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题名T克隆载体的构建
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作者
胡学军
徐红梅
赵东利
李晶泉
袁晓东
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机构
大连大学医学院生物教研室
北京农学院
宝生物大连有限工程公司
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出处
《北京农学院学报》
2001年第4期6-8,共3页
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文摘
本文描述了一种构建与PCR产物直接连接的克隆载体的方法。以高拷贝克隆载体 pUC118为骨架载体,在 pUC118质粒Ampr 基因的Eam110 5I酶切位点上,以点突变的方式封闭Eam110 5I酶切位点。经转化大肠杆菌JM 10 9证实,该改造过的pUC118质粒,可使宿主细胞具有氨苄抗性,仍可作为氨苄选择标记的克隆载体。将一人工合成的具有两个Eam110 5I酶切位点的互补寡聚核苷酸链(两端具有BamHI接头)插入已封闭Eam110 5I酶切位点的pUC118 载体的BamHI位点,构成新的克隆载体,此质粒命名为pUC118E。该载体经Eam110 5I酶切后,可产生 3 端突出一个T碱基的T -vector,能与PCR产物直接连接。
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关键词
T-vector
pUC118
PCR产物
限制酶Eam1105I
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Keywords
T-vector,pUC118,PCR produces, Eam 1105I
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分类号
Q813.2
[生物学—生物工程]
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