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siRNA抑制SKOV-3细胞Her2/neu表达及细胞增殖的动物实验研究 被引量:1
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作者 程志祥 周颖 +4 位作者 朱园园 肖敏 高宗侠 祝怀平 凌斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期80-81,86,共3页
目的:通过卵巢癌细胞株SKOV-3细胞增殖及动物荷瘤实验探讨siRNA沉默Her2/neu基因的表达效果。方法:靶向Her2/neu的siRNA经脂质体L ipofectAM INE2000介导转染到SKOV-3中,通过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2/neu基因表达的SKOV-3/siRNA细... 目的:通过卵巢癌细胞株SKOV-3细胞增殖及动物荷瘤实验探讨siRNA沉默Her2/neu基因的表达效果。方法:靶向Her2/neu的siRNA经脂质体L ipofectAM INE2000介导转染到SKOV-3中,通过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2/neu基因表达的SKOV-3/siRNA细胞株,通过RT-PCR和免疫组化方法检测Her2/neu基因抑制效果,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测各组细胞增殖水平并将SKOV-3/siRNA细胞接种到裸鼠皮下检测荷瘤情况。结果:建立了稳定抑制Her2/neu基因表达的细胞株SKOV-3/siRNA,RT-PCR和免疫组化结果显示Her2/neu基因表达受到较强抑制,MTT检测结果显示SKOV-3/siRNA组细胞增殖较SKOV-3明显下调(P<0.05),其接种在裸鼠皮下形成的肿瘤生长速度明显减慢(P<0.05)。结论:靶向Her2/neu基因的siRNA可以抑制卵巢癌细胞株SKOV-3在体外和体内增殖,有望成为卵巢肿瘤治疗的新途径。 展开更多
关键词 HER2/NEU基因 RNA干扰 卵巢肿瘤
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700例女性HPV感染分型特点及相关因素分析 被引量:19
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作者 金夏 赵卫东 +5 位作者 朱园园 程敏 李青 王晓丽 徐汉杰 李晓妍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第10期1226-1229,共4页
目的探讨700例女性子宫颈感染人乳头瘤病毒(HPV)的基因分布、感染状况及其危险因素。方法对700例患者行HPV分型检测,并同时行液基细胞学检测(LCT)及填写HPV感染流行病学调查问卷。结果①HPV总感染率为12.43%,最常见的高危感染亚型为HPV3... 目的探讨700例女性子宫颈感染人乳头瘤病毒(HPV)的基因分布、感染状况及其危险因素。方法对700例患者行HPV分型检测,并同时行液基细胞学检测(LCT)及填写HPV感染流行病学调查问卷。结果①HPV总感染率为12.43%,最常见的高危感染亚型为HPV39、16、58。②31~35岁、41~45岁两个年龄段感染率均高达21.5%。③HPV-H感染的影响因素多因素分析显示:宫颈细胞学分级、产次、避孕套的使用与HPV感染相关。结论 700例女性中HPV感染常见的亚型依次为HPV39、16、58型,其亚型分布在不同年龄段女性、宫颈细胞学异常患者中分布也不尽相同,产次和避孕套的使用为影响HPV感染的相关因素。 展开更多
关键词 乳头瘤病毒感染 子宫颈 危险因素
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沉默 Piwil2表达对子宫颈癌细胞增殖和衰老的影响 被引量:7
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作者 张红丽 冯定庆 +4 位作者 凌斌 尤青叶 李兵 伍娇娇 赵婷婷 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第5期589-593,共5页
目的采用shRNA沉默Piwil2基因的表达,探讨其对宫颈癌细胞株增殖和衰老特性的影响。方法通过脂质体Lipofectamine2000转染技术和嘌呤霉素筛选,建立稳转Sh-piwil2宫颈癌细胞株,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blo... 目的采用shRNA沉默Piwil2基因的表达,探讨其对宫颈癌细胞株增殖和衰老特性的影响。方法通过脂质体Lipofectamine2000转染技术和嘌呤霉素筛选,建立稳转Sh-piwil2宫颈癌细胞株,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法验证沉默效果。采用细胞增殖实验、集落形成实验、细胞周期和细胞衰老等实验观察沉默Piwil2表达对宫颈癌细胞生物学特性的影响。结果建立稳定转染Sh-piwil2宫颈癌细胞株,与对照组相比,沉默Piwil2表达后细胞的增殖和集落形成能力均显著降低(P<0.05);细胞G0/G1期比例增加、S期比例明显下降(P<0.05),同时沉默Piwil2后细胞衰老数量明显增多(P<0.05)。结论沉默Piwil2基因可发挥抗宫颈癌作用,推测Piwil2基因可作为宫颈癌临床治疗的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 SHRNA Piwil2 细胞增殖 细胞衰老
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靶向Her2基因SiRNA对人卵巢癌细胞株SKOV-3顺铂敏感性的影响 被引量:3
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作者 程志祥 周颖 +4 位作者 朱园园 肖敏 高宗侠 祝怀平 凌斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第4期374-378,共5页
目的通过siRNA沉默Her2基因的表达探讨其对卵巢癌细胞株SKOV-3顺铂(DDP)敏感性的影响。方法靶向Her2的siRNA通过阳离子脂质体介导转染到SKOV-3中,经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2基因表达的SK-OV-3细胞株,通过RT-PCR方法检测各组SKOV-... 目的通过siRNA沉默Her2基因的表达探讨其对卵巢癌细胞株SKOV-3顺铂(DDP)敏感性的影响。方法靶向Her2的siRNA通过阳离子脂质体介导转染到SKOV-3中,经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2基因表达的SK-OV-3细胞株,通过RT-PCR方法检测各组SKOV-3细胞Her2基因的表达。应用四甲基偶氮唑蓝检测DDP对各组SKOV-3细胞增殖水平的影响,应用膜联蛋白V异-硫氰酸荧光素细胞凋亡试剂盒在流式细胞仪上检测DDP作用后各组SKOV-3细胞凋亡水平。结果建立了稳定抑制Her2基因表达的细胞株,SKOV3/siRNA-1组和SKOV3/siRNA-2组细胞Her2基因表达分别为对照组的53.8%和38.4%,而空载体组为92.3%。在DDP作用下SKOV3/siRNA-1和SKOV3/siRNA-2的细胞存活率在4 d时分别为67.7%±4.4%和66.4%±3.3%,与未转染对照组81.7%±1.3%和空载体组81.3%±1.4%比较差异有显著性(P<0.05)。FCM分析显示SK-OV3/siRNA-1和SKOV3/siRNA-2细胞的DDP诱导凋亡率分别为38.6%±1.1%和42.8%±1.4%,明显高于未转染组9.1%±0.8%和空载体组8.8%±0.7%,差异有显著性(P<0.05)。结论靶向Her2基因的siRNA可以增强卵巢癌细胞株SKOV-3对DDP的敏感性。 展开更多
关键词 基因 ERBB-2 RNA 小分子干扰 顺铂 卵巢肿瘤
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曲古菌素A联合全反式维甲酸对宫颈癌HeLa细胞株杀伤机制的研究 被引量:1
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作者 周虎 冯定庆 +3 位作者 桂云 宣恒华 丁玉兰 赵卫东 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第8期900-904,共5页
目的探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌HeLa细胞株的杀伤作用及其作用机制。方法 TSA联合ATRA或单独处理HeLa细胞,CellTiter 96AQueous法检测细胞增殖抑制情况;7-AAD荧光染色法观察细胞凋亡改变;流式细胞术检测细胞... 目的探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌HeLa细胞株的杀伤作用及其作用机制。方法 TSA联合ATRA或单独处理HeLa细胞,CellTiter 96AQueous法检测细胞增殖抑制情况;7-AAD荧光染色法观察细胞凋亡改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测p21、p53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达变化。结果 TSA联合ATRA对HeLa细胞具有明显的生长抑制作用,诱导细胞凋亡,出现核碎裂等典型凋亡改变,细胞凋亡率明显升高,与对照组和单独用药组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,TSA联合ATRA组中p21、p53、活化性Caspase-3蛋白的表达显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论 TSA联合ATRA在体外对HeLa细胞有明显的杀伤作用,推测其机制可能是上调p21、p53、活化性Caspase-3蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 曲古菌素A 全反式维甲酸 细胞凋亡 HELA细胞
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Piwil2基因表达诱导NIH3T3细胞恶性转化 被引量:4
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作者 李跃波 冯定庆 +1 位作者 凌斌 程敏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第5期467-471,共5页
目的通过建立稳定表达外源Piwil2基因的NIH3T3细胞,初步探讨Piwil2基因对NIH3T3细胞生物学特性的调控作用。方法通过脂质体介导的方法和G418的筛选,建立稳定表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株,之后利用细胞集落形成实验、细胞增殖实验、细... 目的通过建立稳定表达外源Piwil2基因的NIH3T3细胞,初步探讨Piwil2基因对NIH3T3细胞生物学特性的调控作用。方法通过脂质体介导的方法和G418的筛选,建立稳定表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株,之后利用细胞集落形成实验、细胞增殖实验、细胞周期分析和裸鼠成瘤实验,观察Piwil2基因表达对NIH3T3细胞的生物学特性的影响。结果建立了稳定过表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株。与对照组空白载体细胞系相比,过表达Piwil2基因的NIH3T3细胞增殖和集落形成能力增强;细胞周期G0/G1期减少、S期明显升高;接种裸鼠后形成的肿瘤体积显著大于对照组。结论 Piwil2基因在NIH3T3细胞中稳定表达具有诱导正常NIH3T3细胞发生恶性转化的重要生物功能。 展开更多
关键词 Piwil2基因 基因表达 3T3细胞
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新生鼠卵巢中卵泡膜干细胞的分离培养及鉴定
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作者 刘然 冯定庆 +1 位作者 宣恒华 凌斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第5期504-507,共4页
目的分离、培养、鉴定小鼠卵巢组织中的卵泡膜干细胞。方法取2~4 d新生鼠卵巢组织,胶原酶、胰蛋白酶联合消化获得单个细胞悬液,GSM-K无血清培养基培养细胞观察细胞球形成;RT-PCR法检测膜基因Ptch1和透明带基因Zp1、Zp2、Zp3的表达,免... 目的分离、培养、鉴定小鼠卵巢组织中的卵泡膜干细胞。方法取2~4 d新生鼠卵巢组织,胶原酶、胰蛋白酶联合消化获得单个细胞悬液,GSM-K无血清培养基培养细胞观察细胞球形成;RT-PCR法检测膜基因Ptch1和透明带基因Zp1、Zp2、Zp3的表达,免疫荧光法检测干细胞标记物碱性磷酸酶(AKP)、Oct4、膜细胞标记物Gli3与颗粒细胞标记物FSHR的表达;体外诱导分化,RT-PCR法检测分化标记物Gli2,油红O染色后观察。结果 GSM-K中培养2 d形成细胞球;Ptch1、AKP、Oct4和Gli3表达阳性,不表达Zp1、Zp2、Zp3和FSHR;诱导分化后,Gli2表达,油红O染色阳性。结论新生鼠卵巢组织中存在卵泡膜干细胞,且具有分化潜能。 展开更多
关键词 卵泡膜干细胞 卵巢 培养 鉴定 分化
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