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B亚型禽偏肺病毒B1分离株感染性克隆的构建与鉴定
1
作者 于泽坤 姜承源 +4 位作者 袁洪兴 周生 段笑笑 李彦 宋勤叶 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期788-802,共15页
B亚型禽偏肺病毒(avian metapneumovrus,aMPV)可引起鸡肿头综合征,造成免疫抑制,引发严重的继发感染并导致鸡生产性能下降。建立国内aMPV分离株的反向遗传学系统对病毒研究及开发针对性疫苗具有重要意义。将病毒基因组扩增片段分别测序... B亚型禽偏肺病毒(avian metapneumovrus,aMPV)可引起鸡肿头综合征,造成免疫抑制,引发严重的继发感染并导致鸡生产性能下降。建立国内aMPV分离株的反向遗传学系统对病毒研究及开发针对性疫苗具有重要意义。将病毒基因组扩增片段分别测序,通过序列拼接获得了完整的aMPV B1分离株基因组序列。根据病毒基因组序列中的酶切位点,将基因组分4段依次连入pTH载体,获得病毒基因组质粒pTH-B1。在病毒基因组的第7474位引入同义突变,沉默原有SalⅠ酶切位点以作为遗传标记,在pTH-B1质粒M与F基因之间引入PmeⅠ酶切位点,并利用该位点插入EGFP基因,获得质粒pTH-B1EGFP。将病毒N、P、M 2.1基因的表达盒共同克隆到pCI-Neo表达载体中,获得辅助质粒pCI-NPM2.1。将L基因单独克隆到pCI-Neo表达载体中,获得辅助质粒pCI-L。将pTH-B1质粒和pTH-B1EGFP质粒分别与两种辅助质粒共转染BSR/T7细胞,然后将转染细胞与Vero细胞共培养并连续传代。结果显示:通过细胞病变(CPE)和绿色荧光观察,以及N基因和遗传标记检测、间接免疫光试验(IFA)和Western blot共同验证,表明构建的rB1株和rB1-EGFP株拯救成功。rB1株和rB1-EGFP株与亲本毒株的增殖水平和趋势相似。本研究通过三质粒拯救系统获得了B亚型aMPV B1株的感染性克隆,M和F基因间的非编码区可插入基因表达序列,为进一步探究B亚型aMPV的致病机理和疫苗研发奠定了必要基础。 展开更多
关键词 B亚型禽偏肺病毒 感染性克隆 三质粒 病毒拯救
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猪流行性腹泻病毒在抗体选择压下的基因变异
2
作者 余蕊 高艺 +2 位作者 孙永科 张恒 杨玉艾 《云南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期79-85,共7页
【目的】研究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)在抗体选择压下的分子变异。【方法】将PEDV Sinder02株在添加适量抗体和不添加抗体的Vero E6细胞上连续传代40代,对传代前后毒株的全基因组序列进行扩增、测序、... 【目的】研究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)在抗体选择压下的分子变异。【方法】将PEDV Sinder02株在添加适量抗体和不添加抗体的Vero E6细胞上连续传代40代,对传代前后毒株的全基因组序列进行扩增、测序、拼接和分析。【结果】第40代有抗体组和无抗体组全基因组核苷酸发生突变的位点累计分别为71和50个,氨基酸发生突变的位点累计分别为50和26个。有抗体组S基因的非同义突变(nonsynonymous mutation,NS)与同义突变(synonymous mutation,S)的比值(NS/S值)为4.25,ORF3基因的NS/S值为3.67。有抗体组S基因出现6个稳定突变位点,其中4个与已知抗原表位有关;ORF3基因出现5个稳定突变位点,其中3个与已知抗原表位有关。有抗体组、无抗体组与原代病毒序列的同源性逐代降低,且有抗体组与原代病毒之间的差距更大、遗传距离更远。【结论】首次证明抗体选择压对PEDV Sinder02株的S基因和ORF3基因起到促变异作用。研究结果为探索PEDV变异提供了理论基础,也为新型PEDV疫苗的研制提供了科学参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S基因 ORF3基因 抗体选择压 基因变异
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山东和河北部分地区四种猪病的血清学调查 被引量：10
3
作者 李晓林 王相芹 +2 位作者 刘杉杉 刘阳 李明义 《中国动物检疫》 CAS 2015年第9期4-6,15,共4页
[目的]了解山东和河北部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪圆环病毒病的发病情况。[方法]用间接ELISA方法对144个规模化养猪场的2 008份猪血清进行抗体水平检测。[结果]两省猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬中和（g B基因... [目的]了解山东和河北部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪圆环病毒病的发病情况。[方法]用间接ELISA方法对144个规模化养猪场的2 008份猪血清进行抗体水平检测。[结果]两省猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬中和（g B基因）、伪狂犬病毒野毒感染（g E基因）、圆环病毒病的抗体平均阳性率分别为：89%-92%、87%、92%-95%、33%-40%和76%。各阶段猪群的猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬中和（g B基因）抗体阳性率普遍较高,都在80%以上;伪狂犬野毒（g E基因）抗体阳性率在14%-90%之间,其中流产母猪的抗体阳性率最高,为90%;1-4周的仔猪圆环抗体阳性率为76%（152/199）,4-10周的保育猪的抗体阳性率最低,为67%（327/489）。[结论]这四种猪病的抗体阳性率较高,免疫猪基本能得到保护,但在个别猪场仍有发病,可能与免疫失败、新流行毒株的出现、继发感染等因素有关。提示各大猪场要针对实际情况,制定出严格的综合性防控措施。 展开更多
关键词 规模化猪场 猪瘟 猪繁殖与呼吸综合征 猪伪狂犬 圆环病毒病 血清学检测 间接ELISA
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4
作者 刘金铎 张勇 《养猪》 2009年第6期I0007-I0007,共1页
河南西平蓝耳病病毒混感病例处理和分析1发病情况和临床症状2009年10月10日，河南西平郭老板饲养的60千克左右肥猪开始发病。10月15日笔者现场诊断，了解到最初有15头猪体温达40℃～42℃，皮肤发红，眼结膜潮红，呕吐；精神沉郁，扎堆... 河南西平蓝耳病病毒混感病例处理和分析1发病情况和临床症状2009年10月10日，河南西平郭老板饲养的60千克左右肥猪开始发病。10月15日笔者现场诊断，了解到最初有15头猪体温达40℃～42℃，皮肤发红，眼结膜潮红，呕吐；精神沉郁，扎堆，个别猪粪便上有白色黏液附着；后期出现腹式呼吸，耳朵和臀部发绀，眼圈和肛门发青。这15头猪使用过几个厂家的针剂，标注成分： 展开更多
关键词 猪病 平台 诊治 发病情况 蓝耳病病毒 临床症状 现场诊断 眼结膜
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5
作者 张世周 《养猪》 2012年第2期133-133,共1页
有效防控猪流感的新方案猪流行性感冒简称猪流感,是由猪流感病毒引起的一种猪的急性、热性和高度接触性呼吸道传染病。临床上以发病突然、发病率高和死亡率低为特点,全群常常几乎同时感染,
关键词 猪流感病毒 平台 诊治 猪病 猪流行性感冒 呼吸道传染病 发病率 接触性
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6
作者 林杨洲 《养猪》 2009年第2期83-83,共1页
仔猪多系统衰竭综合征的防制要点 仔猪多系统衰竭综合征是制约保育猪育成率的主要疾病，其主要病原圆环病毒2型和蓝耳病病毒目前还没有十分有效的防制手段，因此防制原则必须以加强饲养管理、减少或控制继发感染、增强仔猪的免疫系统... 仔猪多系统衰竭综合征的防制要点 仔猪多系统衰竭综合征是制约保育猪育成率的主要疾病，其主要病原圆环病毒2型和蓝耳病病毒目前还没有十分有效的防制手段，因此防制原则必须以加强饲养管理、减少或控制继发感染、增强仔猪的免疫系统功能为主。笔者根据多年兽医临床实践，总结了以下几条经验。 展开更多
关键词 多系统衰竭综合征 平台 诊治 猪病 圆环病毒2型 免疫系统功能 蓝耳病病毒 饲养管理
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7
作者 刘金铎 《养猪》 2011年第6期I0009-I0009,共1页
一例传染性胸膜肺炎和蓝耳病混感的诊治 2010年7月，笔者在湖南湘潭服务期间，遇到过这样一个病例：某猪场李老板养殖母猪54头，其猪场猪群中母猪、哺乳仔猪、保育猪和75千克以上大猪比较稳定，未见明显患病临床症状；而35-75千克220... 一例传染性胸膜肺炎和蓝耳病混感的诊治 2010年7月，笔者在湖南湘潭服务期间，遇到过这样一个病例：某猪场李老板养殖母猪54头，其猪场猪群中母猪、哺乳仔猪、保育猪和75千克以上大猪比较稳定，未见明显患病临床症状；而35-75千克220头中大猪却不太平，1个月来发病死亡15头，有些猪只是一顿不吃料，过一个晚上就有可能出现死亡。 展开更多
关键词 猪病 诊治 传染性胸膜肺炎 平台 发病死亡 哺乳仔猪 临床症状 蓝耳病
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8
作者 刘超 《养猪》 2012年第5期I0006-I0006,共1页
2012年7—8月间，湖南湖北部分地区猪场发生霉菌毒素慢性中毒的现象，根据发病情况，诊断为玉米赤霉烯酮中毒。
关键词 玉米赤霉烯酮中毒 平台 诊治 猪病 慢性中毒 霉菌毒素 发病情况 猪场
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9
作者 秦学华 《养猪》 2011年第5期I0004-I0004,共1页
猪附红细胞体病的综合防制方案 猪附红细胞体病主要引起猪顽固性高烧，腹式呼吸或犬坐式呼吸，咳嗽、气喘，可视黏膜初期充血黄染，皮肤初苍白后黄染，毛囊棕红色渗出性出血，耳部、四肢内侧和末端呈紫红斑或有小出血点等症状（江苏省... 猪附红细胞体病的综合防制方案 猪附红细胞体病主要引起猪顽固性高烧，腹式呼吸或犬坐式呼吸，咳嗽、气喘，可视黏膜初期充血黄染，皮肤初苍白后黄染，毛囊棕红色渗出性出血，耳部、四肢内侧和末端呈紫红斑或有小出血点等症状（江苏省如东县农户称之为“红皮病”），有时便秘与腹泻交替发生，给养猪业造成很大经济损失。 展开更多
关键词 猪病 猪附红细胞体病 平台 诊治 综合防制 经济损失 顽固性 渗出性
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10
作者 秦学华 《养猪》 2012年第1期134-134,共1页
如何有效防控猪口蹄疫 口蹄疫是一种急性、热性和高度接触性的病毒性传染病，其发病率高，危害极大，一年四季均可发生，主要从立秋开始，冬春加剧，气源性传播是该病的主要传播途径。
关键词 平台 诊治 猪病 病毒性传染病 猪口蹄疫 一年四季 传播途径 接触性
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11
作者 李俊柱 《养猪》 2007年第6期86-87,共2页
1混感综合征的综合防治方案 多种病毒、细菌混合感染是目前猪病流行的主要特点。在临床上，病原体为单纯一种病毒或细菌的猪病几乎不存在，只有病毒而没有细菌或只有细菌而没有病毒的猪病也几乎不存在。近两年流行的所谓“高热病”：... 1混感综合征的综合防治方案 多种病毒、细菌混合感染是目前猪病流行的主要特点。在临床上，病原体为单纯一种病毒或细菌的猪病几乎不存在，只有病毒而没有细菌或只有细菌而没有病毒的猪病也几乎不存在。近两年流行的所谓“高热病”：确切地说也是混感综合征的一种。因此，要有效地防治猪病，必须采取综合防治方案。 展开更多
关键词 猪病 平台 诊治 综合防治 混合感染 综合征 病毒 细菌
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12
作者 刘国栋 张立丽 陈秀红 《养猪》 2011年第2期I0004-I0004,共1页
一起猪瘟与猪流感混合感染的成功控制案例 2011年1月，猪瘟为主的混感在山东潍坊、泰安地区一些中小规模猪场发生。一些控制措施不得当的猪场，损失较大。潍坊市昌乐红河镇某猪场体重25～45千克的外购肥育猪共217头发生猪瘟与猪流感混... 一起猪瘟与猪流感混合感染的成功控制案例 2011年1月，猪瘟为主的混感在山东潍坊、泰安地区一些中小规模猪场发生。一些控制措施不得当的猪场，损失较大。潍坊市昌乐红河镇某猪场体重25～45千克的外购肥育猪共217头发生猪瘟与猪流感混合感染，经治疗，死亡21头，治愈196头，治愈率90．3％。现将诊治情况介绍如下。 展开更多
关键词 诊治 中小规模猪场 平台 猪病 混合感染 泰安地区 猪流感 潍坊市
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13
作者 李勇 魏龙军 《养猪》 2012年第4期I0005-I0005,共1页
蓝耳病引发的防控新思路 蓝耳病是由猪蓝耳病病毒（PRRSV）引起猪的一种高度接触性传染病，该病主要侵袭繁殖和呼吸系统，不同年龄、品种和性别的猪均能感染，但以妊娠母猪和仔猪最易感，主要表现为母猪繁殖障碍、仔猪呼吸道疾病、免... 蓝耳病引发的防控新思路 蓝耳病是由猪蓝耳病病毒（PRRSV）引起猪的一种高度接触性传染病，该病主要侵袭繁殖和呼吸系统，不同年龄、品种和性别的猪均能感染，但以妊娠母猪和仔猪最易感，主要表现为母猪繁殖障碍、仔猪呼吸道疾病、免疫抑制3大危害。选择有效的防控措施解除蓝耳病造成的免疫抑制和ADE现象（抗体依赖性增强，即在低抗体水平下免疫蓝耳病苗不仅不能防蓝耳病，反而造成蓝耳病的暴发）给猪场带来经济损失十分必要。 展开更多
关键词 猪病 蓝耳病病毒 母猪繁殖障碍 平台 诊治 接触性传染病 免疫抑制 防控措施
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14
作者 刘金铎 胡昊 刘芬 《养猪》 2012年第3期I0006-I0006,共1页
一起哺乳仔猪伪狂犬病的诊断与分析2011年7月13日，笔者应邀拜访江西宜春某猪场，该猪场2010年建场，存栏母猪80头，全部为初产母猪。通过沟通了解到最近两周产房哺乳仔猪不稳定，共有5窝63头仔猪发病，死亡58头，死亡率92％。经过笔者... 一起哺乳仔猪伪狂犬病的诊断与分析2011年7月13日，笔者应邀拜访江西宜春某猪场，该猪场2010年建场，存栏母猪80头，全部为初产母猪。通过沟通了解到最近两周产房哺乳仔猪不稳定，共有5窝63头仔猪发病，死亡58头，死亡率92％。经过笔者诊断给出处理方案后，2011年7月21日至8月20日期间分娩的14窝仔猪共计154头，死亡8头，死亡率5％。现将本病例诊断及处理方案与各位同行及养殖朋友分享。 展开更多
关键词 哺乳仔猪 平台 诊治 猪病 初产母猪 猪伪狂犬病 死亡率 诊断
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15
作者 马红星 《养猪》 2009年第1期83-83,共1页
预防治疗高热病注意事项 这两年猪高热病频繁发生，让养猪朋友们谈‘热”色变。其实，高热病病因是多病原混合感染，加上平时用药不科学，猪发病后随意加大用药量，加速了猪只的死亡。笔者结合大量一线技术服务师的临床实践和个人经验... 预防治疗高热病注意事项 这两年猪高热病频繁发生，让养猪朋友们谈‘热”色变。其实，高热病病因是多病原混合感染，加上平时用药不科学，猪发病后随意加大用药量，加速了猪只的死亡。笔者结合大量一线技术服务师的临床实践和个人经验，谈一下预防和治疗高热病的办法。 展开更多
关键词 猪病 平台 诊治 高热病 混合感染 个人经验 临床实践 技术服务
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大型叠层笼养肉鸡舍气流组织模拟与优化
16
作者 纪文康 施志钢 +2 位作者 张璐瑶 王琪琪 高新明 《青岛理工大学学报》 CAS 2024年第2期147-154,共8页
针对大型叠层笼养肉鸡舍过渡性通风模式下温度分布不均的问题,通过现场实测建立三维数学模型,采用计算流体动力学方法对试验鸡舍进行气流组织模拟分析,提出改进方案并进行测试验证。结果显示:鸡舍内部气流分布不均,大部分气流从鸡舍上... 针对大型叠层笼养肉鸡舍过渡性通风模式下温度分布不均的问题,通过现场实测建立三维数学模型,采用计算流体动力学方法对试验鸡舍进行气流组织模拟分析,提出改进方案并进行测试验证。结果显示:鸡舍内部气流分布不均,大部分气流从鸡舍上方空间流出舍外,未与肉鸡充分换热;鸡舍长度方向上温差大,前后最大温差可达4℃,给整体调控带来难度。在天花板下安装导流板可以明显增加肉鸡生活区气流速度,肉鸡生活区域平均风速提高了29%~61%,有效提高了室外空气利用率和鸡舍换热效率,使前后温差控制在2℃以内。研究表明天花板下导流板的合理使用可以有效改善鸡舍气流组织,使鸡舍内温度保持良好的均匀性。 展开更多
关键词 肉鸡舍 过渡性通风 计算流体动力学 气流组织
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香菇多糖和七清败毒颗粒对断奶仔猪生长性能、免疫指标、PRRS防控效果的影响
17
作者 张国华 邢思毅 +12 位作者 张备 闫先超 李静静 王丽坤 薛沾枚 张艳 郝彩虹 刘雪松 王岩 沈思思 董佳强 姚爽 金振华 《中国饲料》 北大核心 2024年第15期35-40,共6页
为研究日粮中添加香菇多糖和七清败毒颗粒对断奶仔猪生长性能、免疫指标以及猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)的防控效果的影响,本试验在某规模化猪场随机选取断奶仔猪500头,随机分为2组,每组5个重复,每个重复50头,分别为对照组和试验组,... 为研究日粮中添加香菇多糖和七清败毒颗粒对断奶仔猪生长性能、免疫指标以及猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)的防控效果的影响,本试验在某规模化猪场随机选取断奶仔猪500头,随机分为2组,每组5个重复,每个重复50头,分别为对照组和试验组,试验组日粮中添加香菇多糖和七清败毒颗粒,试验周期28 d。试验期间对断奶仔猪的生长性能、部分免疫指标、PRRS抗体水平、抗原阳性率进行检测和统计。结果显示:生长性能方面,与对照组相比,试验组断奶仔猪在试验期间增重、平均日增重(ADG)极显著提高5.03%、3.45%(P<0.01),料重比(F/G)显著降低2.12%(P<0.05);试验组断奶仔猪的发病率极显著降低63.64%(P<0.01),成活率显著升高2.93%(P<0.05);血清免疫指标方面,第14天,试验组IgA显著提高5.88%(P<0.05);第28天,试验组IgA、IgG显著提高5.74%、5.77%(P<0.05),试验组TNF-α、IL-6显著降低4.64%、10.19%(P<0.05)。抗体检测方面,第28天,试验组S/P均值显著降低22.81%(P<0.05),离散度由65.12%降至55.24%,S/P≥2.0的占比由24.00%降至8.00%。结果提示,香菇多糖和七清败毒颗粒可以有效提高断奶仔猪生长性能、提高免疫力、维持猪群PRRSV抗体稳定,起到防控PRRS的效果。 展开更多
关键词 香菇多糖 七清败毒颗粒 断奶仔猪 生长性能 猪繁殖与呼吸障碍综合征
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反向遗传学操作技术在禽流感研究中的应用 被引量：1
18
作者 靳冬 吴志明 +3 位作者 张志凌 张健 李明义 赵雪丽 《中国动物检疫》 CAS 2011年第3期75-77,共3页
反向遗传操作技术的建立为负链RNA病毒的研究开创了新的途径,使负链RNA病毒的许多特性得以深入认识。禽流感近年在全球的广泛暴发,使得对流感病毒的深入研究更加迫切,反向遗传操作技术的应用,使禽流感病毒的基因结构、致病机理、与宿主... 反向遗传操作技术的建立为负链RNA病毒的研究开创了新的途径,使负链RNA病毒的许多特性得以深入认识。禽流感近年在全球的广泛暴发,使得对流感病毒的深入研究更加迫切,反向遗传操作技术的应用,使禽流感病毒的基因结构、致病机理、与宿主细胞的相互关系等各方面的研究工作都取得了巨大进步。笔者就国内近几年反向遗传操作技术在禽流感研究中取得的进展做一综述,并对该技术的发展趋势做一分析,提出对策思考。 展开更多
关键词 反向遗传操作技术 禽流感 发展趋势 对策思考
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1株鸭疫里默氏杆菌的全基因组测序及耐药性与遗传进化分析 被引量：7
19
作者 祝希辉 李艳兰 +7 位作者 王志伟 庞喆羽 李玉保 刘成 司振书 路建彪 曹胜亮 薛希娟 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1140-1149,共10页
【目的】了解鸭疫里默氏杆菌的耐药性、基因组结构与遗传变异程度,为鸭疫里默氏杆菌耐药性与基因组研究提供参考。【方法】本研究对1株从病死鸭脑组织分离的鸭疫里默氏杆菌疑似菌株进行了PCR鉴定、耐药性检测及全基因组框架图测序,并基... 【目的】了解鸭疫里默氏杆菌的耐药性、基因组结构与遗传变异程度,为鸭疫里默氏杆菌耐药性与基因组研究提供参考。【方法】本研究对1株从病死鸭脑组织分离的鸭疫里默氏杆菌疑似菌株进行了PCR鉴定、耐药性检测及全基因组框架图测序,并基于16S rDNA与管家基因对其进行了遗传进化分析。【结果】测序数据经过质控与过滤后成功组装为1个包含38个contigs的基因组框架,使用Abricate软件、CARD在线数据库共检测出6种不同的耐药基因,其中4种与耐药表型符合;将基因序列提交至MLST数据库,发现了一种新ST型,定为ST93。构建的16S rDNA和管家基因进化树结果表明,分离菌株与2株鸭疫里默氏杆菌具有较近的亲缘关系。【结论】分离鉴定得到1株鸭疫里默氏杆菌,该菌株为多药耐药菌株,其基因组中携带多个耐药基因;鸭疫里默氏杆菌的基因变异程度较大,且存在跨区域流行传播风险。在临床用药时应注意合理用药,及时监控抗性基因的水平转移,防止鸭疫里默氏杆菌跨区域流行。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 耐药性 耐药基因 基因组 生物信息学
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2008年跳过高致病性猪蓝耳病的泥沼
20
作者 卢纪和 吴同山 +4 位作者 徐士清 周绪斌 李俊柱 马建平 蔡少阁 《猪业科学》 2008年第1期34-39,共6页
前面分析了2008年市场的机遇与挑战,2008年养猪是否盈利的关键依然是疾病问题,只要跳过高致病性猪蓝耳病这个最大的泥沼,养猪“钱”景十分光明。因此,疾病即给养猪业带来了挑战也带来了机遇。
关键词 猪蓝耳病 高致病性 泥沼 养猪业 疾病
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