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高纯度日本血吸虫卵的分离及活性鉴定
被引量：
2
1
作者
钟政荣
徐云侠
+4 位作者
宫继勇
罗庆礼
闻慧琴
宋晓蓉
沈继龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期209-212,共4页
目的探讨制备高纯度、高生物活性的的日本血吸虫卵分离方法。方法将匀浆后的血吸虫感染的兔肝组织悬液分级过滤,再将滤液离心,去除组织碎片,分离的虫卵再次经过325目分样筛过滤,收集筛上虫卵,最后将收集的虫卵用密度1.070的Percoll分离...
目的探讨制备高纯度、高生物活性的的日本血吸虫卵分离方法。方法将匀浆后的血吸虫感染的兔肝组织悬液分级过滤,再将滤液离心,去除组织碎片,分离的虫卵再次经过325目分样筛过滤,收集筛上虫卵,最后将收集的虫卵用密度1.070的Percoll分离液梯度离心,吸取下层Percoll液中的纯化虫卵;显微镜观察分离虫卵的纯度,吖啶橙染色观察虫卵的死活,环卵沉淀试验鉴定虫卵的分泌活性。结果每个肝脏获得约1g左右的虫卵,分离的虫卵纯度高,吖啶橙染色和环卵沉淀试验结果显示,分离的活虫卵比例高、生物活性好。结论该虫卵分离方法操作简单、用时短、效果好,分离的虫卵完全满足各种研究的需要。
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关键词
日本血吸虫
虫卵
分离
纯化
活性
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职称材料
氯化锂介导经典Wnt/β-catenin信号通路在大鼠脂肪干细胞增殖和成骨中的作用
被引量：
5
2
作者
赵璇
徐燕
+1 位作者
郑桂婷
沈继龙
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014年第5期590-594,共5页
目的探讨在体外生长环境下不同浓度氯化锂对脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成骨分化的作用及其可能的机制。方法①从3周龄SD大鼠腹股沟脂垫分离出脂肪组织,使用0.1%Ⅰ型胶原酶消化后置于含10%胎牛血清DMEM培养,以0、2.5、5、10、20、40 mmol/...
目的探讨在体外生长环境下不同浓度氯化锂对脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成骨分化的作用及其可能的机制。方法①从3周龄SD大鼠腹股沟脂垫分离出脂肪组织,使用0.1%Ⅰ型胶原酶消化后置于含10%胎牛血清DMEM培养,以0、2.5、5、10、20、40 mmol/L浓度的氯化锂作用ADSCs24、48、72 h,用MTT法测定氯化锂对细胞增殖的作用;②ADSCs加入含0、2.5、5、10、20、40 mmol/L氯化锂的成骨培养液中培养7 d后测定细胞中碱性磷酸酶(AKP)的活性;③用RT-PCR法检测成骨诱导3 d后,不同浓度氯化锂作用7 d时ADSCs中β-catenin、糖原合成激酶3β、AKP的表达。结果在体外环境培养下,低浓度氯化锂(2.5、5、10 mmol/L)促进干细胞增殖,高浓度氯化锂(20、40 mmol/L)抑制细胞增殖。5、10 mmol/L氯化锂促进ADSCs中AKP的活性,但是40 mmol/L具有明显抑制AKP活性的作用。同时,氯化锂能上调β-catenin和AKP的表达。结论氯化锂在体外对大鼠ADSCs增殖有双重影响,并且促进AKP活性和ADSCs成骨分化,具有剂量依赖性。5 mmol/L浓度的氯化锂可作为促进大鼠ADSCs增殖和成骨分化的最适浓度。
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关键词
WNT信号通路
脂肪干细胞
氯化锂
增殖
成骨分化
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职称材料
sIL-13Rα2抑制IL-13介导的NIH-3T3胶原I的合成及血吸虫病肝组织中sIL-13Rα2/IL-13的表达(英文)
被引量：
1
3
作者
李静
王维
+6 位作者
李小月
储德勇
闻慧琴
周银娣
张诗海
罗庆礼
沈继龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期715-721,共7页
目的研究在成纤维细胞NIH-3T3中IL-13可溶性受体sIL-13Rα2对IL-13的抑制作用,为进一步研究sIL-13Rα2对日本血吸虫感染小鼠体内肝纤维化的治疗作用奠定基础。方法用ELISA和RT-PCR检测感染日本血吸虫的BALB/c小鼠0、6、8、10和12w不同...
目的研究在成纤维细胞NIH-3T3中IL-13可溶性受体sIL-13Rα2对IL-13的抑制作用,为进一步研究sIL-13Rα2对日本血吸虫感染小鼠体内肝纤维化的治疗作用奠定基础。方法用ELISA和RT-PCR检测感染日本血吸虫的BALB/c小鼠0、6、8、10和12w不同感染时期肝脏组织IL-13和sIL-13Rα2表达和转录水平。构建sIL-13Rα2表达质粒转染成纤维细胞NIH-3T3,用IL-13(50ng/mL)刺激转染后成纤维细胞NIH-3T3,用RT-PCR和Western blotting分别检测该细胞分泌的Ⅰ型胶原。结果感染后小鼠肝脏肉芽肿组织中IL-13和sIL-13Rα2的蛋白表达水平随感染时间的延长而逐渐增高,第8wIL-13水平达到高峰(16.1586pg/mL),随后逐渐降低但仍高于正常水平(3.4146pg/mLP=0.017);第10wsIL-13Rα2的分泌达到高峰(4827.426pg/mL),以后逐渐减低,但仍高于正常水平(4057.112pg/mLP=0.021)。IL-13和sIL-13Rα2的mRNA转录趋势和ELISA检测结果相符合,均随感染时间的延长而增高,分别在第8w和第10w达到最高峰,随后逐渐降低但仍高于正常组小鼠(P=0.033;P=0.025)。实验组(sIL-13Rα2=2mg/mL)Ⅰ型胶原mRNA转录水平较正常对照组减低8.83%(P=0.012);蛋白水平较对照组减低7.41%(P=0.031)。结论sIL-13Rα2在NIH-3T3细胞中对IL-13有抑制作用,提示sIL-13Rα2在治疗血吸虫病肝纤维化中具有潜在价值。
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关键词
sIL-13Rα2
IL-13
NIH-3T3
日本血吸虫病
肝纤维化
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职称材料
题名
高纯度日本血吸虫卵的分离及活性鉴定
被引量：
2
1
作者
钟政荣
徐云侠
宫继勇
罗庆礼
闻慧琴
宋晓蓉
沈继龙
机构
安徽省
蚌埠医学院第一附属医院检验科
安徽省
蚌埠医学院第一附属医院神经内科
安徽
医科大学
病原
生物学
教研室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期209-212,共4页
基金
国家自然科学基金(No.81071376)
安徽省教育厅自然科学基金重点项目(No.KJ2011A205)
安徽省自然科学基金(No.090413089)
文摘
目的探讨制备高纯度、高生物活性的的日本血吸虫卵分离方法。方法将匀浆后的血吸虫感染的兔肝组织悬液分级过滤,再将滤液离心,去除组织碎片,分离的虫卵再次经过325目分样筛过滤,收集筛上虫卵,最后将收集的虫卵用密度1.070的Percoll分离液梯度离心,吸取下层Percoll液中的纯化虫卵;显微镜观察分离虫卵的纯度,吖啶橙染色观察虫卵的死活,环卵沉淀试验鉴定虫卵的分泌活性。结果每个肝脏获得约1g左右的虫卵,分离的虫卵纯度高,吖啶橙染色和环卵沉淀试验结果显示,分离的活虫卵比例高、生物活性好。结论该虫卵分离方法操作简单、用时短、效果好,分离的虫卵完全满足各种研究的需要。
关键词
日本血吸虫
虫卵
分离
纯化
活性
Keywords
Schistosoma japonicum
eggs
isolation
purification
viability
分类号
R383.2 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
氯化锂介导经典Wnt/β-catenin信号通路在大鼠脂肪干细胞增殖和成骨中的作用
被引量：
5
2
作者
赵璇
徐燕
郑桂婷
沈继龙
机构
安徽
医科大学口腔医学院
安徽
医科大学附属口腔医院
安徽
医科大学附属省口腔医院牙周黏膜科
安徽省病原生物学省级实验室
和人兽共患病
安徽省
重点
实验室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014年第5期590-594,共5页
基金
安徽省自然科学基金(编号:1308085MH130)
文摘
目的探讨在体外生长环境下不同浓度氯化锂对脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成骨分化的作用及其可能的机制。方法①从3周龄SD大鼠腹股沟脂垫分离出脂肪组织,使用0.1%Ⅰ型胶原酶消化后置于含10%胎牛血清DMEM培养,以0、2.5、5、10、20、40 mmol/L浓度的氯化锂作用ADSCs24、48、72 h,用MTT法测定氯化锂对细胞增殖的作用;②ADSCs加入含0、2.5、5、10、20、40 mmol/L氯化锂的成骨培养液中培养7 d后测定细胞中碱性磷酸酶(AKP)的活性;③用RT-PCR法检测成骨诱导3 d后,不同浓度氯化锂作用7 d时ADSCs中β-catenin、糖原合成激酶3β、AKP的表达。结果在体外环境培养下,低浓度氯化锂(2.5、5、10 mmol/L)促进干细胞增殖,高浓度氯化锂(20、40 mmol/L)抑制细胞增殖。5、10 mmol/L氯化锂促进ADSCs中AKP的活性,但是40 mmol/L具有明显抑制AKP活性的作用。同时,氯化锂能上调β-catenin和AKP的表达。结论氯化锂在体外对大鼠ADSCs增殖有双重影响,并且促进AKP活性和ADSCs成骨分化,具有剂量依赖性。5 mmol/L浓度的氯化锂可作为促进大鼠ADSCs增殖和成骨分化的最适浓度。
关键词
WNT信号通路
脂肪干细胞
氯化锂
增殖
成骨分化
Keywords
Wnt/β-catenin signaling pathway
adiposed-derived stem cell
Lithium chloride
proliferation
osteo-genic differentiation
分类号
R781.4 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
sIL-13Rα2抑制IL-13介导的NIH-3T3胶原I的合成及血吸虫病肝组织中sIL-13Rα2/IL-13的表达(英文)
被引量：
1
3
作者
李静
王维
李小月
储德勇
闻慧琴
周银娣
张诗海
罗庆礼
沈继龙
机构
安徽省病原生物学省级实验室
安徽
医科大学
病原
生物学
教研室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期715-721,共7页
基金
Supported by the grant from the National Natural Science Foundation of China ( No .30571631
30872209)
the grant from key provincial Natural Science Foundation of Anhui(KJ2009A80)
文摘
目的研究在成纤维细胞NIH-3T3中IL-13可溶性受体sIL-13Rα2对IL-13的抑制作用,为进一步研究sIL-13Rα2对日本血吸虫感染小鼠体内肝纤维化的治疗作用奠定基础。方法用ELISA和RT-PCR检测感染日本血吸虫的BALB/c小鼠0、6、8、10和12w不同感染时期肝脏组织IL-13和sIL-13Rα2表达和转录水平。构建sIL-13Rα2表达质粒转染成纤维细胞NIH-3T3,用IL-13(50ng/mL)刺激转染后成纤维细胞NIH-3T3,用RT-PCR和Western blotting分别检测该细胞分泌的Ⅰ型胶原。结果感染后小鼠肝脏肉芽肿组织中IL-13和sIL-13Rα2的蛋白表达水平随感染时间的延长而逐渐增高,第8wIL-13水平达到高峰(16.1586pg/mL),随后逐渐降低但仍高于正常水平(3.4146pg/mLP=0.017);第10wsIL-13Rα2的分泌达到高峰(4827.426pg/mL),以后逐渐减低,但仍高于正常水平(4057.112pg/mLP=0.021)。IL-13和sIL-13Rα2的mRNA转录趋势和ELISA检测结果相符合,均随感染时间的延长而增高,分别在第8w和第10w达到最高峰,随后逐渐降低但仍高于正常组小鼠(P=0.033;P=0.025)。实验组(sIL-13Rα2=2mg/mL)Ⅰ型胶原mRNA转录水平较正常对照组减低8.83%(P=0.012);蛋白水平较对照组减低7.41%(P=0.031)。结论sIL-13Rα2在NIH-3T3细胞中对IL-13有抑制作用,提示sIL-13Rα2在治疗血吸虫病肝纤维化中具有潜在价值。
关键词
sIL-13Rα2
IL-13
NIH-3T3
日本血吸虫病
肝纤维化
Keywords
sIL-13Rα2
IL-13
NIH-3T3
Schistosoma japanicum
hepatic fibrosis
分类号
R587.105 [医药卫生—内分泌]
R532.21 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高纯度日本血吸虫卵的分离及活性鉴定
钟政荣
徐云侠
宫继勇
罗庆礼
闻慧琴
宋晓蓉
沈继龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
氯化锂介导经典Wnt/β-catenin信号通路在大鼠脂肪干细胞增殖和成骨中的作用
赵璇
徐燕
郑桂婷
沈继龙
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2014
5
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下载PDF
职称材料
3
sIL-13Rα2抑制IL-13介导的NIH-3T3胶原I的合成及血吸虫病肝组织中sIL-13Rα2/IL-13的表达(英文)
李静
王维
李小月
储德勇
闻慧琴
周银娣
张诗海
罗庆礼
沈继龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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职称材料
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