期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
牛IL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其活性
被引量：
6
1
作者
田兆菊
郑玉姝
+1 位作者
胡敬东
赵宏坤
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期277-279,共3页
目的:在杆状病毒表达载体中表达牛白细胞介素-18(bovine interleukine-18,BoIL-18)成熟蛋白基因,并鉴定其生物学活性。方法:设计一对特异性引物,将编码BoIL-18的成熟蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBac HTb上,构建重组质粒repFas...
目的:在杆状病毒表达载体中表达牛白细胞介素-18(bovine interleukine-18,BoIL-18)成熟蛋白基因,并鉴定其生物学活性。方法:设计一对特异性引物,将编码BoIL-18的成熟蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBac HTb上,构建重组质粒repFastBac HTb-18,转化至DH10Bac感受态细胞中得到重组Bacmid(Bacmid-BoIL18)。在Cellfectin作用下,将Bacmid-BoIL18转染昆虫细胞sf9获得重组杆状病毒,然后将重组杆状病毒感染sf9,感染后不同时间收获sf9细胞,进行SDS-PAGE电泳,分析表达情况;用BoIL-18的原核表达产物作为抗原制备的兔多克隆抗体进行Western blot分析;将纯化的表达产物对牛外周血单个核细胞(PBMC)进行细胞增殖试验,对健康牛脾进行IFN-γ诱生试验,初步分析表达产物的生物学活性。结果:BoIL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中获得了表达,经薄层凝胶扫描分析证实,表达量占总蛋白的21.3%;Western blot分析证明,在相对分子质量(Mr)约为26 000处有一条特异性条带。生物学活性分析表明,纯化的表达产物可明显增强淋巴细胞增殖,促进IFN-γ的产生。结论:BoIL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中获得了表达,表达产物具有良好的生物学活性。
展开更多
关键词
BoIL-18成熟蛋白基因
杆状病毒表达载体系统
昆虫细胞
生物学活性
在线阅读
下载PDF
职称材料
鸡IL-2基因的扩增、表达及生物学活性鉴定
被引量：
6
2
作者
郑玉姝
赵朴
赵宏坤
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期591-593,共3页
目的:扩增鸡IL2基因,并在大肠杆菌中表达及活性鉴定。方法:从ConA激活的AA肉鸡脾淋巴细胞中提取mRNA,以RTPCR法扩增鸡IL2cDNA,将其克隆到原核表达载体pGEX6P1中,构建重组质粒pGEXIL2。以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达。并用淋...
目的:扩增鸡IL2基因,并在大肠杆菌中表达及活性鉴定。方法:从ConA激活的AA肉鸡脾淋巴细胞中提取mRNA,以RTPCR法扩增鸡IL2cDNA,将其克隆到原核表达载体pGEX6P1中,构建重组质粒pGEXIL2。以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达。并用淋巴细胞增殖试验及Westernblot检测表达产物的生物学活性。结果:以重组质粒转化大肠杆菌经IPTG诱导后,经SDSPAGE后薄层扫描分析证实,融合表达产物GSTIL2表达量占表达菌菌体总蛋白的30.8%。Westernblot分析表明,在相对分子质量(Mr)为42000处有一条特异性的带。经淋巴细胞增殖试验证实,该表达产物可明显增强淋巴细胞增殖。结论:鸡IL2基因在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物具有良好的生物学活性。
展开更多
关键词
鸡白介素-2
克隆
原核表达
生物学活性
在线阅读
下载PDF
职称材料
人工分子伴侣辅助鸡白细胞介素18重组蛋白的复性
被引量：
1
3
作者
王新华
胡敬东
+2 位作者
孔娜
李宏梅
赵宏坤
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期344-347,共4页
目的:研究表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白。方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞...
目的:研究表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白。方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达。表达产物主要以包涵体的形式存在。包涵体经超声波破碎、洗涤后以6mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性,然后利用人工分子伴侣系统辅助蛋白复性。复性产物经透析纯化后,利用淋巴细胞增殖试验来检测其活性。结果:经SDS-PAGE分析表明,表达产物是与ChIL-18重组蛋白相符的Mr约44000的蛋白条带。利用人工分子伴侣系统辅助复性,鸡IL-18重组蛋白获得了42·54%复性率。鸡淋巴细胞增殖试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导增殖作用。结论:人工分子伴侣系统能够较好地辅助鸡IL-18重组蛋白复性,获得较高的复性率。其产物具有良好的生物学活性,为下一步鸡IL-18重组蛋白的应用研究奠定了试验基础。
展开更多
关键词
人工分子伴侣系统
鸡白细胞介素18重组蛋白
Β-环糊精
复性
表面活性剂
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
牛IL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其活性
被引量：
6
1
作者
田兆菊
郑玉姝
胡敬东
赵宏坤
机构
山东农业大学动物科技学院传染病实验室
河南
科技
学院
动物
科学
学院
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期277-279,共3页
基金
山东省重大科技专项畜禽重大疫病综合防治技术研究与应用(2005年)
高等学校科技创新工程重大项目培育资金项目(2006年)
文摘
目的:在杆状病毒表达载体中表达牛白细胞介素-18(bovine interleukine-18,BoIL-18)成熟蛋白基因,并鉴定其生物学活性。方法:设计一对特异性引物,将编码BoIL-18的成熟蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBac HTb上,构建重组质粒repFastBac HTb-18,转化至DH10Bac感受态细胞中得到重组Bacmid(Bacmid-BoIL18)。在Cellfectin作用下,将Bacmid-BoIL18转染昆虫细胞sf9获得重组杆状病毒,然后将重组杆状病毒感染sf9,感染后不同时间收获sf9细胞,进行SDS-PAGE电泳,分析表达情况;用BoIL-18的原核表达产物作为抗原制备的兔多克隆抗体进行Western blot分析;将纯化的表达产物对牛外周血单个核细胞(PBMC)进行细胞增殖试验,对健康牛脾进行IFN-γ诱生试验,初步分析表达产物的生物学活性。结果:BoIL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中获得了表达,经薄层凝胶扫描分析证实,表达量占总蛋白的21.3%;Western blot分析证明,在相对分子质量(Mr)约为26 000处有一条特异性条带。生物学活性分析表明,纯化的表达产物可明显增强淋巴细胞增殖,促进IFN-γ的产生。结论:BoIL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中获得了表达,表达产物具有良好的生物学活性。
关键词
BoIL-18成熟蛋白基因
杆状病毒表达载体系统
昆虫细胞
生物学活性
分类号
S852 [农业科学—基础兽医学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
鸡IL-2基因的扩增、表达及生物学活性鉴定
被引量：
6
2
作者
郑玉姝
赵朴
赵宏坤
机构
山东农业大学动物科技学院传染病实验室
泰山医
学院
基础部生物技术教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期591-593,共3页
文摘
目的:扩增鸡IL2基因,并在大肠杆菌中表达及活性鉴定。方法:从ConA激活的AA肉鸡脾淋巴细胞中提取mRNA,以RTPCR法扩增鸡IL2cDNA,将其克隆到原核表达载体pGEX6P1中,构建重组质粒pGEXIL2。以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达。并用淋巴细胞增殖试验及Westernblot检测表达产物的生物学活性。结果:以重组质粒转化大肠杆菌经IPTG诱导后,经SDSPAGE后薄层扫描分析证实,融合表达产物GSTIL2表达量占表达菌菌体总蛋白的30.8%。Westernblot分析表明,在相对分子质量(Mr)为42000处有一条特异性的带。经淋巴细胞增殖试验证实,该表达产物可明显增强淋巴细胞增殖。结论:鸡IL2基因在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物具有良好的生物学活性。
关键词
鸡白介素-2
克隆
原核表达
生物学活性
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
人工分子伴侣辅助鸡白细胞介素18重组蛋白的复性
被引量：
1
3
作者
王新华
胡敬东
孔娜
李宏梅
赵宏坤
机构
山东农业大学动物科技学院传染病实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期344-347,共4页
基金
国家"十一五"科技支撑计划重大项目资助(2006BAK02A21)
山东省科技攻关重大项目资助(SDSP2005041005)
山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助(2006BS06015)
文摘
目的:研究表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白。方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达。表达产物主要以包涵体的形式存在。包涵体经超声波破碎、洗涤后以6mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性,然后利用人工分子伴侣系统辅助蛋白复性。复性产物经透析纯化后,利用淋巴细胞增殖试验来检测其活性。结果:经SDS-PAGE分析表明,表达产物是与ChIL-18重组蛋白相符的Mr约44000的蛋白条带。利用人工分子伴侣系统辅助复性,鸡IL-18重组蛋白获得了42·54%复性率。鸡淋巴细胞增殖试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导增殖作用。结论:人工分子伴侣系统能够较好地辅助鸡IL-18重组蛋白复性,获得较高的复性率。其产物具有良好的生物学活性,为下一步鸡IL-18重组蛋白的应用研究奠定了试验基础。
关键词
人工分子伴侣系统
鸡白细胞介素18重组蛋白
Β-环糊精
复性
表面活性剂
Keywords
artificial molecular chaperone
chicken IL-18recombination protein
β-cyclodextrin
refold-ing
surfactant
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛IL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其活性
田兆菊
郑玉姝
胡敬东
赵宏坤
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鸡IL-2基因的扩增、表达及生物学活性鉴定
郑玉姝
赵朴
赵宏坤
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人工分子伴侣辅助鸡白细胞介素18重组蛋白的复性
王新华
胡敬东
孔娜
李宏梅
赵宏坤
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
