1和2009年大流行H1N1... 感染猪群的流感病毒(swine influenza virus,SIV)对养猪业和公共卫生均构成一定威胁。对H1N1亚型SIV监测发现,经典猪H1N1(classical swine H1N1,CS H1N1)、欧亚类禽H1N1(Eurasian avian-like H1N1,EA H1N1)、人源H1N1和2009年大流行H1N1(2009 pandemic H1N1,pdm/09 H1N1)亚型流感病毒均在我国猪群内传播,并且这些SIV相互间不断发生基因重组。一些H1N1亚型SIV会偶发性引起人类感染,对公共卫生存在潜在威胁。此外,H1N1亚型SIV还会引发犬和水貂等动物的感染。经动物模型试验发现,不同H1N1亚型SIV在小鼠、鸡、猪和雪貂中的致病性及传播能力不同,其中一些SIV分离株显示出致死性,需要对其进行生物学特征研究,评估其对人类的潜在风险。SIV导致的猪死亡率不高,因而对其关注较少。但是禽源和哺乳动物源流感病毒可以在猪体内重组为可引起人类大流行的流感病毒毒株,因此应该及时了解SIV的流行情况与生物学特性,并做好相应的控制措施,以减少经济损失,避免具有大流行潜力毒株出现。本文回顾了H1N1亚型SIV的流行情况和生物学特征,以期为控制其流行提供理论依据。 展开更多

关键词 猪流感病毒 H1N1亚型 流行病学 生物学特性

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规模化猪场疾病风险分析

6

作者 孟凡亮 王玉超 +6 位作者 古金元 彭涛 王宏宇 马梓承 刘照虎 胡东方 刘思当 《猪业科学》 2018年第4期137-138,共2页

近年来生猪规模化养殖快速发展,养猪业生产形势较好,连续3年盈利,效益明显好于预期,给养猪业带来了前所未有的经济效益,可以说是百年不遇的发展机遇期。机遇与风险始终相伴,风险与利润又是一个矛盾统一体,高回报往往也意味着高风险,这... 近年来生猪规模化养殖快速发展,养猪业生产形势较好,连续3年盈利,效益明显好于预期,给养猪业带来了前所未有的经济效益,可以说是百年不遇的发展机遇期。机遇与风险始终相伴,风险与利润又是一个矛盾统一体,高回报往往也意味着高风险,这就要求猪场经营者既要有敢于担当的勇气,在风险中抢抓机遇,在风险中创造利润,化风险为利润;又要有防范风险的意识,管理风险的智慧,驾驭风险的能力,把风险降到最低。 展开更多

关键词 风险分析 规模化猪场 疾病 经济效益 规模化养殖 生产形势 管理风险 养猪业

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日粮非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维比例对德州驴生产性能、营养物质表观消化率及血清生化指标的影响 被引量：1

7

作者 杨泉 王云 +2 位作者 张晨 张桂国 张崇玉 《中国饲料》 北大核心 2024年第6期46-50,共5页

文章旨在探究日粮非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维比例(NFC/NDF)对德州驴生产性能、营养物质表观消化率及血清生化指标的影响。试验选用7月龄健康状况良好、体重(116.24±9.5)kg的德州驴30头,随机分为3组,每组10头,分别饲喂NFC/ND... 文章旨在探究日粮非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维比例(NFC/NDF)对德州驴生产性能、营养物质表观消化率及血清生化指标的影响。试验选用7月龄健康状况良好、体重(116.24±9.5)kg的德州驴30头,随机分为3组,每组10头,分别饲喂NFC/NDF为0.38、0.55和0.91的3种颗粒型全混合日粮(TMR)。试验为期45 d,其中预饲期15 d,正试期30 d,每头驴每天饲喂3.5 kg TMR颗粒饲料。结果表明,德州驴在采食3种NFC/NDF日粮时,0.91组日增重、料重比和经济效益优于0.55组和0.38组(P<0.05);德州驴在采食3种NFC/NDF日粮时,0.91组对消化能(DE)、干物质(DM)、有机物(OM)、粗蛋白质(CP)、无氮浸出物(NFE)、碳水化合物(CHO)和中性洗涤纤维(NDF)的表观消化率均显著高于0.55组和0.38组(P<0.05);0.55组NFE、CHO、NDF和NFC的表观消化率显著高于0.38组(P<0.05);德州驴在采食3种NFC/NDF日粮时,血清乳酸脱氢酶(LDH)和尿素氮(UIEA)含量随着日粮NFC水平升高而降低,葡萄糖(GLU)、总胆固醇(TCHO)和低密度脂蛋白(LDL)含量随NFC水平的升高而升高。由此可见,在本试验日粮NFC/NDF(0.38~0.91)范围内,饲喂高NFC/NDF(0.91)日粮能提高德州驴的平均日增重和经济效益,同时提高日粮营养物质的表观消化率。 展开更多

关键词 NCF/NDF 德州驴 生产性能 表观消化率 血清生化

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饲粮蛋氨酸水平对安哥拉兔产毛性能和毛囊发育的影响 被引量：1

8

作者 张莉蕊 张北育 +4 位作者 李玉娟 刘永需 赵红 李福昌 刘磊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3024-3031,共8页

旨在探究饲粮中蛋氨酸添加水平对安哥拉兔产毛性能和毛囊发育的影响。选取9月龄体重相近、生长状况良好的安哥拉兔200只,公母各半,随机分为5个处理,每个处理40个重复,每个重复1只。对照组饲喂基础饲粮(蛋氨酸含量为0.26%),试验组在基础... 旨在探究饲粮中蛋氨酸添加水平对安哥拉兔产毛性能和毛囊发育的影响。选取9月龄体重相近、生长状况良好的安哥拉兔200只,公母各半,随机分为5个处理,每个处理40个重复,每个重复1只。对照组饲喂基础饲粮(蛋氨酸含量为0.26%),试验组在基础饲粮中分别添加0.15%、0.30%、0.45%和0.60%的蛋氨酸(试验组饲粮中蛋氨酸的总体水平分别为0.41%、0.56%、0.71%和0.86%),试验期70 d。试验结束后计算生长性能相关指标并采集毛发和皮肤样品,检测兔毛品质、皮肤毛囊密度以及毛囊发育相关基因的表达量。结果表明:与对照组相比,饲粮中添加0.30%和0.45%蛋氨酸显著提高了安哥拉兔的平均日采食量(P<0.05);与对照组相比,饲粮中添加0.15%蛋氨酸显著提高了安哥拉兔毛的伸长度和伸长率(P<0.05),显著降低了安哥拉兔初级毛囊密度(P<0.05);饲粮中添加0.30%蛋氨酸显著提高了安哥拉兔的产毛率和次级毛囊密度/初级毛囊密度(S/P)(P<0.05),显著降低了安哥拉兔毛25μm以上纤维含量、粗毛率和初级毛囊密度(P<0.05);饲粮中添加0.45%蛋氨酸显著提高了安哥拉兔的料毛比、伸长度、伸长率和S/P(P<0.05),显著降低了安哥拉兔毛25μm以上纤维含量、粗毛率和初级毛囊密度(P<0.05)。此外,与对照组相比,饲粮中添加0.30%蛋氨酸显著上调了安哥拉兔皮肤中表皮生长因子(EGF)mRNA表达水平(P<0.05)。综上所述,饲粮中适宜的蛋氨酸添加水平能够提高安哥拉兔的产毛性能,改善毛品质;促进家兔毛囊发育,EGF信号可能参与此过程。基于本研究,建议蛋氨酸在安哥拉兔饲粮中适宜的添加量为0.30%(饲粮中蛋氨酸的总体水平为0.56%)。 展开更多

关键词 安哥拉兔 蛋氨酸 产毛性能 毛囊发育

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猪流感病毒的演化 被引量：1

9

作者 赵玉仲 韩乐斌 +3 位作者 桑浩田 刘思当 肖一红 侯衍猛 《中国动物检疫》 CAS 2024年第3期80-88,共9页

猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)是感染猪的一种。呼吸道病毒,可对公共卫生产生重要影响。以往研究通过全基因组测序以及分子生物学、流行病学等多方面的手段,全面揭示了SIV的演化进程。为了更好地理解和应对SIV演化,对其演化历... 猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)是感染猪的一种。呼吸道病毒,可对公共卫生产生重要影响。以往研究通过全基因组测序以及分子生物学、流行病学等多方面的手段,全面揭示了SIV的演化进程。为了更好地理解和应对SIV演化,对其演化历程进行了简要回顾,系统梳理了其分类、基本特征、演化及流行。通过对SIV演化的深入分析,发现其基因变异频率较高,不断发生基因重配和突变,推动病毒不断演化。此外,在猪群中发现了多种亚型SIV,而且不同地区的SIV演化存在显著差异,其中一些地区的SIV可能存在感染人的潜在风险。总体而言,SIV演化是一个复杂而动态的过程,其演化趋势可能对人类和动物健康构成潜在威胁。因此,加强对SIV演化的研究,提高对其监测和控制的能力,对于维护畜牧业健康发展和公共卫生安全具有极为重要的意义。 展开更多

关键词 猪流感病毒 演化 基因重配 基因突变

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不同饲粮铜水平对安哥拉兔生产性能及毛囊发育的影响

10

作者 王小松 李冬 +5 位作者 李淑 陈佳力 刘永需 赵红 李福昌 刘磊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3032-3039,共8页

旨在研究饲粮不同水平铜对安哥拉兔生产性能以及毛囊发育的影响。选取5月龄安哥拉兔180只,随机分成5组(每组36个重复,每个重复1只),分别饲喂铜添加量为0、5、10、20和40 mg·kg^(-1)的日粮,预试期3 d,正式试验76 d。结果显示:1)当... 旨在研究饲粮不同水平铜对安哥拉兔生产性能以及毛囊发育的影响。选取5月龄安哥拉兔180只,随机分成5组(每组36个重复,每个重复1只),分别饲喂铜添加量为0、5、10、20和40 mg·kg^(-1)的日粮,预试期3 d,正式试验76 d。结果显示:1)当铜的添加水平为5 mg·kg^(-1)时,产毛量达到最大值,料毛比也相对较低(P<0.01),但是对安哥拉兔平均日采食量无显著影响(P>0.05)。2)与对照组相比,铜添加量为40 mg·kg^(-1)时,显著增加了兔毛的断裂强力、断裂强度、断裂功(P<0.01),显著影响了伸长、伸长率(P<0.05),改善了兔毛品质。3)饲粮中添加铜显著增加了次级毛囊密度(P<0.01)和总毛囊密度(P<0.05),当铜的添加量为5 mg·kg^(-1)时,总毛囊密度和次级毛囊密度达到最大值。饲粮中添加5 mg·kg^(-1)的铜显著增加了Wnt10b、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA表达量(P<0.01),显著增加了角蛋白相关蛋白6-1基因(Kap6.1)的表达量(P<0.05),铜添加量为40 mg·kg^(-1)时,mTOR的表达量达到最大值。铜的添加对表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子-β2(TGF-β2)基因相对表达均无显著影响(P>0.05)。综上所述,饲料中添加铜可以提高安哥拉兔的产毛性能,改善兔毛品质,促进皮下毛囊发育,家兔可能通过Wnt10b、mTOR和Kap6.1基因来调控毛囊发育。在本试验条件下,安哥拉兔饲粮中铜水平为13.72 mg·kg^(-1)最为适宜。 展开更多

关键词 安哥拉兔 铜 生产性能 毛囊发育

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反转录差异显示技术及其方法的改进 被引量：6

11

作者 朱靖 杜立新 《动物医学进展》 CSCD 2005年第1期19-21,共3页

运用mRNA反转录差异显示技术可以了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况 ,为研究生命活动过程提供重要信息。文章对差异显示反转录聚合酶链式反应技术的基本原理 ,优点与缺点 ,以及近年来对该技术涉及的R... 运用mRNA反转录差异显示技术可以了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况 ,为研究生命活动过程提供重要信息。文章对差异显示反转录聚合酶链式反应技术的基本原理 ,优点与缺点 ,以及近年来对该技术涉及的RT PCR方法、引物设计、PCR反应参数、电泳及差异条带的显示方法以及杂交方式进行了论述和评价 ,并对其应用前景进行了简单分析。 展开更多

关键词 反转录差异显示PCR 反向northern印迹 银染

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饲粮碘添加水平对獭兔氮代谢、血液成分及内脏器官发育的影响 被引量：3

12

作者 张伟 申垒 +5 位作者 刘公言 张斌 杨国雨 李淑 陈晓阳 李福昌 《中国饲料》 北大核心 2019年第13期34-37,共4页

为研究饲粮碘添加水平对獭兔氮代谢、血液成分及内脏器官发育的影响,试验选用体重相近的3月龄獭兔200只,随机分为5组(每组40个重复,每个重复1只试验兔),分别饲喂在基础饲粮中添加0、0.2、0.4、0.8、1.6 mg/kg碘(碘的添加形式为碘化钾)... 为研究饲粮碘添加水平对獭兔氮代谢、血液成分及内脏器官发育的影响,试验选用体重相近的3月龄獭兔200只,随机分为5组(每组40个重复,每个重复1只试验兔),分别饲喂在基础饲粮中添加0、0.2、0.4、0.8、1.6 mg/kg碘(碘的添加形式为碘化钾)的试验饲粮。预试期7 d,正试期53 d。结果表明:饲粮不同碘水平对獭兔的沉积氮(RN)有显著影响(P < 0.05),并且添加水平为0.8 mg/kg时达到最大值。饲粮碘的添加水平对獭兔血液中促甲状腺激素(TSH)、四碘甲腺原氨酸(T4)、游离态的四碘甲腺原氨酸(FT4)、三碘甲腺原氨酸(T3)有显著的影响(P < 0.05),并分别在添加水平为0.4、0.8、0.8 mg/kg和0.8 mg/kg时达到最大值。另外,饲粮不同碘水平对獭兔的内脏器官发育和脂肪沉积无显著影响(P> 0.05)。综合本试验测定指标,3~5月龄生长獭兔饲粮适宜的碘添加水平为0.8 mg/kg(饲粮中碘的实测值为0.92 mg/kg)。 展开更多

关键词 碘 獭兔 氮代谢 血液成分 内脏器官发育

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奶牛分子系谱构建或亲权鉴定的微卫星标记筛选 被引量：7

13

作者 殷彬 岳书俭 +3 位作者 俞英 曹巧巧 王中华 师科荣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期595-604,共10页

旨在利用较少的经过优化的遗传标记组合达到快速高效的亲缘鉴定,最终可有效应用于奶牛群体亲子鉴定与系谱构建。本研究从国际动物遗传学会(ISAG)数据库中初步选择了18个多态性较高的微卫星位点,经PCR优化验证获得可高效扩增的8个位点,... 旨在利用较少的经过优化的遗传标记组合达到快速高效的亲缘鉴定,最终可有效应用于奶牛群体亲子鉴定与系谱构建。本研究从国际动物遗传学会(ISAG)数据库中初步选择了18个多态性较高的微卫星位点,经PCR优化验证获得可高效扩增的8个位点,并检测其在300头中国荷斯坦牛群体中的多态性分布。这些微卫星位点的亲子鉴定效力检测结果表明,8个标记平均等位基因数为14.63,平均多态性信息含量(PIC)为0.747,群体平均观察杂合度(Ho)为0.718,平均期望杂合度(He)为0.773。3种不同情形下进行亲子鉴定时8个位点的结合排除概率(CPE)均≥0.990。8对父子牛亲权鉴定结果表明,利用该8个标记可以识别并剔除系谱中的错误记录。结合排除概率的分析结果表明,当微卫星位点数增加至4个(TGLA227、TGLA122、BMC1207、BM103)时,3种不同情形下的CPE均≥0.949,可以满足个别案例牛亲子鉴定的要求。群体分子系谱构建的结果表明,当微卫星位点数大于或等于6个时,群体内近交系数和总群体近交系数均明显升高。因此,在生产实践中推荐使用TGLA227、TGLA122、BMC1207、BM103、INRA037、INRA134位点进行小规模群体(<200)的分子系谱构建或亲权鉴定。 展开更多

关键词 中国荷斯坦牛 微卫星位点 排除概率 亲子鉴定

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基于玉米种植的生长育肥猪粪污农田承载力 被引量：5

14

作者 杜坤 焦洪超 +2 位作者 王晓鹃 赵景鹏 林海 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1049-1059,共11页

本研究旨在以生长育肥猪和玉米种植农田为模型,准确评定生长育肥猪粪肥养分的产生量和不同施肥量下玉米的生物产量及养分需求量,以此为基础建立基于粪肥还田利用的玉米种植农田粪肥承载系数。试验选取8头13周龄胎次和体重((33.2±3.... 本研究旨在以生长育肥猪和玉米种植农田为模型,准确评定生长育肥猪粪肥养分的产生量和不同施肥量下玉米的生物产量及养分需求量,以此为基础建立基于粪肥还田利用的玉米种植农田粪肥承载系数。试验选取8头13周龄胎次和体重((33.2±3.5) kg)相近的"杜×长×大"生长育肥猪进行饲养试验,分别于16和25周龄各进行一次消化试验,测定其粪、尿产量及粪肥氮、磷产生量。玉米种植试验设6个处理组,对照组施用化肥,负对照组不施肥,4个试验组分别按玉米种植全期氮标准需要量的100%、130%、160%和磷标准需要量的100%施用猪粪有机肥,分别在乳熟后期和完熟期测定玉米种植的氮、磷需求量,与猪粪肥氮、磷产生量拟合,测算粪肥农田承载系数。结果表明,按130%氮需求量施用猪粪有机肥,一季玉米种植乳熟后期和完熟期收获,对氮、磷的需求量分别为122.1、53.0 kg·hm^-2和190.2、62.8 kg·hm^-2,按130%氮施肥量下乳熟后期和完熟期收获的玉米农田承载系数,以N为基础为61.1头·hm^-2和95.2头·hm^-2,以P为基础为90.5头·hm^-2和107.3头·hm^-2,而且施用猪粪有机肥还可增加玉米生物产量,一定程度上增加玉米中氮、磷含量。因此,分别基于玉米对氮和磷的需求,单季玉米种植每公顷土地生长育肥猪的承载参数分别为95.2头和107.3头。 展开更多

关键词 生长育肥猪 粪污 还田 玉米种植 承载参数

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非洲猪瘟病毒p22蛋白表达、多克隆抗体制备及间接ELISA方法的建立 被引量：3

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作者 张凯 张春平 +6 位作者 戈胜强 孙春喜 程杰 伏春雨 王刚 牛星 彭军 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期270-279,共10页

【目的】试验旨在表达与纯化非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的结构蛋白p22,将其作为包被抗原建立ASFV抗体的间接ELISA检测方法,用于诊断非洲猪瘟。【方法】将ASFV p22编码基因KP177R的截短体(24―145位氨基酸)克隆至原... 【目的】试验旨在表达与纯化非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的结构蛋白p22,将其作为包被抗原建立ASFV抗体的间接ELISA检测方法,用于诊断非洲猪瘟。【方法】将ASFV p22编码基因KP177R的截短体(24―145位氨基酸)克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,将重组质粒pET-32a-p22转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经0.1 mmol/L IPTG诱导表达5 h,利用镍柱亲和纯化p22蛋白,并进行Western blotting鉴定。利用p22蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗血清,并以含p22全长基因的真核表达质粒pCAGGS-EGFP-fp22转染HEK293T细胞为抗原基质,利用间接免疫荧光(IFA)鉴定抗血清的反应性。以重组p22蛋白为包被抗原,优化最佳抗原包被浓度、待检血清稀释度、封闭条件、抗原抗体反应时间、酶标二抗工作浓度等参数,建立ASFV抗体间接ELISA检测方法,并对临床猪血清样品进行检测。【结果】ASFV p22截短蛋白在大肠杆菌中高水平表达,蛋白产量为0.85 mg/100 g菌体;p22蛋白具有良好的免疫原性,小鼠血清抗体效价为1∶12800。本研究建立的ELISA方法(p22-ELISA)的最佳抗原包被浓度为0.125μg/孔,最佳待检血清稀释度为1∶800,最佳酶标二抗稀释度为1∶10000;阴阳性临界值为0.384;与CSFV、PRRSV、PCV2、PRV等抗体阳性猪血清无交叉反应,说明特异性好;批内与批间变异系数均低于10%,表明重复性好。利用p22-ELISA方法检测了263份临床猪血清样品,与商品化ASFV抗体ELISA检测试剂盒的符合率为97.7%。【结论】本研究基于原核表达的p22截短体蛋白建立了用于检测ASFV抗体的间接ELISA方法,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为ASFV感染诊断和流行病学调查提供了技术支撑。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) p22蛋白 原核表达 间接ELISA 抗体

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仔猪圆环病毒病继发葡萄球菌感染的诊治 被引量：1

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作者 曹琦 李金璇 +2 位作者 于成龙 彭军 吴家强 《中国动物检疫》 CAS 2020年第9期118-122,共5页

2020年4月,山东省威海市某猪场发生一起以哺乳仔猪精神不振、体温升高以及头部、颈部、背部、四肢出现多处皮肤化脓性坏死结痂为基本特征的疾病,发病率为32.43%,病死率为16.67%。为确诊病原,探究病因,采集病猪血液与患处脓液进行生化试... 2020年4月,山东省威海市某猪场发生一起以哺乳仔猪精神不振、体温升高以及头部、颈部、背部、四肢出现多处皮肤化脓性坏死结痂为基本特征的疾病,发病率为32.43%,病死率为16.67%。为确诊病原,探究病因,采集病猪血液与患处脓液进行生化试验、药敏试验和胶体金试纸检测。结果显示:胶体金试纸检测为猪圆环病毒阳性,生化试验结果符合葡萄球菌特性,结合临床症状与剖检病变,确诊为猪圆环病毒病继发葡萄球菌感染。根据药敏试验结果,选用高敏感的头孢噻呋钠对病猪进行注射治疗,并在产房内外喷洒消毒液,同时全猪群紧急免疫接种猪圆环病毒Ⅱ型灭活疫苗,由此疫情得到有效控制。这提示,规模化猪场既要重视免疫抑制性疫病的控制,也要加强猪场环境卫生与猪群饲养管理。本研究可为猪圆环病毒病并继发细菌感染的诊断与治疗提供参考。 展开更多

关键词 猪圆环病毒病 葡萄球菌 哺乳仔猪 继发感染 实验室诊断 防治

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植物性神经对围着床期大鼠子宫中肥大细胞和组织胺含量的影响

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作者 黄丽波 张秀霞 +4 位作者 范晓杰 侯衍猛 姜淑贞 鲁璇 袁学军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2409-2415,共7页

本研究旨在以肥大细胞和组织胺为指标探讨大鼠围着床期植物性神经与子宫局部细胞免疫的关系。选择180日龄,体重为300～350g的性成熟Wistar雌性大鼠90只,随机分为对照、假手术处理和手术处理(n=30)3组,手术处理为孕前切除支配子宫的植物... 本研究旨在以肥大细胞和组织胺为指标探讨大鼠围着床期植物性神经与子宫局部细胞免疫的关系。选择180日龄,体重为300～350g的性成熟Wistar雌性大鼠90只,随机分为对照、假手术处理和手术处理(n=30)3组,手术处理为孕前切除支配子宫的植物性神经(肠系膜后神经节节后纤维和盆神经丛节前纤维),伤口愈合,开始合笼试验。在妊娠4～6d,无菌条件下,取出大鼠子宫和卵巢,观察排卵、胚胎着床情况变化,通过细胞染色和ELISA方法测定肥大细胞数量和组织胺释放量。结果表明:正常大鼠子宫中组织胺自发释放量和总含量在着床(d5)时最低。肥大细胞数量也呈现相似的变化。神经切除后,自发释放组织胺量在妊娠4～6d数值明显下降,且在妊娠4、6d与对照组相比较差异显著(P<0.05);可释放组织胺总含量在着床前(d4)极显著降低(P<0.01),且胚胎着床数量明显减少或延迟;肥大细胞数量在着床前后与组织胺总含量有相似的变化。这些结果说明,切除神经降低了着床前肥大细胞数量和组织胺水平,改变了子宫局部免疫水平,进而引起了胚胎着床减少或延迟。综上表明,支配子宫的植物性神经可在着床前上调子宫肥大细胞数量和组织胺水平,控制子宫局部免疫水平,在胚胎着床中起重要调控作用。 展开更多

关键词 大鼠 子宫 植物性神经 肥大细胞 组织胺

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稳定高效表达猪CD163的Marc-145细胞系的构建与鉴定

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作者 吴香菊 李芳韬 +9 位作者 陈蕾 丛晓燕 孙文博 于江 陈智 郭立辉 吴家强 杜以军 赵孝民 王金宝 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第8期2074-2080,共7页

试验旨在构建一株高效表达猪CD163(pCD163)的Marc-145细胞系,为猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的临床分离和疫苗生产奠定基础。根据GenBank中序列设计引物从猪肺泡巨噬细胞(PAM)... 试验旨在构建一株高效表达猪CD163(pCD163)的Marc-145细胞系,为猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的临床分离和疫苗生产奠定基础。根据GenBank中序列设计引物从猪肺泡巨噬细胞(PAM)中扩增pCD163基因,将其插入真核表达载体pCI-neo构建真核表达质粒pCIpCD163,将该重组质粒转染Marc-145细胞,通过G418筛选、单克隆化并扩大培养筛选获得表达pCD163的Marc-145细胞系,IFA、Western blotting鉴定其表达情况。IFA结果显示,构建的pCD163-Marc细胞系中荧光明显亮于普通Marc-145细胞;Western blotting结果显示,pCD163-Marc细胞系中CD163蛋白表达量约为对照Marc-145细胞中CD163蛋白表达量的8.7倍。且该细胞系可稳定传至20代,各代次之间表达量无差异。证明高效表达猪CD163的Marc-145细胞系构建成功。 展开更多

关键词 MARC-145 CD163 稳定细胞系

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一例牙鲆淋巴囊肿病例的诊断及病毒MCP基因遗传进化分析 被引量：1

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作者 孟凡亮 曹龙龙 +5 位作者 焦秋林 李焱 王宏宇 刘照虎 马梓承 刘思当 《中国动物检疫》 CAS 2019年第10期98-103,共6页

2019年1月,山东省某牙鲆鱼场出现疑似淋巴囊肿病例。患病鱼体表长有灰白色菜花样瘤状物,死亡率超过30%,给养殖场造成了较为严重的经济损失。为确定发病原因,对该鱼场病死鱼进行了病理组织学诊断和病毒检测,并对病毒MCP基因进行了序列测... 2019年1月,山东省某牙鲆鱼场出现疑似淋巴囊肿病例。患病鱼体表长有灰白色菜花样瘤状物,死亡率超过30%,给养殖场造成了较为严重的经济损失。为确定发病原因,对该鱼场病死鱼进行了病理组织学诊断和病毒检测,并对病毒MCP基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果显示:眼观及组织学病变符合淋巴囊肿病的病变特征;所检测到的病毒与选定的参考毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为78.7%~99.9%和86.8%~100%。MCP基因遗传进化分析显示,检测到的病毒与LCDV-C、JF00Kuma、JF03Yoshi、JF03GunNeA、JF、LCDV-K1等毒株同属于淋巴囊肿病毒基因II型,且与我国分离株LCDV-C有较高的同源性。经综合诊断,确定该流行病由淋巴囊肿病毒基因II型所致。该研究为该病的综合诊断及流行病学调查提供了新资料,为下一步进行该病毒相关分子生物学研究以及疫苗制备等提供了理论依据。 展开更多

关键词 淋巴囊肿病毒 牙鲆 综合诊断 MCP基因 病理组织学 遗传进化分析

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检测鸡TRIM25蛋白的免疫组化方法

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作者 禇颖 马文杰 +4 位作者 胡卫国 陈茹 邱建华 郭慧君 李宏梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期865-870,共6页

为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免... 为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免疫组化方法,对鸡肺、脾、肝组织中TRIM25蛋白进行检测。结果显示,克隆的鸡TRIM25抗原基因大小为1 012bp,构建的重组表达质粒能够在大肠杆菌中稳定表达,经纯化后的重组蛋白质能够诱导兔和小鼠产生效价为1∶106以上的血清抗体,该血清抗体免疫组化检测发现鸡肺、脾和肝组织中均有不同程度的TRIM25蛋白表达,在肺组织中主要存在肺泡周围的内皮细胞、淋巴细胞等的细胞质内;脾组织主要出现在脾淋巴细胞和血管内皮细胞等的细胞质中;肝组织中主要出现在肝小叶肝细胞、淋巴细胞以及血管内皮细胞细胞质中。该研究为深入研究鸡TRIM25蛋白的组织分布、动态表达和生物学活性提供物质基础和方法依据。 展开更多

关键词 鸡 TRIM25 多克隆抗体 免疫组化

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