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靶向La的外源性microRNA抑制HBV复制和表达的实验研究
被引量：
4
1
作者
郜玉峰
叶珺
+4 位作者
邹桂舟
余莉
沈继龙
李家斌
李旭
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2011年第1期11-15,共5页
目的设计并构建靶向La的microRNA表达载体,观察其对La基因的抑制作用,探讨其在HBV感染基因治疗中的应用价值。方法以La为靶基因,设计并构建3个针对La不同位点的microRNA表达载体,通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR和Western blo...
目的设计并构建靶向La的microRNA表达载体,观察其对La基因的抑制作用,探讨其在HBV感染基因治疗中的应用价值。方法以La为靶基因,设计并构建3个针对La不同位点的microRNA表达载体,通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR和Western blot检测其对La mR-NA和蛋白的抑制作用,乙肝五项定量和HBV DNA检测其对HBV的抑制作用。结果 3个外源性miRNA(amiRNA)均能明显降低La mRNA和蛋白的表达,其中amiRNA-La-1130抑制效应最强,转染后72h La mRNA和蛋白的水平平均下降了58.6%和50.6%(P<0.01);但仅有amiRNA-La-1130质粒能显著抑制相应细胞株中HBsAg和HBeAg的分泌,抑制率为23.3%和25.8%(P<0.01),HBV DNA的平均抑制率为22.3%(P<0.01)。结论靶向La的amiRNA能显著抑制靶基因的表达,进而抑制HBV的复制和表达。La基因可作为慢性HBV感染联合基因治疗的候选靶点之一。
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关键词
肝炎病毒
乙型
RNA干扰
在线阅读
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职称材料
外源性microRNA介导的RNA干扰抑制HBV复制和表达
被引量：
6
2
作者
郜玉峰
余莉
+4 位作者
叶珺
邹桂舟
李家斌
沈继龙
李旭
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010年第4期443-446,共4页
目的设计并构建靶向HBV的外源性microRNA表达载体,观察其对HBV表达和复制的抑制作用。方法以HBVP基因和X基因为靶基因,根据pcDNA6.2-G/W-miR载体要求,设计靶向HBV的microRNA序列,进行直接合成获得目的片段并克隆到载体中,测序正确的载...
目的设计并构建靶向HBV的外源性microRNA表达载体,观察其对HBV表达和复制的抑制作用。方法以HBVP基因和X基因为靶基因,根据pcDNA6.2-G/W-miR载体要求,设计靶向HBV的microRNA序列,进行直接合成获得目的片段并克隆到载体中,测序正确的载体通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR、乙肝五项定量和荧光定量PCR检测其对HBVmRNA和HBVDNA的抑制作用。结果质粒的转染效率为50%～60%,在这种状态下,外源性microRNA表达载体在HBVmRNA和HBsAg、HBeAg和HBVDNA水平上均能显著抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达(P<0.05)。结论外源性microRNA表达载体构建成功,并能抑制HBV靶基因的表达,为其在慢性HBV感染基因治疗中的应用奠定了基础。
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关键词
肝炎病毒
乙型
RNA
小分子干扰
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职称材料
题名
靶向La的外源性microRNA抑制HBV复制和表达的实验研究
被引量：
4
1
作者
郜玉峰
叶珺
邹桂舟
余莉
沈继龙
李家斌
李旭
机构
安徽
医科大学第二附属医院肝病科
安徽省人兽共患病实验室教育部省部共建重点实验室
安徽
医科大学第一附属医院感染病科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2011年第1期11-15,共5页
基金
国家自然科学基金(编号:30700698)
文摘
目的设计并构建靶向La的microRNA表达载体,观察其对La基因的抑制作用,探讨其在HBV感染基因治疗中的应用价值。方法以La为靶基因,设计并构建3个针对La不同位点的microRNA表达载体,通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR和Western blot检测其对La mR-NA和蛋白的抑制作用,乙肝五项定量和HBV DNA检测其对HBV的抑制作用。结果 3个外源性miRNA(amiRNA)均能明显降低La mRNA和蛋白的表达,其中amiRNA-La-1130抑制效应最强,转染后72h La mRNA和蛋白的水平平均下降了58.6%和50.6%(P<0.01);但仅有amiRNA-La-1130质粒能显著抑制相应细胞株中HBsAg和HBeAg的分泌,抑制率为23.3%和25.8%(P<0.01),HBV DNA的平均抑制率为22.3%(P<0.01)。结论靶向La的amiRNA能显著抑制靶基因的表达,进而抑制HBV的复制和表达。La基因可作为慢性HBV感染联合基因治疗的候选靶点之一。
关键词
肝炎病毒
乙型
RNA干扰
Keywords
virus
hepatitis B
RNA interference
分类号
R575.1 [医药卫生—消化系统]
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
外源性microRNA介导的RNA干扰抑制HBV复制和表达
被引量：
6
2
作者
郜玉峰
余莉
叶珺
邹桂舟
李家斌
沈继龙
李旭
机构
安徽
医科大学第二附属医院感染病科
安徽省
人兽
共
患病
实验室
安徽
医科大学第一附属医院感染病科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010年第4期443-446,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:30700698)
文摘
目的设计并构建靶向HBV的外源性microRNA表达载体,观察其对HBV表达和复制的抑制作用。方法以HBVP基因和X基因为靶基因,根据pcDNA6.2-G/W-miR载体要求,设计靶向HBV的microRNA序列,进行直接合成获得目的片段并克隆到载体中,测序正确的载体通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR、乙肝五项定量和荧光定量PCR检测其对HBVmRNA和HBVDNA的抑制作用。结果质粒的转染效率为50%～60%,在这种状态下,外源性microRNA表达载体在HBVmRNA和HBsAg、HBeAg和HBVDNA水平上均能显著抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达(P<0.05)。结论外源性microRNA表达载体构建成功,并能抑制HBV靶基因的表达,为其在慢性HBV感染基因治疗中的应用奠定了基础。
关键词
肝炎病毒
乙型
RNA
小分子干扰
Keywords
hepatitis virus
B type
RNA
small interfering
分类号
R575.1 [医药卫生—消化系统]
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向La的外源性microRNA抑制HBV复制和表达的实验研究
郜玉峰
叶珺
邹桂舟
余莉
沈继龙
李家斌
李旭
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2011
4
在线阅读
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职称材料
2
外源性microRNA介导的RNA干扰抑制HBV复制和表达
郜玉峰
余莉
叶珺
邹桂舟
李家斌
沈继龙
李旭
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010
6
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职称材料
已选择
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引证文献
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