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川芎通过多成分、多靶点、多信号通路和多生物学功能发挥抗肺癌脑转移作用 被引量:12
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作者 徐廉松 黄富豪 +4 位作者 张语涵 牛雯雯 庞金龙 李姗姗 李娴 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1319-1328,共10页
目的利用网络药理学方法和分子对接技术研究川芎治疗肺癌脑转移的潜在分子机制。方法通过中药系统药理学分析平台TCMSP数据库获取川芎的化学成分和作用靶点;通过GeneCards数据库筛选肺癌脑转移的相关靶点;借助ClusterprofilerR包进行GO... 目的利用网络药理学方法和分子对接技术研究川芎治疗肺癌脑转移的潜在分子机制。方法通过中药系统药理学分析平台TCMSP数据库获取川芎的化学成分和作用靶点;通过GeneCards数据库筛选肺癌脑转移的相关靶点;借助ClusterprofilerR包进行GO和KEGG富集分析;利用Cytoscape及STRING数据库构建川芎“活性成分-靶点-疾病”网络、蛋白相互作用网络,根据拓扑学参数筛选川芎治疗肺癌脑转移的核心成分及作用靶点,并将两者进行分子对接;最后,通过川芎处理人肺癌细胞PC9,运用Western blot法检测相关蛋白表达对核心靶点进行初步验证。结果本研究共筛选出(Z)-藁本内酯、丁苯酞、油酸、杨梅酮等48个有效成分;INS、BDNF、FOS、VEGFA、PTGS2、ESR1、MAPK14、PTGS1等49个靶点蛋白;核受体活性、配体激活、转录因子活性等57个生物学功能;Prolactin signaling pathway、Breastcancer、Etrogen signaling pathway等40条信号通路。分子对接结果显示,杨梅酮、丁苯酞、4-羟基-3丁基苯酞、(Z)藁本内酯、洋川芎内酯-E等成分与BDNF、FOS、PTGS2、MAPK14等7个核心靶点有较强亲和能力。Western blot结果显示,0.1 mol/L和1 mol/L川芎处理肺癌细胞PC9后PI3K的磷酸化水平分别为(86.51±13.09)%、(71.58±5.56)%,AKT的磷酸化水平分别为(87.49±13.09)%、(71.47±13.02)%,VEGF的水平分别为(84.39±8.95)%、(80.65±10.07)%,且差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论川芎通过多成分、多靶点、多信号通路和多生物学功能发挥抗肺癌脑转移的作用。 展开更多
关键词 川芎 网络药理学 分子对接 肺癌脑转移
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川芎增强替莫唑胺对小鼠脑转移黑色素瘤脑的抑制作用
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作者 赵倩 张振 +7 位作者 周星琦 荣翔宇 刘雪柔 赵新丽 王豪杰 庞金龙 李姗姗 李娴 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1088-1097,共10页
目的 探讨引经药川芎对黑色素瘤B16F10脑转移的影响。方法 超声下左心室内注射黑色素瘤B16F10建立C57BL/6J鼠脑转移瘤动物模型,通过小动物活体成像系统监测颅内荧光信号大小,当荧光信号强于5×106光子/s时,将小鼠按照体质量随机分为... 目的 探讨引经药川芎对黑色素瘤B16F10脑转移的影响。方法 超声下左心室内注射黑色素瘤B16F10建立C57BL/6J鼠脑转移瘤动物模型,通过小动物活体成像系统监测颅内荧光信号大小,当荧光信号强于5×106光子/s时,将小鼠按照体质量随机分为2组。对照组:每日灌胃生理盐水;川芎组:每日灌胃给药,川芎饮片水提物以生理盐水溶解,浓度为1 mg/g。与对照组(生理盐水组)相比,考察川芎(1 mg/g)对黑色素瘤B16F10脑转移的影响。通过动物行为学立柱和粘签实验观察川芎对荷瘤小鼠的神经保护作用,以免疫荧光法观察川芎对血脑屏障完整性相关蛋白(ZO-1、Claudin-5、Occludin、P-gp、 TNF-α、AQP4和PDGFRβ)、对神经元细胞增殖和凋亡的作用以及对小胶质细胞凋亡和活化的作用。通过小动物活体成像监测小鼠脑部荧光信号强度,考察川芎联合化疗药替莫唑胺对B16F10脑转移瘤的疗效。结果 与对照组比较,川芎组小鼠脑转移瘤无明显进展,体质量下降减慢,血脑屏障相关指标ZO-1、Claudin-5、Occludin、P-gp、TNF-α、AQP4和PDGFRβ受体蛋白水平下降(P<0.05)。动物行为学实验表明,川芎组小鼠木棍停留时间更长(P<0.05),取下粘签时间更短(P<0.05),免疫荧光结果显示脑部神经元细胞增殖增多(P<0.05),凋亡减少(P<0.05),小胶质细胞凋亡减少(P<0.05)。与对照组相比,川芎组小鼠脑转移瘤微环境中CD86、CD206、IL-4、IL-10水平升高(P<0.05),CD163、IL-1β水平降低(P<0.05)。川芎(1 mg/g)联合替莫唑胺(25 mg/kg)组脑部荧光信号显著低于替莫唑胺单药组。结论 川芎作为引经药在开放血脑屏障的同时并未促进黑色素瘤脑转移,且与替莫唑胺联用能增强替莫唑胺对脑转移黑色素瘤B16F10的治疗效果。 展开更多
关键词 川芎 替莫唑胺 黑色素瘤 血脑屏障 脑转移
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酒川芎增强阿美替尼对EGFR突变型非小细胞肺癌脑移植瘤的抑制作用 被引量:5
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作者 牛雯雯 荣翔宇 +4 位作者 赵倩 刘雪柔 徐廉松 李姗姗 李娴 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期375-382,共8页
目的探讨酒川芎(WCR)增强阿美替尼抑制EGFR突变型非小细胞肺癌脑移植瘤的作用。方法建立人脑内皮细胞(hCMEC/D3)和PC9非小细胞肺癌细胞共培养体系,采用流式细胞术考察酒川芎水提液(2 mg/mL)联合阿美替尼(10、20μmol/L)对PC9细胞凋亡的... 目的探讨酒川芎(WCR)增强阿美替尼抑制EGFR突变型非小细胞肺癌脑移植瘤的作用。方法建立人脑内皮细胞(hCMEC/D3)和PC9非小细胞肺癌细胞共培养体系,采用流式细胞术考察酒川芎水提液(2 mg/mL)联合阿美替尼(10、20μmol/L)对PC9细胞凋亡的影响;通过ABCB1-MDCK单层细胞模型评估酒川芎水提液(0.5、1、2 mg/mL)对阿美替尼(8μmol/L)跨膜转运的影响。以Western blot法检测血脑屏障完整性相关的紧密连接蛋白表达;建立裸鼠非小细胞肺癌脑移植瘤模型,考察酒川芎(1 mg/g)联合阿美替尼(10 mg/kg)抑制EGFR突变型非小细胞肺癌脑移植瘤的作用。结果与单用阿美替尼组(20μmol/L)对比,酒川芎(2 mg/mL)联合阿美替尼(20μmol/L)组给药可致细胞凋亡百分率增加21%(P<0.01)。酒川芎(0.5、1、2 mg/mL)联合阿美替尼的双侧转运Papp(A→B)较单用阿美替尼均显著增加(P<0.05)。与酒川芎联合后,紧密连接蛋白zonula occludens(ZO)-1,claudin-5和外排蛋白P-glycoprotein的蛋白表达明显减少(P<0.05)。在PC9-Luc脑移植瘤裸鼠模型中,酒川芎联合阿美替尼可明显提升单用阿美替尼的抑瘤效果,缓解脑移植瘤裸鼠体质量的下降,并延长脑移植瘤裸鼠的生存时间(P<0.05);病理组织学染色结果显示,酒川芎联合阿美替尼可明显增加脑移植瘤裸鼠脑组织中肿瘤细胞的凋亡百分率(P<0.05),并改善瘤周脑组织神经损伤。免疫组化染色结果显示,酒川芎能明显下调脑组织中紧密连接蛋白ZO-1和claudin-5的蛋白表达。结论酒川芎能增加阿美替尼抑制EGFR突变型非小细胞肺癌脑移植瘤的作用,其机制可能与下调ZO-1,claudin-5和P-glycoprotein蛋白表达,从而促进阿美替尼透过血脑屏障有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 酒川芎 阿美替尼 血脑屏障
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碱制法炮制可显著增强斑蝥的抗肿瘤作用 被引量:4
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作者 李娴 李姗姗 +3 位作者 庞金龙 黄富豪 郭滨 刘浩 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1332-1339,共8页
目的研究碱制法炮制前后斑蝥对人肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法提取生品斑蝥中的斑蝥素和碱制斑蝥中的斑蝥酸钠。以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,生斑蝥与碱制斑蝥处理细胞后,采用CCK-8法检测药物对细胞增殖活... 目的研究碱制法炮制前后斑蝥对人肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法提取生品斑蝥中的斑蝥素和碱制斑蝥中的斑蝥酸钠。以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,生斑蝥与碱制斑蝥处理细胞后,采用CCK-8法检测药物对细胞增殖活性的影响,划痕实验观察细胞迁移作用,Transwell实验观察细胞侵袭作用,WB观察药物对A549细胞MMP1、MMP2蛋白表达的影响,ELISA法检测细胞炎症因子IFN-γ、IL-1β和TNF-α水平,AnnexinV/PI染色观察细胞凋亡情况。结果生斑蝥与碱制斑蝥均可使A549细胞活力明显降低;生斑蝥与碱制斑蝥均能抑制A549细胞迁移,且生斑蝥高浓度组划痕愈合程度最低,与生斑蝥高浓度组相比,差异具有显著性(P<0.01);碱制斑蝥较生斑蝥抑制A549细胞侵袭作用更明显,差异具有显著性(P<0.01);且生斑蝥与碱制斑蝥均可抑制MMP1和MMP2蛋白的表达,显著上调炎症因子IFN-γ水平,但对IL-1β、TNF-α含量则没有显著影响,Annexin V/PI双染荧光拍照发现生斑蝥组与碱制斑蝥组红绿荧光强度均增加,且碱制斑蝥组荧光增加更明显。结论碱制法炮制后斑蝥的抗癌作用显著提高,具有抑制A549细胞增殖,侵袭和迁移的作用,其机制可能与下调MMP1和MMP2的表达,促进凋亡及上调炎症因子IFN-γ水平有关。 展开更多
关键词 碱制斑蝥 凋亡 炎症因子 迁移 侵袭
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