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猪肌肉组织中碱性磷酸酶的纯化及特性研究 被引量:3
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作者 李红卫 王开萍 +3 位作者 吴娱 唐正江 汤飞 刘国庆 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期560-565,共6页
猪肌肉组织中碱性磷酸酶经预冷的正丁醇提取、硫酸铵分级沉淀、DEAE-52纤维素离子交换柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析得到碱性磷酸酶。纯化倍数为57.34,比活力为28.77U/mg。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electr... 猪肌肉组织中碱性磷酸酶经预冷的正丁醇提取、硫酸铵分级沉淀、DEAE-52纤维素离子交换柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析得到碱性磷酸酶。纯化倍数为57.34,比活力为28.77U/mg。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)分析可得该酶的分子质量为66kDa。该酶催化底物对硝基苯磷酸二钠(p-NPP)的最适pH值为9.7,最适温度为30℃,Mg2+和Ca2+对其有激活作用,Zn2+和EDTA对其有抑制作用。 展开更多
关键词 猪肌肉组织 碱性磷酸酶 分离纯化
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柱前衍生-反相高效液相色谱法检测富硒米曲霉中有机硒形态 被引量:25
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作者 李红卫 王开萍 +3 位作者 吴娱 唐正江 汤飞 刘国庆 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第22期137-141,共5页
建立高效液相色谱法测定富硒米曲霉中有机硒形态的分析方法。采用6 mol/L HCl溶液,50℃水解富硒米曲霉48 h,提取样品中的有机硒,4-氯-3,5-二硝基三氟甲苯柱前衍生,C18反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以乙腈-水(1∶1,V/V)... 建立高效液相色谱法测定富硒米曲霉中有机硒形态的分析方法。采用6 mol/L HCl溶液,50℃水解富硒米曲霉48 h,提取样品中的有机硒,4-氯-3,5-二硝基三氟甲苯柱前衍生,C18反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以乙腈-水(1∶1,V/V)和p H 6.8乙酸-乙酸钠缓冲液为流动相进行梯度洗脱,紫外检测波长:240 nm,测得富硒米曲霉中有机硒化合物主要是硒代胱氨酸,检出限(RSN=3)为0.680 mg/L,定量限(RSN=10)为2.244 mg/L,线性范围为5.0~100 mg/L,加标回收率为94.8%~105.8%,硒代胱氨酸的含量为1.25 mg/g。本方法简单、灵敏、重复性好,可适用于富硒米曲霉及相关产品中有机硒形态的检测分析。 展开更多
关键词 富硒米曲霉 有机硒 硒代氨基酸 柱前衍生-反相高效液相色谱法
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