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c-myc基因扩增与HPV感染在宫颈病变中的关系 被引量:3
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作者 丁玉兰 赵卫东 +5 位作者 冯定庆 朱园园 金夏 宣恒华 周虎 桂云 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第9期1139-1141,共3页
分别以HC-Ⅱ法及荧光原位杂交(FISH)法检测109例不同级别宫颈病变患者宫颈脱落细胞中高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及c-myc基因扩增情况,结果显示宫颈脱落细胞中c-myc基因的扩增率、高危型HPV的感染率与宫颈病变程度密切相关,高危型... 分别以HC-Ⅱ法及荧光原位杂交(FISH)法检测109例不同级别宫颈病变患者宫颈脱落细胞中高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及c-myc基因扩增情况,结果显示宫颈脱落细胞中c-myc基因的扩增率、高危型HPV的感染率与宫颈病变程度密切相关,高危型HPV感染和c-myc基因扩增在宫颈癌的发生发展中可能起着协同作用。 展开更多
关键词 高危型HPV c—myc基因 荧光原位杂交 宫颈癌 宫颈上皮内瘤变
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GRIM-19原核表达载体的构建及GST-GRIM-19的诱导表达与纯化 被引量:4
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作者 朱靖 周颖 +4 位作者 王青元 冯定庆 朱园园 李彩荣 凌斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第5期493-496,共4页
目的构建GRIM-19原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白。方法用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的GRIM-19基因片段,将其克隆至pGEX-4T-3原核表达载体上,在大肠杆菌中诱导表达GST-GRIM-19融... 目的构建GRIM-19原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白。方法用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的GRIM-19基因片段,将其克隆至pGEX-4T-3原核表达载体上,在大肠杆菌中诱导表达GST-GRIM-19融合蛋白,用Glu-tathione Sepharose 4B纯化,纯化后蛋白经Western blot鉴定。结果构建pGEX-4T-3-GRIM-19原核表达载体成功,表达的GST-GRIM-19融合蛋白相对分子质量约45 ku,浓度0.1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导2 h,并成功纯化到融合蛋白。结论成功构建GRIM-19原核表达载体,诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白。 展开更多
关键词 遗传载体 原核细胞 重组融合蛋白质类
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酸性磷酸酶在宫颈癌发生过程中的表达及意义 被引量:1
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作者 桂云 赵卫东 +1 位作者 冯定庆 周虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第3期311-314,共4页
目的研究酸性磷酸酶(ACP)在宫颈癌发生过程中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR、Western blot和免疫组化法分别检测30例正常宫颈,22例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ~Ⅱ级,22例CINⅢ级以及30例宫颈鳞状细胞癌患者组织中ACP的表达情况。结果 ... 目的研究酸性磷酸酶(ACP)在宫颈癌发生过程中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR、Western blot和免疫组化法分别检测30例正常宫颈,22例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ~Ⅱ级,22例CINⅢ级以及30例宫颈鳞状细胞癌患者组织中ACP的表达情况。结果 RT-PCR结果显示病变宫颈组织较正常宫颈组织相比,ACPmRNA水平的表达呈增高趋势;Western blot和免疫组化结果显示ACP在宫颈癌发生过程中的各级别病变中呈明显增高趋势且差异有统计学意义,同时提示ACP主要定位于细胞浆。结论 ACP在宫颈癌发展过程中表达量明显升高,可作为宫颈癌及癌前病变的一项辅助诊断指标。 展开更多
关键词 宫颈 鳞状细胞癌 癌前病变 碱性磷酸酶
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Cripto-1在子宫颈癌中的表达及临床意义 被引量:4
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作者 徐嵘嵘 冯定庆 +4 位作者 雷蕾 曹振平 刘巧 周颖 凌斌 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期811-814,共4页
目的检测Cripto-1在正常子宫颈(normal cervical epithelium,NCE)、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neopla-sia,CIN)、子宫颈浸润癌(invasive carcinoma of cervix,ICC)中的表达情况及其与疾病进展的关系。方法采用Western ... 目的检测Cripto-1在正常子宫颈(normal cervical epithelium,NCE)、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neopla-sia,CIN)、子宫颈浸润癌(invasive carcinoma of cervix,ICC)中的表达情况及其与疾病进展的关系。方法采用Western Blot、RT-PCR和免疫组化SP法检测26例ICC、52例CIN和20例NCE中Cripto-1的表达差异,结合临床病理参数进行分析。用免疫组化法检测子宫颈癌Caski细胞诱导分化前后Cripto-1的表达差异。结果 Western Blot检测显示Cripto-1蛋白在ICC中平均表达水平(0.92±0.68)明显高于CIN(0.31±0.23)和NCE(0.09±0.06)(P<0.05),而其在CIN中表达也较NCE高(P<0.05)。RT-PCR分析显示ICC中Cripto-1 mRNA平均表达水平(0.62±0.36)高于CIN(0.24±0.14)和NCE(0.10±0.09)(P<0.05),且CIN中Cripto-1 mRNA表达较NCE高(P<0.05)。免疫组化结果显示ICC中Cripto-1蛋白阳性表达率为57.7%(15/26),较CIN(26.9%)和NCE(5%)明显增高(P<0.05),CIN中Cripto-1蛋白阳性表达率较NCE中升高(P<0.05);Crip-to-1在子宫颈癌中的表达与患者年龄、组织学类型、病理分级、临床分期无关(P>0.05),与有无淋巴结转移有关(P<0.05)。诱导分化治疗后Caski细胞中Cripto-1蛋白表达较对照组明显降低。结论 Cripto-1可能在子宫颈癌的发生、发展中起着重要的作用,充当癌基因的角色;检测Cripto-1的表达可作为子宫颈癌及其癌前病变诊断的一项辅助指标,可成为一个肿瘤治疗的靶向。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 子宫颈上皮内瘤变 Cripto-1
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子宫颈癌组织中GRIM-19的表达及其意义 被引量:2
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作者 朱靖 卫莹 +4 位作者 周颖 王青元 许乾乾 肖卫华 凌斌 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期681-683,共3页
目的研究GRIM-19在子宫颈癌组织中的表达情况及意义。方法采用RT-PCR、免疫组化和Western blot方法分别检测40例子宫颈癌患者和30例正常人的宫颈癌组织中GRIM-19的表达情况。结果 RT-PCR结果显示子宫颈癌组织中GRIM-19的表达明显低于正... 目的研究GRIM-19在子宫颈癌组织中的表达情况及意义。方法采用RT-PCR、免疫组化和Western blot方法分别检测40例子宫颈癌患者和30例正常人的宫颈癌组织中GRIM-19的表达情况。结果 RT-PCR结果显示子宫颈癌组织中GRIM-19的表达明显低于正常宫颈组织,Western blot结果显示GRIM-19蛋白水平在子宫颈癌和正常宫颈组织中的表达阳性率分别为12.5%和100%,子宫颈癌组织与正常宫颈组织比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 GRIM-19在正常宫颈组织中高表达,在子宫颈癌组织中的表达降低,其表达降低可能与肿瘤的发生发展有着密切的关系。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 GRIM-19基因 免疫组织化学
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宫颈癌中N-cadherin、E-cadherin和p63的表达及相关性 被引量:11
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作者 江文静 胡卫平 +1 位作者 周颖 田园 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1215-1219,1223,共6页
目的探讨N-cadherin、E-cadherin和p63在宫颈鳞状细胞癌中的表达及三者与临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SP法检测131例宫颈癌及30例正常宫颈组织中N-cadherin、E-cadherin和p63的表达。结果 131例宫颈鳞状细胞癌组织中N-cadherin... 目的探讨N-cadherin、E-cadherin和p63在宫颈鳞状细胞癌中的表达及三者与临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SP法检测131例宫颈癌及30例正常宫颈组织中N-cadherin、E-cadherin和p63的表达。结果 131例宫颈鳞状细胞癌组织中N-cadherin、E-cadherin和p63的阳性率均与宫颈癌的组织分化、临床分期、有无淋巴结转移以及术后复发有关(P<0.05),而均与年龄无关(P>0.05)。30例正常宫颈上皮组织细胞不表达N-cadherin,而E-cadherin和p63则呈强阳性表达;N-cadherin强阳性表达患者生存期明显低于阴性表达者,E-cadherin、p63阴性表达患者生存期明显低于强阳性表达者。结论 N-cadherin高表达和E-cadherin、p63的低表达与宫颈癌的发生、发展和转移相关,检测N-cadherin、E-cadherin和p63的表达可能是预测宫颈癌恶性程度及预后的重要指标之一。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 N-CADHERIN E-CADHERIN P63 免疫组织化学
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卵巢黏液性肿瘤和卵巢透明细胞癌中PAX8、Tubulin和Calretinin的表达 被引量:5
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作者 孙多祥 徐兵 +3 位作者 田园 康永军 周颖 胡卫平 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期637-640,645,共5页
目的检测输卵管上皮分泌细胞中PAX8、输卵管纤毛细胞中微管蛋白(Tubulin)和间皮组织中Calretinin的表达,探讨卵巢黏液性肿瘤和透明细胞癌的组织来源。方法采用免疫组化SP法检测PAX8、Tubulin和Calretinin在正常输卵管上皮、正常卵巢上... 目的检测输卵管上皮分泌细胞中PAX8、输卵管纤毛细胞中微管蛋白(Tubulin)和间皮组织中Calretinin的表达,探讨卵巢黏液性肿瘤和透明细胞癌的组织来源。方法采用免疫组化SP法检测PAX8、Tubulin和Calretinin在正常输卵管上皮、正常卵巢上皮、卵巢黏液性囊腺瘤、卵巢交界性黏液性囊腺瘤、卵巢黏液性癌和卵巢透明细胞癌中的表达。结果在正常输卵管上皮、正常卵巢上皮、卵巢黏液性囊腺瘤、卵巢交界性黏液性囊腺瘤、卵巢黏液性癌和卵巢透明细胞癌中PAX8表达的阳性细胞百分比分别为:(76.29±2.17)%、0、(7.38±3.25)%、(8.57±3.19)%、(85.00±13.78)%、(86.44±10.82)%;Tubulin的阳性细胞百分比分别为:(18.07±0.75)%、(3.57±3.56)%、(3.13±2.12)%、(7.14±4.13)%、(87.75±3.50)%、(77.22±14.60)%;Calretinin的阳性细胞百分比分别为:0、(8.36±0.75)%、0、0、0、0。结论卵巢黏液性囊腺瘤和卵巢交界性黏液性肿瘤细胞来源尚不明确,卵巢黏液性癌可能部分来源于输卵管,而卵巢透明细胞癌则可能主要来源于输卵管上皮。 展开更多
关键词 黏液性肿瘤 透明细胞癌 PAX8 TUBULIN CALRETININ
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HPV18E6原核表达载体的构建及3×flag-HPV18E6融合蛋白的诱导表达 被引量:3
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作者 王青元 朱靖 +1 位作者 周颖 凌斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第2期112-115,共4页
目的构建pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。方法用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出带HindⅢ、SalⅠ酶切位点的HPV18E6基因片段,将HPV18E6基因片段克隆到p3×flag-myc-CMV-24载体上。然后设计... 目的构建pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。方法用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出带HindⅢ、SalⅠ酶切位点的HPV18E6基因片段,将HPV18E6基因片段克隆到p3×flag-myc-CMV-24载体上。然后设计特异性引物扩增3×flag-HPV18E6重组基因片段,将该片段连接到pET-22b原核表达载体上,在大肠杆菌中诱导表达3×flag-HPV18E6融合蛋白,经Western blot鉴定。结果 pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体构建正确,IPTG诱导以浓度0.1 mmol/L,时间2 h为宜,表达的3×flag-HPV18E6融合蛋白相对分子质量约20 ku。结论成功构建pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体并诱导3×flag-HPV18E6融合蛋白表达。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒18 原核细胞 遗传载体 基因表达
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