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Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
1
作者
娄忠子
王天户
+1 位作者
董李民
刘思当
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第4期509-514,共6页
采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免...
采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免疫荧光试验（IFA）检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光。提取全基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框（ORF1）、2号开放阅读框（ORF2）和全基因组序列扩增,得到长度分别约为999bp、749bp和1767bp左右的产物条带。将产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2。测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp。DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于95.4%-98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%-98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%-98.4%之间。
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关键词
猪Ⅱ型圆环病毒
双抗体夹心ELISA
PCR
病毒分离
间接免疫荧光试验
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职称材料
题名
Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
1
作者
娄忠子
王天户
董李民
刘思当
机构
山东农业大学动物科技学院基础兽医系
莱阳市河洛镇
兽医
站
出处
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第4期509-514,共6页
文摘
采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免疫荧光试验（IFA）检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光。提取全基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框（ORF1）、2号开放阅读框（ORF2）和全基因组序列扩增,得到长度分别约为999bp、749bp和1767bp左右的产物条带。将产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2。测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp。DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于95.4%-98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%-98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%-98.4%之间。
关键词
猪Ⅱ型圆环病毒
双抗体夹心ELISA
PCR
病毒分离
间接免疫荧光试验
Keywords
PCV2
Antigen-capture ELISA
PCR
Virus isolation
Indirect fluorescent antibody method
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
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1
Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
娄忠子
王天户
董李民
刘思当
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007
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