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大黄素对脂多糖诱导的内皮细胞骨架损伤及通透性影响的实验研究
被引量：
4
1
作者
李伟
姜月华
+3 位作者
胡洪贞
谭颖
周乐
徐经新
《中国中西医结合肾病杂志》
2014年第7期573-577,I0001,I0002,共7页
目的:观察大黄素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的干预作用,探讨其对内皮细胞细胞骨架及通透性的影响。方法:以0.2μg/ml LPS作用于HUVECs 24 h,造...
目的:观察大黄素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的干预作用,探讨其对内皮细胞细胞骨架及通透性的影响。方法:以0.2μg/ml LPS作用于HUVECs 24 h,造成血管内皮损伤模型。Y27632(ROCK特异性抑制剂)和缬沙坦(西药对照,AngⅡ受体1拮抗剂,Rho/ROCK信号通路的间接抑制剂)作为阳性对照药物。观察了大黄素对LPS诱导的内皮损伤后的HUVECs的变化:流式细胞仪Annexin V-FITC/PI染色观察凋亡率,transwell迁移实验观察细胞迁移能力,10 mg/ml波连蛋白预包被/无包被96孔板观察细胞黏附能力,硝酸还原酶法检测细胞培养上清中的cNOS、iNOS和NO浓度,免疫荧光法观察细胞骨架和黏着斑蛋白的结构和分布。结果:(1)LPS成功诱导构建了HUVECs细胞骨架损伤模型。HUVECs细胞增殖减弱、凋亡增加,细胞骨架肌动蛋白皱缩、黏着斑蛋白聚集,LPS活化内皮、诱导肌球蛋白收缩,导致细胞间隙开放、内皮通透性增加、细胞迁移能力和黏附能力下降。LPS作用24 h后,cNOS减低,tNOS、iNOS、NO升高,呈现内皮损伤和炎症状态。(2)大黄素诱导HUVECs细胞凋亡、提高细胞迁移能力和黏附能力、cNOS升高、iNOS减低,对细胞骨架和黏着斑蛋白形态无明显影响。结论:LPS诱导了HUVECs细胞骨架损伤,大黄素通过调节细胞的凋亡率、调节细胞合成和利用NO的能力、改变细胞迁移和黏附能力,而调节血管内皮通透性、改善内皮屏障功能。同时大黄素促进HUVECs凋亡,抑制内皮细胞的过度增殖,对内皮细胞有一定的保护作用。
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关键词
大黄素
细胞骨架
人脐静脉血管内皮细胞
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题名
大黄素对脂多糖诱导的内皮细胞骨架损伤及通透性影响的实验研究
被引量：
4
1
作者
李伟
姜月华
胡洪贞
谭颖
周乐
徐经新
机构
山东
中医药大学
附属
医院
肾内科
山东中医药大学附属医院中心实验室
山东
中医药大学
出处
《中国中西医结合肾病杂志》
2014年第7期573-577,I0001,I0002,共7页
基金
山东省科技发展计划项目(No.2011-034)
文摘
目的:观察大黄素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的干预作用,探讨其对内皮细胞细胞骨架及通透性的影响。方法:以0.2μg/ml LPS作用于HUVECs 24 h,造成血管内皮损伤模型。Y27632(ROCK特异性抑制剂)和缬沙坦(西药对照,AngⅡ受体1拮抗剂,Rho/ROCK信号通路的间接抑制剂)作为阳性对照药物。观察了大黄素对LPS诱导的内皮损伤后的HUVECs的变化:流式细胞仪Annexin V-FITC/PI染色观察凋亡率,transwell迁移实验观察细胞迁移能力,10 mg/ml波连蛋白预包被/无包被96孔板观察细胞黏附能力,硝酸还原酶法检测细胞培养上清中的cNOS、iNOS和NO浓度,免疫荧光法观察细胞骨架和黏着斑蛋白的结构和分布。结果:(1)LPS成功诱导构建了HUVECs细胞骨架损伤模型。HUVECs细胞增殖减弱、凋亡增加,细胞骨架肌动蛋白皱缩、黏着斑蛋白聚集,LPS活化内皮、诱导肌球蛋白收缩,导致细胞间隙开放、内皮通透性增加、细胞迁移能力和黏附能力下降。LPS作用24 h后,cNOS减低,tNOS、iNOS、NO升高,呈现内皮损伤和炎症状态。(2)大黄素诱导HUVECs细胞凋亡、提高细胞迁移能力和黏附能力、cNOS升高、iNOS减低,对细胞骨架和黏着斑蛋白形态无明显影响。结论:LPS诱导了HUVECs细胞骨架损伤,大黄素通过调节细胞的凋亡率、调节细胞合成和利用NO的能力、改变细胞迁移和黏附能力,而调节血管内皮通透性、改善内皮屏障功能。同时大黄素促进HUVECs凋亡,抑制内皮细胞的过度增殖,对内皮细胞有一定的保护作用。
关键词
大黄素
细胞骨架
人脐静脉血管内皮细胞
Keywords
Emodin
Cytoskeleton
Human umbilical vein endothelial cells
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
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1
大黄素对脂多糖诱导的内皮细胞骨架损伤及通透性影响的实验研究
李伟
姜月华
胡洪贞
谭颖
周乐
徐经新
《中国中西医结合肾病杂志》
2014
4
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