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清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用及其机制
被引量：
3
1
作者
田庆梅
毕宏生
+5 位作者
崔彦
解孝锋
宋继科
郭大东
赵圣亚
杜然然
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期891-896,共6页
背景葡萄膜炎是常见的致盲眼病，多反复发作，目前主要的治疗方法是应用糖皮质激素和免疫抑制剂，但不良反应较多，寻求安全、有效的治疗方法至关重要。目的观察清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的疗效，并探讨其...
背景葡萄膜炎是常见的致盲眼病，多反复发作，目前主要的治疗方法是应用糖皮质激素和免疫抑制剂，但不良反应较多，寻求安全、有效的治疗方法至关重要。目的观察清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的疗效，并探讨其作用机制。方法SPF级雌性Lewis大鼠27只，皮下注射200斗l含100μg光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）1177—1191多肽、100μl完全弗氏佐剂（CFA）、100μg结核菌素及100μlPBS的乳化液，在大鼠两足垫处、尾根部两侧及脊背正中均匀注射5个点建立EAU动物模型。将免疫后的大鼠按随机数字表法随机分为模型对照组、清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组。大鼠免疫后第7天开始点眼，模型对照组用生理盐水点眼，清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组分别用相应的药物点眼，每日3次，连续用药7d。从免疫后第1天开始裂隙灯显微镜下观察大鼠眼前节炎症反应并进行炎症评分；免疫后第14天过量麻醉法处死实验动物并获取眼球标本，采用组织病理学方法观察大鼠前房、虹膜和睫状体的炎性细胞浸润情况；采用流式细胞仪测定大鼠脾脏、淋巴结分离的T细胞悬液中CD4^＋和CD8^＋细胞百分比、CD4^＋／CD8^＋值以及Th1细胞和Th17细胞的比例。结果模型对照组大鼠免疫后第9天开始出现眼部炎症表现，第11天炎症反应达高峰期，而清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组大鼠眼部炎症反应的发生较模型对照组晚，炎症反应轻，病程短。免疫后13d，3个组大鼠眼部炎症评分的总体差异有统计学意义（F=26．52，P=0．00）。清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组的炎症评分明显低于模型对照组，差异均有统计学意义（t=6．72、10．11，P〈0．05）。组织病理学检查发现，模型对照组大鼠前房、虹膜及睫状体组织中可见炎性细胞浸润，清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组大鼠前房、虹膜及睫状体组织中炎性细胞浸润明显减轻。模型对照组大鼠脾脏和淋巴结中CD4^＋细胞、CD8^＋细胞的百分比及CD4^＋／CD8^＋值分别为（83．10±0．15）％、（18．60±0．09）％和4．50±0．02，清开灵眼用凝胶组分别为（79．90±0．21）％、（19．20±0．15）％和4．20±0．04，妥布霉素地塞米松组分别为（78．604-0．09）％、（23．44±0．09）％和3．40±0．01，3个组间CD4^＋、CD8^＋细胞百分比及CD4^＋／CD8^＋值的差异均有统计学意义（F=223．68、530．77、404．83，均P=0．00）。模型对照组大鼠脾脏和淋巴结中CD4^＋^ν干扰素’（IFN-ν^＋），CD4^＋白细胞介素-17^＋（IL-17^＋）细胞的百分比分别为（32．20±0．19）％和（55．10±0．09）％，清开灵眼用凝胶组分别为（20．404-0．18）％和（25．204-0．32）％，妥布霉素地塞米松组分别为（10．40±0．23）％和（8．20±0．15）％，3个组间差异均有统计学意义（F=2986．34、12807．54，均P=0．00）。结论清开灵眼用凝胶点眼可减轻大鼠EAU炎症反应，其作用机制主要是抑制CD4^＋细胞的增生和分化，降低CD4^＋／CD8^＋值，并抑制Th1、Th17效应细胞的分化，减少相应细胞因子的分泌。
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关键词
中草药
抗炎剂
免疫性疾病
前部葡萄膜炎/免疫性
T淋巴细胞亚群
流式细胞术
TH1细胞
TH17细胞
动物模型
杂交Lewis大鼠
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职称材料
雷珠单抗选择性体外抑制睫状体恶性黑色素瘤
被引量：
3
2
作者
李姣
王兴荣
+3 位作者
崔彦
刘正峰
王影
李洋
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2013年第11期1021-1025,共5页
目的探讨雷珠单抗是否能抑制恶性黑色素瘤细胞的生长并评估其在体外对人视网膜色素上皮细胞的安全性。方法人视网膜色素上皮细胞系(human retinal pigmental epithelial cell line,ARPE-19)和临床获得的恶性黑色素瘤细胞均分为空白对照...
目的探讨雷珠单抗是否能抑制恶性黑色素瘤细胞的生长并评估其在体外对人视网膜色素上皮细胞的安全性。方法人视网膜色素上皮细胞系(human retinal pigmental epithelial cell line,ARPE-19)和临床获得的恶性黑色素瘤细胞均分为空白对照组、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)处理组和雷珠单抗处理组。VEGF处理组预设VEGF浓度分别为1μg·L-1、5μg·L-1、10μg·L-1和20μg·L-1,雷珠单抗处理组预设雷珠单抗的浓度分别为0.10 g·L-1、0.25 g·L-1、0.50 g·L-1和1.00 g·L-1。采用实时细胞电子分析系统(RT-CES)分别监测各组细胞的动态变化,ELISA法检测对照组和雷珠单抗组VEGF的表达水平。结果与空白对照(0μg·L-1VEGF)组相比,10μg·L-1和20μg·L-1VEGF可促进恶性黑色素瘤细胞的生长(均为P<0.05)。但是同样浓度的VEGF作用下ARPE-19的生存率与对照组相比没有明显增长(均为P>0.05)。当加入0.25 g·L-1雷珠单抗时,恶性黑色素瘤细胞的生存率下降至(42.5±5.0)%(P<0.01)。0.50 g·L-1和1.00 g·L-1雷珠单抗作用于ARPE-19时,细胞生存率分别是(55.6±1.1)%和(42.8±4.0)%。与空白对照(0 g·L-1雷珠单抗)组恶性黑色素瘤细胞表达的VEGF水平(1533.4±7.0)ng·L-1相比,0.10 g·L-1、0.25 g·L-1、0.50 g·L-1和1.00 g·L-1雷珠单抗处理后其VEGF水平分别下降到(822.6±9.3)ng·L-1、(875.0±7.8)ng·L-1、(836.1±6.3)ng·L-1和(844.8±6.0)ng·L-1(均为P<0.05)。正常的ARPE-19可表达(908.8±9.1)ng·L-1VEGF,而经不同浓度雷珠单抗处理后,其表达的VEGF水平与对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论雷珠单抗选择性抑制恶性黑色素瘤细胞的增殖,而对ARPE-19的作用较弱。
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关键词
雷珠单抗
血管内皮生长因子
恶性黑色素瘤细胞
人视网膜色素上皮细胞
实时细胞电子分析系统
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职称材料
题名
清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用及其机制
被引量：
3
1
作者
田庆梅
毕宏生
崔彦
解孝锋
宋继科
郭大东
赵圣亚
杜然然
机构
山东
中医药大学
第二
附属
医院
眼科
山东中医药大学附属眼科医院眼科
山东
中医药大学
山东
中医药大学
眼科
研究所
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期891-896,共6页
基金
国家自然科学基金项目（81072961、81001577、81100658）
山东省自然科学基金项目（ZR2010HM048）
中国博士后科学基金面上项目（2012M510068）.
文摘
背景葡萄膜炎是常见的致盲眼病，多反复发作，目前主要的治疗方法是应用糖皮质激素和免疫抑制剂，但不良反应较多，寻求安全、有效的治疗方法至关重要。目的观察清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的疗效，并探讨其作用机制。方法SPF级雌性Lewis大鼠27只，皮下注射200斗l含100μg光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）1177—1191多肽、100μl完全弗氏佐剂（CFA）、100μg结核菌素及100μlPBS的乳化液，在大鼠两足垫处、尾根部两侧及脊背正中均匀注射5个点建立EAU动物模型。将免疫后的大鼠按随机数字表法随机分为模型对照组、清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组。大鼠免疫后第7天开始点眼，模型对照组用生理盐水点眼，清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组分别用相应的药物点眼，每日3次，连续用药7d。从免疫后第1天开始裂隙灯显微镜下观察大鼠眼前节炎症反应并进行炎症评分；免疫后第14天过量麻醉法处死实验动物并获取眼球标本，采用组织病理学方法观察大鼠前房、虹膜和睫状体的炎性细胞浸润情况；采用流式细胞仪测定大鼠脾脏、淋巴结分离的T细胞悬液中CD4^＋和CD8^＋细胞百分比、CD4^＋／CD8^＋值以及Th1细胞和Th17细胞的比例。结果模型对照组大鼠免疫后第9天开始出现眼部炎症表现，第11天炎症反应达高峰期，而清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组大鼠眼部炎症反应的发生较模型对照组晚，炎症反应轻，病程短。免疫后13d，3个组大鼠眼部炎症评分的总体差异有统计学意义（F=26．52，P=0．00）。清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组的炎症评分明显低于模型对照组，差异均有统计学意义（t=6．72、10．11，P〈0．05）。组织病理学检查发现，模型对照组大鼠前房、虹膜及睫状体组织中可见炎性细胞浸润，清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组大鼠前房、虹膜及睫状体组织中炎性细胞浸润明显减轻。模型对照组大鼠脾脏和淋巴结中CD4^＋细胞、CD8^＋细胞的百分比及CD4^＋／CD8^＋值分别为（83．10±0．15）％、（18．60±0．09）％和4．50±0．02，清开灵眼用凝胶组分别为（79．90±0．21）％、（19．20±0．15）％和4．20±0．04，妥布霉素地塞米松组分别为（78．604-0．09）％、（23．44±0．09）％和3．40±0．01，3个组间CD4^＋、CD8^＋细胞百分比及CD4^＋／CD8^＋值的差异均有统计学意义（F=223．68、530．77、404．83，均P=0．00）。模型对照组大鼠脾脏和淋巴结中CD4^＋^ν干扰素’（IFN-ν^＋），CD4^＋白细胞介素-17^＋（IL-17^＋）细胞的百分比分别为（32．20±0．19）％和（55．10±0．09）％，清开灵眼用凝胶组分别为（20．404-0．18）％和（25．204-0．32）％，妥布霉素地塞米松组分别为（10．40±0．23）％和（8．20±0．15）％，3个组间差异均有统计学意义（F=2986．34、12807．54，均P=0．00）。结论清开灵眼用凝胶点眼可减轻大鼠EAU炎症反应，其作用机制主要是抑制CD4^＋细胞的增生和分化，降低CD4^＋／CD8^＋值，并抑制Th1、Th17效应细胞的分化，减少相应细胞因子的分泌。
关键词
中草药
抗炎剂
免疫性疾病
前部葡萄膜炎/免疫性
T淋巴细胞亚群
流式细胞术
TH1细胞
TH17细胞
动物模型
杂交Lewis大鼠
Keywords
Drug, Chinese herbal
Anti-inflammatory agent
Autoimmune disease
Uveitis, anterior/immunology
T-lymphocyte subset
Flow cytometry
Thl cell
Thl7 cell
Disease model, animal
Rat, inbredLewis
分类号
R276.7 [医药卫生—中医五官科学]
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职称材料
题名
雷珠单抗选择性体外抑制睫状体恶性黑色素瘤
被引量：
3
2
作者
李姣
王兴荣
崔彦
刘正峰
王影
李洋
机构
山东
中医药大学
附属
眼科
医院
山东中医药大学附属眼科医院眼科
研究所
山东
省高校中西医结合眼病防治技术重点实验室
山东
中医药大学
第二临床学院
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2013年第11期1021-1025,共5页
基金
山东省自然科学基金(编号:Y2006C101)~~
文摘
目的探讨雷珠单抗是否能抑制恶性黑色素瘤细胞的生长并评估其在体外对人视网膜色素上皮细胞的安全性。方法人视网膜色素上皮细胞系(human retinal pigmental epithelial cell line,ARPE-19)和临床获得的恶性黑色素瘤细胞均分为空白对照组、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)处理组和雷珠单抗处理组。VEGF处理组预设VEGF浓度分别为1μg·L-1、5μg·L-1、10μg·L-1和20μg·L-1,雷珠单抗处理组预设雷珠单抗的浓度分别为0.10 g·L-1、0.25 g·L-1、0.50 g·L-1和1.00 g·L-1。采用实时细胞电子分析系统(RT-CES)分别监测各组细胞的动态变化,ELISA法检测对照组和雷珠单抗组VEGF的表达水平。结果与空白对照(0μg·L-1VEGF)组相比,10μg·L-1和20μg·L-1VEGF可促进恶性黑色素瘤细胞的生长(均为P<0.05)。但是同样浓度的VEGF作用下ARPE-19的生存率与对照组相比没有明显增长(均为P>0.05)。当加入0.25 g·L-1雷珠单抗时,恶性黑色素瘤细胞的生存率下降至(42.5±5.0)%(P<0.01)。0.50 g·L-1和1.00 g·L-1雷珠单抗作用于ARPE-19时,细胞生存率分别是(55.6±1.1)%和(42.8±4.0)%。与空白对照(0 g·L-1雷珠单抗)组恶性黑色素瘤细胞表达的VEGF水平(1533.4±7.0)ng·L-1相比,0.10 g·L-1、0.25 g·L-1、0.50 g·L-1和1.00 g·L-1雷珠单抗处理后其VEGF水平分别下降到(822.6±9.3)ng·L-1、(875.0±7.8)ng·L-1、(836.1±6.3)ng·L-1和(844.8±6.0)ng·L-1(均为P<0.05)。正常的ARPE-19可表达(908.8±9.1)ng·L-1VEGF,而经不同浓度雷珠单抗处理后,其表达的VEGF水平与对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论雷珠单抗选择性抑制恶性黑色素瘤细胞的增殖,而对ARPE-19的作用较弱。
关键词
雷珠单抗
血管内皮生长因子
恶性黑色素瘤细胞
人视网膜色素上皮细胞
实时细胞电子分析系统
Keywords
ranibizumab
vascular endothelial growth factor
malignant melanomacell
human retinal pigment epithelial cell
real-time cell electronic sensing assay
分类号
R730.43 [医药卫生—肿瘤]
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出处
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操作
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清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用及其机制
田庆梅
毕宏生
崔彦
解孝锋
宋继科
郭大东
赵圣亚
杜然然
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
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职称材料
2
雷珠单抗选择性体外抑制睫状体恶性黑色素瘤
李姣
王兴荣
崔彦
刘正峰
王影
李洋
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2013
3
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