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板栗RAPD影响因素的研究 被引量:1
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作者 项艳 高健 +3 位作者 张晓渡 朱谦 朱苏文 程备久 《经济林研究》 2001年第1期13-16,共4页
稳定的 RAPD反应体系是进行 RAPD分析的关键。分别测试了模板 DNA、d NTP、Mg2 +、引物、Taq DNA聚合酶浓度和变性时间、退火温度及时间、延伸时间、循环次数等对反应结果的影响。通过实验确定了板栗最佳的 RAPD反应条件。在 5 0 μl反... 稳定的 RAPD反应体系是进行 RAPD分析的关键。分别测试了模板 DNA、d NTP、Mg2 +、引物、Taq DNA聚合酶浓度和变性时间、退火温度及时间、延伸时间、循环次数等对反应结果的影响。通过实验确定了板栗最佳的 RAPD反应条件。在 5 0 μl反应体系中含有 5 0 ng模板、0 .74μmol/L随机引物、180 μmol/L d NTP、3 U Taq DNA聚合酶、2 .0 mmo1/LMg Cl2 。反应扩增程序为 :94℃预变性5 min,40次热循环 ,每个循环包括 :94℃变性 3 0 sec,3 6℃退火 45 sec,72℃延伸 90 sec,最后 72℃终延伸 7min。按照优化的 RAPD条件进行的重复实验 ,重现性良好。 展开更多
关键词 板栗 RAPD分析 PAPD反应体系 模板DNA TaqDNA聚合酶浓度 变性时间 退火温度
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