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抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的制备
被引量：
2
1
作者
张鸯
陶明亮
+1 位作者
路保通
靳亚平
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2013年第3期27-32,38,共7页
【目的】制备抗Zhangfei蛋白的单克隆抗体,并鉴定其特性。【方法】用Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0融合,筛选出阳性克隆,应用有限稀释法筛选抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤株;采用腹水诱生法制备单抗腹水,用...
【目的】制备抗Zhangfei蛋白的单克隆抗体,并鉴定其特性。【方法】用Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0融合,筛选出阳性克隆,应用有限稀释法筛选抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤株;采用腹水诱生法制备单抗腹水,用饱和硫酸铵法纯化腹水抗体;采用间接ELISA、单克隆抗体亚型检测试剂盒、免疫印记技术、曲线拟合方案等分别鉴定单抗效价、亚型、特异性和亲和力等特性。【结果】免疫小鼠的血清抗体效价达1∶5 000以上,细胞融合克隆率为98.96%,阳性克隆率为30.18%,筛选出2株抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤细胞,其培养上清效价均达到1∶800,腹水单抗效价分别为1∶105和1∶2×105,亲和常数分别为2.5×106和2.3×106。制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的亚型均为IgG1类型。【结论】制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体具有较高的效价和较强的亲和力,可用于进一步研究Zhangfei蛋白在机体中的生理作用。
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关键词
Zhangfei蛋白
抗体效价
细胞融合
单克隆抗体
特异性
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职称材料
题名
抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的制备
被引量：
2
1
作者
张鸯
陶明亮
路保通
靳亚平
机构
宝鸡市陈仓区慕仪镇政府
太白县畜牧兽医技术推广站
宝鸡市
兽医局
西北农林科技大学动物医学院
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2013年第3期27-32,38,共7页
基金
国家自然科学基金项目(39970544)
西北农林科技大学青年骨干教师支持计划项目(01140305)
文摘
【目的】制备抗Zhangfei蛋白的单克隆抗体,并鉴定其特性。【方法】用Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0融合,筛选出阳性克隆,应用有限稀释法筛选抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤株;采用腹水诱生法制备单抗腹水,用饱和硫酸铵法纯化腹水抗体;采用间接ELISA、单克隆抗体亚型检测试剂盒、免疫印记技术、曲线拟合方案等分别鉴定单抗效价、亚型、特异性和亲和力等特性。【结果】免疫小鼠的血清抗体效价达1∶5 000以上,细胞融合克隆率为98.96%,阳性克隆率为30.18%,筛选出2株抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤细胞,其培养上清效价均达到1∶800,腹水单抗效价分别为1∶105和1∶2×105,亲和常数分别为2.5×106和2.3×106。制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的亚型均为IgG1类型。【结论】制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体具有较高的效价和较强的亲和力,可用于进一步研究Zhangfei蛋白在机体中的生理作用。
关键词
Zhangfei蛋白
抗体效价
细胞融合
单克隆抗体
特异性
Keywords
Zhangfei protein
antibody titer
cell fusion
monoclonal antibody
individualit
分类号
Q813.2 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的制备
张鸯
陶明亮
路保通
靳亚平
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2013
2
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