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环鸟苷酸兔单克隆抗体的制备和竞争酶联免疫吸附测定方法的建立 被引量:1
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作者 谭兴梅 胡海峰 陈枢青 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期423-428,共6页
目的:研制环鸟苷酸(cGMP)兔单克隆抗体,并建立测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。方法:用人工合成的环鸟苷酸一钥孔血蓝蛋白(cGMP-KLH)免疫新西兰大白兔,采用Epitomics公司的兔单克隆抗体技术制备针对cGMP的兔单克隆抗体;应用cGMP... 目的:研制环鸟苷酸(cGMP)兔单克隆抗体,并建立测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。方法:用人工合成的环鸟苷酸一钥孔血蓝蛋白(cGMP-KLH)免疫新西兰大白兔,采用Epitomics公司的兔单克隆抗体技术制备针对cGMP的兔单克隆抗体;应用cGMP兔单克隆抗体建立竞争ELISA方法,并对该方法的特异性、精密度和回收率进行测定。结果:所制备的cGMP兔单克隆抗体的效价为3.1.g/mL,50%抑制浓度(IC50)为12.57ng/mL。与环磷酸肌苷的交叉反应率为33.1%,与其他结构类似的化合物无交叉反应。所建立的cGMP竞争ELISA方法的检测范围为0~120ng/mL,最低检测限为1.95ng/mL,回收率为89%~103%,批次内和批次间的精密度分别小于11.68%和13.85%。结论:成功制备高效价、高特异性的cGMP兔单克隆抗体,并建立了测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。 展开更多
关键词 环GMP 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定
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