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枯草杆菌漆酶重要功能位点的保守性与可变性分析
被引量：
2
1
作者
焦晶
杨雪
+4 位作者
金兰娜
高键
周洋
肖亚中
张应玖
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期1320-1327,共8页
在对比分析天然枯草杆菌漆酶(CAR)的一级结构与三维空间结构的基础上,锁定了CAR的底物结合通道和铜离子结合位点,设计并构建了CAR的4种突变体.对比分析了野生型酶与4种突变体酶的性质及催化功能,结果表明,该漆酶分子中位于第二保守区的H...
在对比分析天然枯草杆菌漆酶(CAR)的一级结构与三维空间结构的基础上,锁定了CAR的底物结合通道和铜离子结合位点,设计并构建了CAR的4种突变体.对比分析了野生型酶与4种突变体酶的性质及催化功能,结果表明,该漆酶分子中位于第二保守区的H155位点是漆酶催化所必需的,H155即使被其同义氨基酸(如Arg)替换,也会因氧化还原电势的降低而降低漆酶的催化活力,同时还会导致漆酶的热稳定性和酸碱稳定性降低,以及最适p H值酸移;位于非保守区的A158位点与I224位点的保守性对漆酶的催化是有利的,而S210G突变增强了漆酶的稳定性与催化功能,这可能与S210G突变增强了漆酶的底物通道上一段富含Pro片段的柔性有关.此外,A158/R155H突变(CAHE)可能导致漆酶不耐冷,在低温(<50℃)时引起酶活明显降低.所研究的漆酶在2,2'-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)介体存在下,对靛蓝类染料(如靛蓝胭脂红)和三苯甲烷类染料(如结晶紫)的脱色率均高于对偶氮类染料(如甲基红和刚果红)和蒽醌类染料(如活性亮蓝),说明该漆酶对染料有一定的选择性.
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关键词
漆酶
结构
催化
枯草芽孢杆菌
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职称材料
芡实皮渣多糖的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究
被引量：
12
2
作者
刘洋
张汆
+5 位作者
何小宁
陈志宏
何晓伟
赵维萍
朱国美
查明方
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2020年第22期142-149,共8页
为了实现芡实加工副产物资源的高值化利用,优化芡实皮渣多糖的提取工艺参数,分析其理化性质,初步研究多糖的体外抗氧化活性。在单因素实验基础上,选择料液比、提取温度、提取时间、醇沉浓度为自变量,多糖得率为因变量,通过L9(34)正交试...
为了实现芡实加工副产物资源的高值化利用,优化芡实皮渣多糖的提取工艺参数,分析其理化性质,初步研究多糖的体外抗氧化活性。在单因素实验基础上,选择料液比、提取温度、提取时间、醇沉浓度为自变量,多糖得率为因变量,通过L9(34)正交试验法优化芡实皮渣多糖的提取工艺。利用5种体外抗氧化活性测试方法,即总还原力,清除羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子和亚硝酸盐,并与抗坏血酸进行对比,评价芡实皮渣多糖的抗氧化能力。结果表明:芡实皮渣多糖最佳提取工艺为料液比1∶40、浸提温度55℃、浸提40 min、醇沉浓度80%,提取3次,得率45.94%,纯度82.67%。碘-碘化钾反应显示其属于非淀粉类多糖,HPLC分析显示该多糖的基本结构单元为葡萄糖。吸水性和吸油分别为(65.15±1.52)和(1.27±0.04)g/g,多糖凝胶质构特性结果显示其黏性很大,弹性较低,回复能力弱。多糖对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子和亚硝酸盐具有一定的清除能力,当芡实皮渣多糖浓度为1.0 mg/mL时,对羟基自由基、超氧离子和亚硝酸盐的清除率分别为35.56%、34.88%和20.63%,对DPPH自由基清除率IC50为(0.307±0.008)mg/mL;本研究优选的芡实皮渣多糖提取工艺稳定可靠,多糖具有一定的抗氧化能力,实验结果可为芡实加工副产物资源的综合开发利用提供理论基础。
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关键词
芡实皮渣
多糖
分离提取
抗氧化活性
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职称材料
题名
枯草杆菌漆酶重要功能位点的保守性与可变性分析
被引量：
2
1
作者
焦晶
杨雪
金兰娜
高键
周洋
肖亚中
张应玖
机构
吉林
大学
分子酶学工程教育部重点实验室
安徽大学现代生物制造协同创新中心
吉林
大学
生命科学学院
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期1320-1327,共8页
基金
吉林省科技厅计划项目(批准号:20140101020JC)
安徽大学现代生物制造协同创新中心开放课题(批准号:BM2014001)资助~~
文摘
在对比分析天然枯草杆菌漆酶(CAR)的一级结构与三维空间结构的基础上,锁定了CAR的底物结合通道和铜离子结合位点,设计并构建了CAR的4种突变体.对比分析了野生型酶与4种突变体酶的性质及催化功能,结果表明,该漆酶分子中位于第二保守区的H155位点是漆酶催化所必需的,H155即使被其同义氨基酸(如Arg)替换,也会因氧化还原电势的降低而降低漆酶的催化活力,同时还会导致漆酶的热稳定性和酸碱稳定性降低,以及最适p H值酸移;位于非保守区的A158位点与I224位点的保守性对漆酶的催化是有利的,而S210G突变增强了漆酶的稳定性与催化功能,这可能与S210G突变增强了漆酶的底物通道上一段富含Pro片段的柔性有关.此外,A158/R155H突变(CAHE)可能导致漆酶不耐冷,在低温(<50℃)时引起酶活明显降低.所研究的漆酶在2,2'-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)介体存在下,对靛蓝类染料(如靛蓝胭脂红)和三苯甲烷类染料(如结晶紫)的脱色率均高于对偶氮类染料(如甲基红和刚果红)和蒽醌类染料(如活性亮蓝),说明该漆酶对染料有一定的选择性.
关键词
漆酶
结构
催化
枯草芽孢杆菌
Keywords
Laccase
Structure
Catalysis
Baculus subtilis
分类号
O625.75 [理学—有机化学]
Q554 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
芡实皮渣多糖的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究
被引量：
12
2
作者
刘洋
张汆
何小宁
陈志宏
何晓伟
赵维萍
朱国美
查明方
机构
滁州学院
生物
与食品工程学院
安徽大学
滁州市农业农村技术推广
中心
出处
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2020年第22期142-149,共8页
基金
农业部公益性行业(农业)科研专项“江淮分水岭优势特色作物生产关键技术研究与示范”(201403039)
农业部华东作物基因资源与种质创制重点实验室开放基金(ECG2018001)
+3 种基金
安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2018A0426,KJ2019A0639)
滁州市科技计划项目(2018ZN002,2020ZN013)
安徽大学现代生物制造协同创新中心实验室开放课题项目(BM2017003)
滁州学院科研启动基金(2018qd14)。
文摘
为了实现芡实加工副产物资源的高值化利用,优化芡实皮渣多糖的提取工艺参数,分析其理化性质,初步研究多糖的体外抗氧化活性。在单因素实验基础上,选择料液比、提取温度、提取时间、醇沉浓度为自变量,多糖得率为因变量,通过L9(34)正交试验法优化芡实皮渣多糖的提取工艺。利用5种体外抗氧化活性测试方法,即总还原力,清除羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子和亚硝酸盐,并与抗坏血酸进行对比,评价芡实皮渣多糖的抗氧化能力。结果表明:芡实皮渣多糖最佳提取工艺为料液比1∶40、浸提温度55℃、浸提40 min、醇沉浓度80%,提取3次,得率45.94%,纯度82.67%。碘-碘化钾反应显示其属于非淀粉类多糖,HPLC分析显示该多糖的基本结构单元为葡萄糖。吸水性和吸油分别为(65.15±1.52)和(1.27±0.04)g/g,多糖凝胶质构特性结果显示其黏性很大,弹性较低,回复能力弱。多糖对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子和亚硝酸盐具有一定的清除能力,当芡实皮渣多糖浓度为1.0 mg/mL时,对羟基自由基、超氧离子和亚硝酸盐的清除率分别为35.56%、34.88%和20.63%,对DPPH自由基清除率IC50为(0.307±0.008)mg/mL;本研究优选的芡实皮渣多糖提取工艺稳定可靠,多糖具有一定的抗氧化能力,实验结果可为芡实加工副产物资源的综合开发利用提供理论基础。
关键词
芡实皮渣
多糖
分离提取
抗氧化活性
Keywords
Euryale ferox pericarp residues
polysaccharide
extraction
antioxidant activity
分类号
TS241 [轻工技术与工程—制糖工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
枯草杆菌漆酶重要功能位点的保守性与可变性分析
焦晶
杨雪
金兰娜
高键
周洋
肖亚中
张应玖
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
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职称材料
2
芡实皮渣多糖的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究
刘洋
张汆
何小宁
陈志宏
何晓伟
赵维萍
朱国美
查明方
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2020
12
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