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鸭瘟病毒微滴数字PCR方法的建立与优化
1
作者
邱艳红
廖维连
+4 位作者
蒋文明
杨得胜
宋迟
洪瑾芳
刘道泉
《中国动物检疫》
CAS
2024年第10期91-95,共5页
为快速、准确检测鸭瘟病毒(duck enteritis virus,DEV),根据GenBank中DEV UL6基因序列,设计了微滴数字PCR(ddPCR)的引物和探针,通过条件优化,建立了检测DEV的ddPCR方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了验证。结果显示:在57.1...
为快速、准确检测鸭瘟病毒(duck enteritis virus,DEV),根据GenBank中DEV UL6基因序列,设计了微滴数字PCR(ddPCR)的引物和探针,通过条件优化,建立了检测DEV的ddPCR方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了验证。结果显示:在57.1℃退火温度下,当引物浓度为1.50µmol/L,探针浓度为0.45µmol/L时,病毒拷贝数浓度达到最大,为332 copies/µL;该方法的最低检测限为0.7 copies/µL,且对非鸭瘟病原均仅扩增出阴性微滴,无交叉反应;组内和组间重复试验变异系数均小于10%。结果表明,本研究建立的DEV ddPCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好和稳定性高的优点,可用于低DEV含量样品的检测及其感染的早期诊断和流行病学调查。
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关键词
鸭瘟病毒
微滴数字PCR
方法建立
优化
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职称材料
宽谱鸭疫里默氏菌噬菌体筛选及生物学特性研究
被引量：
3
2
作者
程龙飞
廖维连
+7 位作者
陈红梅
江南松
傅秋玲
万春和
刘荣昌
施少华
黄瑜
傅光华
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期1169-1176,共8页
【目的】筛选宽谱鸭疫里默氏菌噬菌体,作为治疗用噬菌体组合的候选毒株。【方法】以不同含量的噬菌体进行噬斑分析测定35株噬菌体的噬菌谱;利用透射电镜观察、热与酸碱稳定性评估、最佳感染复数(MOI)测定、一步生长试验、杀菌试验分析...
【目的】筛选宽谱鸭疫里默氏菌噬菌体,作为治疗用噬菌体组合的候选毒株。【方法】以不同含量的噬菌体进行噬斑分析测定35株噬菌体的噬菌谱;利用透射电镜观察、热与酸碱稳定性评估、最佳感染复数(MOI)测定、一步生长试验、杀菌试验分析噬菌体的形态结构和部分生物学特性。【结果】35株噬菌体中vB_RanS_202的裂解谱最宽,能裂解42%(42/100)的鸭疫里默氏菌,包括血清1、2、6、10、11和13型共6种血清型菌株。该噬菌体由直径约60 nm的截面为六边形的头部和长约220 nm的尾部组成,不耐热,效价为1.0×10^(7)PFU/mL的噬菌体,经50℃水浴80 min或60℃水浴20 min,即降为1.8×10^(7)~2.6×10^(7)PFU/mL。在pH 5.0~9.0的环境中能维持活性。以RAf488为宿主菌测得其最佳MOI为0.01。一步生长曲线显示,其潜伏期和暴发期分别为60和75 min,平均裂解量约为150 PFU/cell。在宿主菌RAf488中的杀菌试验结果显示,MOI在0.004~0.016时,vB_RanS_202均具有杀菌作用。【结论】噬菌体vB_RanS_202具有宽裂解谱的特点,具备在液体培养基中的杀菌能力。本研究结果为后续噬菌体治疗用毒株的筛选提供参考。
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关键词
鸭疫里默氏菌
噬菌体
噬菌谱
生物学特性
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职称材料
饮水中添加二甲酸钾对土杂鸡生产性能、免疫功能和抗氧化能力的影响
被引量：
1
3
作者
廖维连
《中国畜禽种业》
2023年第9期96-104,共9页
该试验旨在研究饮水中添加二甲酸钾对土杂鸡生产性能、免疫功能和抗氧化能力的影响。试验选取1日龄体重相近、健康的公土杂鸡480只,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复20只鸡,对照组正常饮水,试验1、2、3组分别在饮水中添加350、550、7...
该试验旨在研究饮水中添加二甲酸钾对土杂鸡生产性能、免疫功能和抗氧化能力的影响。试验选取1日龄体重相近、健康的公土杂鸡480只,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复20只鸡,对照组正常饮水,试验1、2、3组分别在饮水中添加350、550、750mg/L二甲酸钾,试验期54d。结果表明:(1)各试验组与对照组在平均日采食量、平均日增重、料重比、免疫器官指数等指标均无显著影响(P>0.05)。(2)饮水中添加不同剂量的二甲酸钾均能显著提高鸡十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度(P<0.05),试验1、3组可显著提高鸡十二指肠的隐窝深度(P<0.05)。与对照组相比,试验1组可显著提高回肠的肠绒毛高度/隐窝深度值,试验2组可显著提高十二指肠和空肠和的肠绒毛高度/隐窝深度值(P<0.05);与对照组相比,试验1、2组均能显著提高鸡血清总蛋白浓度、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G(P<0.05),试验2、3组均能显著提高鸡血清白蛋白浓度、鸡肿瘤坏死因子-α浓度、白细胞介素-6(P<0.05)。(3)与对照组相比,试验2、3组显著提高鸡DPPH自由基清除能力(P<0.05),极显著提高鸡SOD活力、抑制羟自由基能力(P<0.01)。综上,在饮水中添加二甲酸钾对土杂鸡的生产性能无影响,但可提高鸡免疫功能和抗氧化能力,其中以添加550mg/L效果较好。
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关键词
鸡
二甲酸钾
生产性能
免疫功能
抗氧化能力
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职称材料
题名
鸭瘟病毒微滴数字PCR方法的建立与优化
1
作者
邱艳红
廖维连
蒋文明
杨得胜
宋迟
洪瑾芳
刘道泉
机构
福州市
动物
疫病
预防控制中心
将乐县动物疫病预防控制中心
中国
动物
卫生与流行病学
中心
福建省
动物
疫病
预防控制中心
永泰县金蛋发展有限公司
永泰县畜牧水产服务
中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
2024年第10期91-95,共5页
基金
福建省科学技术厅星火项目(2022S0005)。
文摘
为快速、准确检测鸭瘟病毒(duck enteritis virus,DEV),根据GenBank中DEV UL6基因序列,设计了微滴数字PCR(ddPCR)的引物和探针,通过条件优化,建立了检测DEV的ddPCR方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了验证。结果显示:在57.1℃退火温度下,当引物浓度为1.50µmol/L,探针浓度为0.45µmol/L时,病毒拷贝数浓度达到最大,为332 copies/µL;该方法的最低检测限为0.7 copies/µL,且对非鸭瘟病原均仅扩增出阴性微滴,无交叉反应;组内和组间重复试验变异系数均小于10%。结果表明,本研究建立的DEV ddPCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好和稳定性高的优点,可用于低DEV含量样品的检测及其感染的早期诊断和流行病学调查。
关键词
鸭瘟病毒
微滴数字PCR
方法建立
优化
Keywords
DEV
ddPCR
method establishment
optimization
分类号
S851.34 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
宽谱鸭疫里默氏菌噬菌体筛选及生物学特性研究
被引量：
3
2
作者
程龙飞
廖维连
陈红梅
江南松
傅秋玲
万春和
刘荣昌
施少华
黄瑜
傅光华
机构
福建省农业科学院畜牧兽医研究所
将乐县动物疫病预防控制中心
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期1169-1176,共8页
基金
福建省属公益类科研院所基本科研专项(2021R1023-3)
福建省人民政府中国农业科学院农业高质量发展超越“5511”协同创新工程项目(XTCXGC2021012)
福建省农业科学院科技创新团队(CXTD2021005-1)。
文摘
【目的】筛选宽谱鸭疫里默氏菌噬菌体,作为治疗用噬菌体组合的候选毒株。【方法】以不同含量的噬菌体进行噬斑分析测定35株噬菌体的噬菌谱;利用透射电镜观察、热与酸碱稳定性评估、最佳感染复数(MOI)测定、一步生长试验、杀菌试验分析噬菌体的形态结构和部分生物学特性。【结果】35株噬菌体中vB_RanS_202的裂解谱最宽,能裂解42%(42/100)的鸭疫里默氏菌,包括血清1、2、6、10、11和13型共6种血清型菌株。该噬菌体由直径约60 nm的截面为六边形的头部和长约220 nm的尾部组成,不耐热,效价为1.0×10^(7)PFU/mL的噬菌体,经50℃水浴80 min或60℃水浴20 min,即降为1.8×10^(7)~2.6×10^(7)PFU/mL。在pH 5.0~9.0的环境中能维持活性。以RAf488为宿主菌测得其最佳MOI为0.01。一步生长曲线显示,其潜伏期和暴发期分别为60和75 min,平均裂解量约为150 PFU/cell。在宿主菌RAf488中的杀菌试验结果显示,MOI在0.004~0.016时,vB_RanS_202均具有杀菌作用。【结论】噬菌体vB_RanS_202具有宽裂解谱的特点,具备在液体培养基中的杀菌能力。本研究结果为后续噬菌体治疗用毒株的筛选提供参考。
关键词
鸭疫里默氏菌
噬菌体
噬菌谱
生物学特性
Keywords
Riemerella anatipestifer
phage
phagocytosis spectrum
biological characteristics
分类号
Q939.48 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
饮水中添加二甲酸钾对土杂鸡生产性能、免疫功能和抗氧化能力的影响
被引量：
1
3
作者
廖维连
机构
将乐县动物疫病预防控制中心
出处
《中国畜禽种业》
2023年第9期96-104,共9页
文摘
该试验旨在研究饮水中添加二甲酸钾对土杂鸡生产性能、免疫功能和抗氧化能力的影响。试验选取1日龄体重相近、健康的公土杂鸡480只,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复20只鸡,对照组正常饮水,试验1、2、3组分别在饮水中添加350、550、750mg/L二甲酸钾,试验期54d。结果表明:(1)各试验组与对照组在平均日采食量、平均日增重、料重比、免疫器官指数等指标均无显著影响(P>0.05)。(2)饮水中添加不同剂量的二甲酸钾均能显著提高鸡十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度(P<0.05),试验1、3组可显著提高鸡十二指肠的隐窝深度(P<0.05)。与对照组相比,试验1组可显著提高回肠的肠绒毛高度/隐窝深度值,试验2组可显著提高十二指肠和空肠和的肠绒毛高度/隐窝深度值(P<0.05);与对照组相比,试验1、2组均能显著提高鸡血清总蛋白浓度、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G(P<0.05),试验2、3组均能显著提高鸡血清白蛋白浓度、鸡肿瘤坏死因子-α浓度、白细胞介素-6(P<0.05)。(3)与对照组相比,试验2、3组显著提高鸡DPPH自由基清除能力(P<0.05),极显著提高鸡SOD活力、抑制羟自由基能力(P<0.01)。综上,在饮水中添加二甲酸钾对土杂鸡的生产性能无影响,但可提高鸡免疫功能和抗氧化能力,其中以添加550mg/L效果较好。
关键词
鸡
二甲酸钾
生产性能
免疫功能
抗氧化能力
Keywords
Chicken
Potassium diformate
Production performance
Immune function
Antioxidant capacity
分类号
S831.5 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸭瘟病毒微滴数字PCR方法的建立与优化
邱艳红
廖维连
蒋文明
杨得胜
宋迟
洪瑾芳
刘道泉
《中国动物检疫》
CAS
2024
0
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职称材料
2
宽谱鸭疫里默氏菌噬菌体筛选及生物学特性研究
程龙飞
廖维连
陈红梅
江南松
傅秋玲
万春和
刘荣昌
施少华
黄瑜
傅光华
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
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下载PDF
职称材料
3
饮水中添加二甲酸钾对土杂鸡生产性能、免疫功能和抗氧化能力的影响
廖维连
《中国畜禽种业》
2023
1
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