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清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用及其机制 被引量：3
1
作者 田庆梅 毕宏生 +5 位作者 崔彦 解孝锋 宋继科 郭大东 赵圣亚 杜然然 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期891-896,共6页
背景葡萄膜炎是常见的致盲眼病，多反复发作，目前主要的治疗方法是应用糖皮质激素和免疫抑制剂，但不良反应较多，寻求安全、有效的治疗方法至关重要。目的观察清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的疗效，并探讨其... 背景葡萄膜炎是常见的致盲眼病，多反复发作，目前主要的治疗方法是应用糖皮质激素和免疫抑制剂，但不良反应较多，寻求安全、有效的治疗方法至关重要。目的观察清开灵眼用凝胶对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的疗效，并探讨其作用机制。方法SPF级雌性Lewis大鼠27只，皮下注射200斗l含100μg光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）1177—1191多肽、100μl完全弗氏佐剂（CFA）、100μg结核菌素及100μlPBS的乳化液，在大鼠两足垫处、尾根部两侧及脊背正中均匀注射5个点建立EAU动物模型。将免疫后的大鼠按随机数字表法随机分为模型对照组、清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组。大鼠免疫后第7天开始点眼，模型对照组用生理盐水点眼，清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组分别用相应的药物点眼，每日3次，连续用药7d。从免疫后第1天开始裂隙灯显微镜下观察大鼠眼前节炎症反应并进行炎症评分；免疫后第14天过量麻醉法处死实验动物并获取眼球标本，采用组织病理学方法观察大鼠前房、虹膜和睫状体的炎性细胞浸润情况；采用流式细胞仪测定大鼠脾脏、淋巴结分离的T细胞悬液中CD4^＋和CD8^＋细胞百分比、CD4^＋／CD8^＋值以及Th1细胞和Th17细胞的比例。结果模型对照组大鼠免疫后第9天开始出现眼部炎症表现，第11天炎症反应达高峰期，而清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组大鼠眼部炎症反应的发生较模型对照组晚，炎症反应轻，病程短。免疫后13d，3个组大鼠眼部炎症评分的总体差异有统计学意义（F=26．52，P=0．00）。清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组的炎症评分明显低于模型对照组，差异均有统计学意义（t=6．72、10．11，P〈0．05）。组织病理学检查发现，模型对照组大鼠前房、虹膜及睫状体组织中可见炎性细胞浸润，清开灵眼用凝胶组和妥布霉素地塞米松组大鼠前房、虹膜及睫状体组织中炎性细胞浸润明显减轻。模型对照组大鼠脾脏和淋巴结中CD4^＋细胞、CD8^＋细胞的百分比及CD4^＋／CD8^＋值分别为（83．10±0．15）％、（18．60±0．09）％和4．50±0．02，清开灵眼用凝胶组分别为（79．90±0．21）％、（19．20±0．15）％和4．20±0．04，妥布霉素地塞米松组分别为（78．604-0．09）％、（23．44±0．09）％和3．40±0．01，3个组间CD4^＋、CD8^＋细胞百分比及CD4^＋／CD8^＋值的差异均有统计学意义（F=223．68、530．77、404．83，均P=0．00）。模型对照组大鼠脾脏和淋巴结中CD4^＋^ν干扰素’（IFN-ν^＋），CD4^＋白细胞介素-17^＋（IL-17^＋）细胞的百分比分别为（32．20±0．19）％和（55．10±0．09）％，清开灵眼用凝胶组分别为（20．404-0．18）％和（25．204-0．32）％，妥布霉素地塞米松组分别为（10．40±0．23）％和（8．20±0．15）％，3个组间差异均有统计学意义（F=2986．34、12807．54，均P=0．00）。结论清开灵眼用凝胶点眼可减轻大鼠EAU炎症反应，其作用机制主要是抑制CD4^＋细胞的增生和分化，降低CD4^＋／CD8^＋值，并抑制Th1、Th17效应细胞的分化，减少相应细胞因子的分泌。 展开更多
关键词 中草药 抗炎剂 免疫性疾病 前部葡萄膜炎/免疫性 T淋巴细胞亚群 流式细胞术 TH1细胞 TH17细胞 动物模型 杂交Lewis大鼠
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负透镜诱导豚鼠视网膜中γ-氨基丁酸及其受体的表达 被引量：4
2
作者 沙芳 赵雯 +6 位作者 徐超立 王玲 张小燕 吴建峰 毕爱玲 郭大东 毕宏生 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期123-128,共6页
背景 研究表明,抑制性氨基酸神经递质γ-氨基丁酸（GABA）在近视的发生和发展过程中发挥关键作用,GABA及GABA受体拮抗剂对近视发生的抑制作用已被证实,但相关作用机制的研究鲜见报道.目的 探讨负透镜诱导性近视（LIM）豚鼠视网膜中GABA... 背景 研究表明,抑制性氨基酸神经递质γ-氨基丁酸（GABA）在近视的发生和发展过程中发挥关键作用,GABA及GABA受体拮抗剂对近视发生的抑制作用已被证实,但相关作用机制的研究鲜见报道.目的 探讨负透镜诱导性近视（LIM）豚鼠视网膜中GABA及其受体亚型表达的变化,探讨GABA及GABA受体拮抗剂抑制近视发生的机制.方法 采用随机数字表法将40只3周龄健康三色短毛豚鼠随机分为正常对照组和模型组.正常对照组取右眼作为正常对照眼,模型组右眼佩戴-10 D透镜4周以诱导近视模型作为实验眼,左眼不戴镜作为对照眼.分别于造模前及造模后4周用A型超声法和带状光检影法测量各组豚鼠的眼轴长度和屈光度;于造模后4周断颈法处死豚鼠并分离视网膜,采用高效液相色谱分析（HPLC）法检测豚鼠视网膜中GABA含量的变化,采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测豚鼠视网膜中GABA受体mRNA的相对表达量. 结果 造模后4周,模型组实验眼、正常对照眼和模型组对照眼屈光度分别为（-3.39±0.70）、（1.03±0.68）和（0.77±0.64）D,模型组实验眼近视屈光度较正常对照眼和模型组对照眼均明显增大,差异均有统计学意义（t=-16.382、-17.113,均P＜0.05）;模型组实验眼、正常对照眼和模型组对照眼眼轴长度分别为（8.62±0.08）、（8.31±0.05）和（8.32±0.05） mm,模型组实验眼眼轴较正常对照眼和模型组对照眼明显延长,差异均有统计学意义（t=10.981、15.838,均P＜0.05）;豚鼠正常对照眼、模型组实验眼、模型组对照眼视网膜中GABA含量分别为（14.83±1.20）、（18.63±1.58）和（15.74±0.96） μmol/g,模型组实验眼视网膜中GABA含量明显高于正常对照眼和模型组对照眼,差异均有统计学意义（t=-6.045、6.876,均P＜0.05）;模型组实验眼视网膜中GABAA受体、受体GABAC受体mRNA的相对表达量明显高于正常对照眼,差异均有统计学意义（t=-3.211、-2.532,均P＜0.05）;模型组实验眼视网膜中GABAA受体、受体GABAC受体mRNA的相对表达量明显高于模型组对照眼,差异均有统计学意义（t=2.512、5.645,均P＜0.05）,而3个组间GABAV受体mRNA的相对表达量差异无统计学意义（F=2.676,P＞0.05）. 结论 LIM豚鼠视网膜中GABA及GABAA受体mRNA、GABAC受体mRNA表达上调,而GABAB受体mRNA表达无显著变化. 展开更多
关键词 近视/透镜诱导性 Γ-氨基丁酸 Γ-氨基丁酸受体 视网膜
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黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的防治研究 被引量：1
3
作者 解孝锋 田庆梅 +3 位作者 毕宏生 温莹 张竖 郭爱莲 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期902-907,共6页
背景高危角膜移植患者虽然常规应用免疫抑制性药物，但角膜移植片的排斥率仍很高。近年来传统中药在角膜移植中的作用逐渐引起关注，黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的防治作用需要进一步研究。目的探讨黑睛排斥汤对大鼠高危... 背景高危角膜移植患者虽然常规应用免疫抑制性药物，但角膜移植片的排斥率仍很高。近年来传统中药在角膜移植中的作用逐渐引起关注，黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的防治作用需要进一步研究。目的探讨黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法16只正常雌性SD大鼠角膜作为供体，32只雌性Wistar大鼠作为受体，用角膜缝线法诱导角膜新生血管（CNV），建立大鼠高危角膜移植模型，然后行封闭群大鼠SD．Wistar组间同种异体全板层角膜移植。采用随机数字表法将大鼠随机分为4个组，包括模型对照组（生理盐水灌服）、CsA组[10mg／（kg·d）CsA灌服]、黑睛排斥汤组[4g／（kg·d）黑睛排斥汤灌服]和联合用药组[10mg／（kg·d）CsA＋4g／（kg·d）黑睛排斥汤灌服]，各组大鼠均于同种异体角膜移植后4d开始灌服相应药物，于术后第4天起裂隙灯显微镜下观察眼前节反应，每隔2天观察1次，连续观察30d。参考Larkin等的标准对角膜}昆浊程度、水肿程度及新生血管程度进行评分，记录移植排斥指数（RI）并观察植片的存活状况，对角膜进行常规组织病理学检查，采用流式细胞分析法对受体角膜局部和全身免疫状态进行检测，对4个组大鼠的各种检测指标进行比较。结果模型对照组大鼠角膜移植术后10d左右发生排斥反应，CsA组和黑睛排斥汤组大鼠均于术后12～13d发生排斥反应，而联合用药组大鼠于术后22d发生排斥反应。与模型对照组比较，CsA组、黑睛排斥汤组和联合用药组大鼠角膜移植后角膜混浊程度评分、角膜水肿评分和新生血管评分均明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．05），且联合用药组上述各指标的评分均明显低于CsA组和黑睛排斥汤组，差异均有统计学意义（P〈0．05），而CsA组与黑睛排斥汤组的各种评分差异均无统计学意义（P〉0．05）。模型对照组角膜移植片存活时间平均为（10．38±1．69）d，联合用药组平均为（22．50±3．07）d，差异有统计学意义（t=-9．790，P=0．000）。组织病理学检查表明，术后15d联合用药组大鼠角膜基质中淋巴细胞浸润及新生血管评分少于CsA组和黑睛排斥汤组。流式细胞学检查证实，黑睛排斥汤组、CsA组和联合用药组大鼠角膜移植术后外周血中CD4＋淋巴细胞计数及CD4＋／CD8＋比值均低于模型对照组，联合用药组CD4＋淋巴细胞计数及CD4＋／CD8＋比值均低于CsA组和黑睛排斥汤组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论黑睛排斥汤对高危角膜移植模型大鼠术后角膜排斥反应有抑制作用，其疗效与0．1％CsA接近，二者联合用药有协同作用。 展开更多
关键词 角膜移植术/高危 免疫排斥反应 祖国传统医学 中医药
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