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ITF2的表达水平与胃癌转移相关 被引量:1
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作者 徐佳慧 胡世莲 +3 位作者 沈国栋 翁海燕 徐婷娟 沈干 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第2期284-288,共5页
目的探讨免疫球蛋白转录因子2(ITF2)在胃癌中的表达水平和临床意义。方法收集42例胃腺癌和20例良性胃黏膜组织蜡块,应用免疫组化SP法检测临床标本中ITF2的蛋白表达水平,并分析其表达量与患者临床病理各参数之间的关系。另以胃腺癌细胞HS... 目的探讨免疫球蛋白转录因子2(ITF2)在胃癌中的表达水平和临床意义。方法收集42例胃腺癌和20例良性胃黏膜组织蜡块,应用免疫组化SP法检测临床标本中ITF2的蛋白表达水平,并分析其表达量与患者临床病理各参数之间的关系。另以胃腺癌细胞HSC44-PE与44As3以及人胃黏膜上皮细胞系GES-1为研究对象,使用Western blot法检测细胞中ITF2表达水平,划痕实验方法检测HSC44-PE与44As3细胞的转移能力。结果恶性组织中ITF2蛋白表达强度明显高于良性组织,两者间差异有统计学意义(Z=-2.401,P<0.05);伴随有淋巴结转移的胃癌组织中ITF2表达量明显高于无转移病例,且随着肿瘤浸润深度、TMN分期的升高而升高(P<0.05);但与年龄、性别和肿瘤分化程度差异均无统计学意义;ITF2表达量高的胃癌细胞44As3转移潜能明显高于转移潜能较低的胃癌细胞HSC44-PE和正常胃上皮细胞GES-1(P<0.05)。结论ITF2在胃癌组织中呈高表达,尤其与肿瘤转移潜能相关,提示该蛋白可能参与胃癌的发生和发展,并可能成为胃癌进展的监测指标。 展开更多
关键词 胃癌 ITF2 表达 转移
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Wnt3a和TCF4在人卵巢癌中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 戴朦 沈国栋 +4 位作者 程民 徐婷娟 翁海燕 胡世莲 沈干 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第12期1794-1798,1803,共6页
目的探讨Wnt信号通路中关键蛋白Wnt3a和TCF4在卵巢癌中的表达水平以及临床意义。方法 ELISA法检测10例卵巢癌患者手术前后和10例健康对照者血浆Wnt3a浓度,Western blot、qRT-PCR法检测卵巢癌患者与卵巢良性病变者的卵巢组织Wnt3a、TCF4... 目的探讨Wnt信号通路中关键蛋白Wnt3a和TCF4在卵巢癌中的表达水平以及临床意义。方法 ELISA法检测10例卵巢癌患者手术前后和10例健康对照者血浆Wnt3a浓度,Western blot、qRT-PCR法检测卵巢癌患者与卵巢良性病变者的卵巢组织Wnt3a、TCF4水平。采用Western blot法检测卵巢癌细胞株SKOV3与HO8910中TCF4的表达,采用dn TCF4质粒转染技术获得TCF4表达下降的SKOV3/dn TCF4细胞,使用细胞划痕实验比较卵巢癌细胞转移能力。结果卵巢癌患者血浆Wnt3a水平高于健康对照者(P<0.05),且术后血浆Wnt3a水平低于术前(P<0.05);卵巢癌组织中Wnt3a、TCF4水平高于卵巢良性病变者(P<0.05);SKOV3的TCF4表达量高于HO8910且转移潜能也明显高于后者(P<0.05);将SKOV3的TCF4敲低,其转移能力明显减弱(P<0.05)。结论 Wnt信号通路参与卵巢癌的发生发展,Wnt3a和TCF4有可能成为监测卵巢癌进展的临床指标之一。 展开更多
关键词 卵巢癌 WNT3A TCF4 转移
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高灵敏血清HER2蛋白检测方法的建立及临床应用 被引量:1
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作者 龚欢秀 沈奥林 +7 位作者 夏东 蔡莉 程联胜 刘兢 程民 徐婷娟 胡世莲 沈国栋 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第11期1731-1735,共5页
本研究采用双抗体夹心ELISA法,以前期研制的抗人表皮生长因子受体2(HER2)单克隆抗体Hu A21与生物素标记Her A分别为包被抗体与检测抗体,培养CHO细胞进行转染HER2胞外区(HER2-ECD)基因的表达载体,选择抗性克隆进行培养,并分离、纯化抗原... 本研究采用双抗体夹心ELISA法,以前期研制的抗人表皮生长因子受体2(HER2)单克隆抗体Hu A21与生物素标记Her A分别为包被抗体与检测抗体,培养CHO细胞进行转染HER2胞外区(HER2-ECD)基因的表达载体,选择抗性克隆进行培养,并分离、纯化抗原作为标准抗原,建立可定量检测人血清中HER2含量的技术,为肿瘤患者的治疗及预后评估提供参考。建立的ELISA法检测灵敏度为7.8 pg/ml,检测范围为0~500 pg/ml,其批内变异系数为0.2%~10.9%,批间变异系数为1.4%~12.4%,在人血清中的抗原回收率为86.84%~116.40%。使用本方法检测临床标本,结果显示HER2阳性的转移性乳腺癌患者血清HER2含量明显高于早期乳腺癌患者及健康人的平均水平(P<0.05)。因此本研究成功建立了双抗体夹心ELISA法检测人血清HER2技术,其检测结果特异、稳定、可靠,可定量检测肿瘤患者血清HER2水平。 展开更多
关键词 肿瘤 ELISA实验 人表皮生长因子受体2 乳腺癌
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5-氮杂-2-脱氧胞苷和曲古抑菌素A对胃癌MGMT基因表达及NF-κB活性的影响 被引量:1
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作者 孟兰 程民 +6 位作者 沈国栋 徐婷娟 刘林青 唐杨琛 韩晓青 沈干 胡世莲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期1370-1375,共6页
目的探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对不同分化程度的人胃癌MKN-45和MGC-803细胞系增殖、凋亡,抑癌基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-Methylguanine-DNA Methyltrans... 目的探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对不同分化程度的人胃癌MKN-45和MGC-803细胞系增殖、凋亡,抑癌基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-Methylguanine-DNA Methyltransferase,MGMT)甲基化水平及其核转录因子NF-κB磷酸化程度影响。方法利用CCK-8、流式细胞术、MSP、RT-PCR、Western blot等方法检测5-Aza-dC(10μmol/L)、TSA(1μmol/L)单独或联合刺激后,MKN-45和MGC-803细胞增殖、凋亡,MGMT甲基化、mRNA、蛋白表达水平及NF-κB p65蛋白的磷酸化程度。结果①5-Aza-dC、TSA单独或联合使用均可抑制MKN-45和MGC-803细胞的生长,与单药组相比,联合用药组抑制作用更明显(P<0.05);②5-Aza-dC及TSA均可促进MKN-45和MGC-803细胞的凋亡,联合用药组凋亡率[(8.43±1.80)%和(21.75±3.06)%]均明显高于5-Aza-dc组[(7.33±1.18)%、(15.22±1.03)%]和TSA组[(3.53±1.18)%、(12.66±1.10)%](P<0.05);③5-AzadC、TSA单独或联合刺激均可逆转MGMT基因甲基化,使其mRNA及蛋白表达水平上调,联合用药作用更加明显(P<0.05);④NF-κB活性高表达的MKN-45和MGC-803经5-Aza-dC和TSA处理后细胞的NF-κB活性降低,且联合用药组[(12.81±4.18)%和(9.08±2.66)%]抑制程度较5-Aza-dc组[(39.13±3.38)%、(34.90±4.89)%]和TSA组[(27.55±5.00)%、(22.11±3.07)%]更加明显(P<0.05)。结论 5-Aza-dC与TSA均可抑制胃癌细胞生长和促进细胞凋亡,逆转MGMT基因甲基化反应,提高基因表达和抑制NF-κB的活性,二药联合作用提示效果更加明显。 展开更多
关键词 胃癌 5-氮杂-2-脱氧胞苷 曲古抑菌素A MGMT基因 核转录因子-ΚB
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活体供肾移植后外周血Treg、Th17及Th17/Treg比值的变化研究
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作者 欧欣 张茜 +4 位作者 刘洪涛 徐飞 程民 陈军 徐晓玲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第11期1698-1703,共6页
目的检测活体肾移植受者外周血调节性T细胞(Treg)和辅助性T淋巴细胞17(Th17)的比例,探寻肾移植术后外周血Treg细胞、Th17细胞及Th17/Treg比值的动态变化规律。方法采用前瞻性研究方法,用流式细胞术分别检测活体肾移植受者术前和术后1、2... 目的检测活体肾移植受者外周血调节性T细胞(Treg)和辅助性T淋巴细胞17(Th17)的比例,探寻肾移植术后外周血Treg细胞、Th17细胞及Th17/Treg比值的动态变化规律。方法采用前瞻性研究方法,用流式细胞术分别检测活体肾移植受者术前和术后1、2、3周及术后1、2、3、4、5、6个月的外周血Treg细胞、Th17细胞比例。结果 Treg细胞比例在术后第2周明显下降(P<0.05),术后2个月降至最低,较术前相比下降68.6%(P<0.05),术后6个月恢复至术前水平。Th17细胞比例在术后1周至3周明显升高(P<0.05),术后1个月恢复至术前水平。移植后第1周Th17/Treg细胞比值明显升高(P<0.05),持续至术后3个月,术后6个月恢复至术前水平。术后使用环孢素的受者Treg细胞比例在术后2个月最低,下降67.1%(P<0.05);术后使用他克莫司的受者Treg细胞比例在术后3周最低,下降80.8%(P<0.05),均在术后3个月开始缓慢上升。CD3+T细胞比例在术后1周降低(P<0.05),术后3周恢复至术前水平。结论活体肾移植术后免疫细胞处于动态变化。术后2周到5个月Treg细胞比例均明显降低,其中以术后2个月最低。Th17/Treg细胞比值在术后1周到3个月均明显升高。他克莫司和环孢素对肾移植术后Treg细胞都有抑制作用。 展开更多
关键词 肾移植 调节性T细胞 TH17细胞
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