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山东地区羊绿脓杆菌的分离鉴定及系统发育分析
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作者 姜晓东 朱瑞良 +4 位作者 邵明旭 刘丽萍 王传文 于翠莲 迟珊珊 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第S1期329-332,共4页
近两年,山东省规模化羊场羊患慢性化脓性肺炎病例频繁出现,为了探明其病原及特点,在流行病学调查基础上,对山东省6个地区10个规模化羊场的病、死羊进行临床症状观察、病理学检查,对所分离的菌株进行形态特征、理化特性检查及药敏试验、... 近两年,山东省规模化羊场羊患慢性化脓性肺炎病例频繁出现,为了探明其病原及特点,在流行病学调查基础上,对山东省6个地区10个规模化羊场的病、死羊进行临床症状观察、病理学检查,对所分离的菌株进行形态特征、理化特性检查及药敏试验、致病性试验和16S rRNA基因的分子鉴定。结果显示:从剖检病死羊的肺、肝、气管等组织中分离出6株细菌(分别命名为PA1~PA6),分离菌株镜检均为革兰氏阴性、短杆菌,对庆大霉素高度敏感,对小白鼠具有较强致病作用。综合流行病学和生化试验结果等判定,该6株分离菌均为绿脓杆菌。对6株绿脓杆菌16S rRNA序列分析表明,该6株分离菌与已知的绿脓杆菌16S rRNA序列的同源性为99.9%~100%,与报道的绿脓杆菌菌株B136-33、YMD-4以及LCQ-4的序列位于一个分支上,属于一个亚群,其中与北京株B136-33的进化关系更近,核苷酸同源性为100%。 展开更多
关键词 绿脓杆菌 分离 鉴定 16SrRNA 系统发育分析
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禽波氏杆菌外膜蛋白A的克隆测序与生物信息分析 被引量:5
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作者 谭燕玲 朱瑞良 +4 位作者 王慧 王新建 魏凯 孙振红 盛鹏程 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期544-550,共7页
本文旨在克隆禽波氏杆菌外膜蛋白OmpA的编码基因,并预测OmpA蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨禽波氏杆菌外膜蛋白OmpA在免疫保护中所起的作用。作者对禽波氏杆菌的外膜蛋白ompA基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学相... 本文旨在克隆禽波氏杆菌外膜蛋白OmpA的编码基因,并预测OmpA蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨禽波氏杆菌外膜蛋白OmpA在免疫保护中所起的作用。作者对禽波氏杆菌的外膜蛋白ompA基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学相关软件和方法,对禽波氏杆菌OmpA蛋白的二级结构和B细胞抗原表位进行预测。禽波氏杆菌ompA基因全长597bp,编码199个氨基酸。二级结构以无规卷曲为主,有少量的α-螺旋和β-片层,少见β-转角;推测OmpA蛋白有5个B细胞优势抗原表位区域、2个糖基化位点。本研究为进一步分析禽波氏杆菌免疫机理、制备单克隆抗体和设计表位疫苗等奠定理论基础。 展开更多
关键词 禽波氏杆菌 外膜蛋白A 二级结构 B细胞抗原表位 预测
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山羊奇异变形杆菌分离鉴定及其16S-23SrRNAISR序列RFLP分析 被引量:7
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作者 崔国林 钟世勋 +2 位作者 杨世发 左雪梅 朱瑞良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期919-924,共6页
2012年初,山东菏泽某羊场的羊群发病,从发病羊器官分离到2株病原细菌。对病原细菌进行鉴定,并对其与已知同种异源菌株相似性差异进行分析。从患病山羊内脏器官分离细菌,经形态特征、培养特性、生化试验、血清学试验及致病性试验进行鉴定... 2012年初,山东菏泽某羊场的羊群发病,从发病羊器官分离到2株病原细菌。对病原细菌进行鉴定,并对其与已知同种异源菌株相似性差异进行分析。从患病山羊内脏器官分离细菌,经形态特征、培养特性、生化试验、血清学试验及致病性试验进行鉴定;再通过设计通用引物扩增16S-23SrRNA ISR(intergenic spacer region)序列,将PCR产物经HinfⅠ单酶切获得3条可视条带,同时对扩增条带中的主带测序并进行系统发育分析。结果表明,分离菌株为奇异变形杆菌;分离菌株同本实验室保存的兔源与鸡源奇异变形杆菌PCR-RFLP结果一致;分离菌株PCR产物同GenBank收录的HI4320株奇异变形杆菌及本实验室保存的兔源与鸡源奇异变形杆菌进行序列比较,分离羊源菌株与兔源菌株相似性为94.8%、与鸡源菌株相似性为96.0%~98.2%,与人源HI4320株相似性为96.9%。研究证实发病羊致病病原为奇异变形杆菌,其与鸡源、兔源和人源奇异变形杆菌的亲缘关系较近。 展开更多
关键词 山羊 奇异变形杆菌 16S-23S rRNA ISR PCR-RFLP 系统发育分析
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山羊鲍曼不动杆菌分离鉴定及16SrRNA系统发育分析 被引量:2
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作者 钟世勋 朱瑞良 +6 位作者 李兵 王迪 张永兵 朱福杰 杨亚 杨世发 崔国林 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第S1期322-325,共4页
2013年初,山东潍坊某羊场的羊群发病,从发病羊器官分离到2株病原细菌。对病原细菌进行鉴定,并对其与已知同种异源菌株相似性差异进行分析。对分离的菌株经形态特征、培养特性、生化试验及致病性试验进行鉴定,再通过设计通用引物扩增分... 2013年初,山东潍坊某羊场的羊群发病,从发病羊器官分离到2株病原细菌。对病原细菌进行鉴定,并对其与已知同种异源菌株相似性差异进行分析。对分离的菌株经形态特征、培养特性、生化试验及致病性试验进行鉴定,再通过设计通用引物扩增分离菌株16S rRNA基因,测序后进行序列比较和系统发育分析。结果显示:分离菌株为鲍曼不动杆菌,耐药性强,仅对舒巴坦和强力霉素敏感,对小白鼠具有较强致病作用,2株分离菌株核苷酸序列之间同源性为100%,与GenBank中收录的NC009085株(人源)鲍曼不动杆菌标准菌株核苷酸序列同源性为100%,与绵羊源、牛源、鹅源鲍曼不动杆菌参考菌株核苷酸序列同源性分别为100%、99.9%、99.9%。可见该分离株与人源、绵羊源、牛源和鹅源鲍曼不动杆菌的亲缘关系较近,可能为人畜共患病病原体。 展开更多
关键词 山羊 鲍曼不动杆菌 分离 鉴定 16SrRNA 系统发育分析
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日粮α-亚麻酸水平对断奶至2月龄肉兔生长性能、脂肪酸构成及肝脏相关基因mRNA表达的影响 被引量:9
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作者 杜海涛 王春阳 +2 位作者 王雪鹏 麻名文 李福昌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期671-678,共8页
本研究探讨了日粮α-亚麻酸(ALA)水平对断奶至2月龄生长肉兔生长性能、血脂、肝脏和肌肉脂肪酸构成及肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和肉碱脂酰转移酶1(CPT1)mRNA表达量的影响。选用断奶体质量无显著差异的生长肉兔200只,随机分成5组,每组40... 本研究探讨了日粮α-亚麻酸(ALA)水平对断奶至2月龄生长肉兔生长性能、血脂、肝脏和肌肉脂肪酸构成及肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和肉碱脂酰转移酶1(CPT1)mRNA表达量的影响。选用断奶体质量无显著差异的生长肉兔200只,随机分成5组,每组40只,分别饲喂不同ALA添加量(0、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%)的饲粮。预试7d,正试23d。结果表明:日粮ALA水平对平均日采食量(ADI)、日增体质量(ADG)、料重比(F/G)和屠宰率影响显著(P<0.05)。日粮ALA水平极显著降低血清甘油三酯(TG)(P=0.001 2)、胆固醇(P=0.005 6)和低密度脂蛋白(LDL)水平(P=0.000 4),对血清高密度脂蛋白(HDL)影响不显著(P=0.217 7);日粮ALA水平对肝脏和背最长肌饱和脂肪酸(SPA)影响不显著(P>0.05),但能显著降低肝脏和背最长肌单不饱和脂肪酸(MU-FA)的相对含量(P<0.05),显著提高肝脏和背最长肌多不饱和脂肪酸(PUFA)(P<0.05)和n-3系列PUFA的相对含量(P<0.000 1);极显著降低n-6/n-3比例(P<0.01),各处理组n-6系列PUFA相对含量差异不显著(P>0.05)。日粮ALA水平对肝脏ACC和CPT1基因mRNA表达量的影响均极显著(P=0.000 2,P=0.000 1)。从生长性能、组织脂肪酸构成和肉质等多方面考虑,断奶至2月龄生长肉兔饲粮中可添加0.2%的亚麻酸以生产富含n-3PUFA的功能性兔肉产品。 展开更多
关键词 Α-亚麻酸 肉兔 生长性能 血脂 脂肪酸构成 ACC、CPT1基因表达
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猪NMMHC-ⅡA基因功能区的克隆及表达特征分析 被引量:2
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作者 蒋成兰 邢凤 +5 位作者 徐云华 王猛 李艳平 康丽 姜运良 周恩民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1519-1524,共6页
为了解NMMHC-ⅡA是否与不同品种猪对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗性差异有关,本研究克隆了对PRRSV易感的三元杂交猪(杜大长)、抗PRRSV的我国优良地方品种莱芜猪和大蒲莲猪NMMHC-ⅡA基因中含PRRSV结合区(23个氨基酸)在内的羧基端95... 为了解NMMHC-ⅡA是否与不同品种猪对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗性差异有关,本研究克隆了对PRRSV易感的三元杂交猪(杜大长)、抗PRRSV的我国优良地方品种莱芜猪和大蒲莲猪NMMHC-ⅡA基因中含PRRSV结合区(23个氨基酸)在内的羧基端954bp的cDNA序列,并分析了其在物种间的同源性和在不同品种间的差别,通过RT-PCR法检测了该基因在猪体内的表达特征。结果表明,NMMHC-ⅡA的cDNA序列在哺乳动物中的保守性较高,猪与人、大鼠、小鼠、牛、猴、狗等物种的核苷酸及氨基酸序列同源性均较高;莱芜猪、大蒲莲猪及杜大长杂交猪NMMHC-ⅡA蛋白羧基端的氨基酸序列完全相同,而NMMHC-ⅡA基因的核苷酸序列有3处不同。猪NMMHC-ⅡA基因在猪肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、淋巴结、扁桃体、大肠、小肠、胃和肌肉中均有明显的表达,而在心脏和大脑中有弱表达,在小脑及子宫中几乎检测不到其表达。结果显示,对蓝耳病呈现不同抗性的杜大长杂交猪和莱芜猪、大蒲莲猪NMMHC-ⅡA基因的功能区没有区别,该基因在除小脑和子宫外的多种组织中均表达,NMMHC-ⅡA与猪抗蓝耳病的关系需进一步研究。 展开更多
关键词 PRRSV 非肌肉肌球蛋白重链ⅡA型 同源性 表达
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