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Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
1
作者
娄忠子
王天户
+1 位作者
董李民
刘思当
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第4期509-514,共6页
采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免...
采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免疫荧光试验（IFA）检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光。提取全基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框（ORF1）、2号开放阅读框（ORF2）和全基因组序列扩增,得到长度分别约为999bp、749bp和1767bp左右的产物条带。将产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2。测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp。DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于95.4%-98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%-98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%-98.4%之间。
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关键词
猪Ⅱ型圆环病毒
双抗体夹心ELISA
PCR
病毒分离
间接免疫荧光试验
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职称材料
还原型辅酶Ⅱ组化方法的研究
2
作者
邱建华
尹逊河
+2 位作者
常现雨
王翠梅
臧福学
《山东畜牧兽医》
2004年第2期3-4,共2页
为了提高还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组化方法的效果和敏感性 ,选用合适的操作条件 ,观察和比较操作中各种参数改变对反应结果的影响。发现操作过程中各个环节和因素的变化均会不同程度地影响试验结果。为此对整个操作过程 ,从...
为了提高还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组化方法的效果和敏感性 ,选用合适的操作条件 ,观察和比较操作中各种参数改变对反应结果的影响。发现操作过程中各个环节和因素的变化均会不同程度地影响试验结果。为此对整个操作过程 ,从组织的取材、固定、切片、反应和反应后处理过程等操作步骤的最佳条件进行了探讨。
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关键词
畜禽
还原型辅酶Ⅱ
一氧化氮
一氧化氮合酶
组织化学
黄递酶
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职称材料
题名
Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
1
作者
娄忠子
王天户
董李民
刘思当
机构
山东农业大学
动物
科技
学院
基础
兽医
系
莱阳市河洛镇
兽医
站
出处
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第4期509-514,共6页
文摘
采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免疫荧光试验（IFA）检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光。提取全基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框（ORF1）、2号开放阅读框（ORF2）和全基因组序列扩增,得到长度分别约为999bp、749bp和1767bp左右的产物条带。将产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2。测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp。DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于95.4%-98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%-98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%-98.4%之间。
关键词
猪Ⅱ型圆环病毒
双抗体夹心ELISA
PCR
病毒分离
间接免疫荧光试验
Keywords
PCV2
Antigen-capture ELISA
PCR
Virus isolation
Indirect fluorescent antibody method
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
还原型辅酶Ⅱ组化方法的研究
2
作者
邱建华
尹逊河
常现雨
王翠梅
臧福学
机构
山东农业大学动物科技学院基础兽医学系
莘县科学技术局
烟台
农业
学校
平度市畜牧局
出处
《山东畜牧兽医》
2004年第2期3-4,共2页
文摘
为了提高还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组化方法的效果和敏感性 ,选用合适的操作条件 ,观察和比较操作中各种参数改变对反应结果的影响。发现操作过程中各个环节和因素的变化均会不同程度地影响试验结果。为此对整个操作过程 ,从组织的取材、固定、切片、反应和反应后处理过程等操作步骤的最佳条件进行了探讨。
关键词
畜禽
还原型辅酶Ⅱ
一氧化氮
一氧化氮合酶
组织化学
黄递酶
分类号
S852.2 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
娄忠子
王天户
董李民
刘思当
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007
0
在线阅读
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职称材料
2
还原型辅酶Ⅱ组化方法的研究
邱建华
尹逊河
常现雨
王翠梅
臧福学
《山东畜牧兽医》
2004
0
在线阅读
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职称材料
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