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基于转录组测序研究实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠视网膜mRNA差异表达
1
作者 刘强 廖荣丰 +1 位作者 俞华 董立红 《中华实验眼科杂志(中英文)》 北大核心 2025年第9期786-792,共7页
目的通过转录组测序筛选实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠视网膜差异表达基因。方法采用随机数字表法将20只8周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为2个组,每组10只。其中EAU组小鼠后肢内侧皮下及尾部静脉注射光感受器间维生素A类结合蛋白... 目的通过转录组测序筛选实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠视网膜差异表达基因。方法采用随机数字表法将20只8周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为2个组,每组10只。其中EAU组小鼠后肢内侧皮下及尾部静脉注射光感受器间维生素A类结合蛋白1-20和完全弗氏佐剂乳化液,腹腔注射百日咳毒素行EAU造模,对照组小鼠皮下注射相应体积磷酸盐缓冲液。造模后21 d,采用裂隙灯显微镜检查小鼠眼前节炎症情况,眼底照相观察视网膜血管并进行炎症评分;采用苏木精-伊红染色观察各组小鼠视网膜组织形态改变。收集各组小鼠视网膜组织,提取RNA并构建cDNA文库,进行转录组测序,使用R语言clusterProfiler包筛选出EAU中的差异表达基因并进行GO和KEGG富集分析,采用实时荧光定量PCR验证视网膜组织中核心差异表达基因的表达。结果造模第21天,EAU组小鼠临床评分为(2.83±0.94)分,明显高于对照组的(1.89±0.93)分,差异有统计学意义(t=2.290,P<0.05),EAU组小鼠视网膜血管出现迂曲及扩张,组织病理学显示视网膜中有大量炎性细胞浸润,确定EAU小鼠造模成功。对小鼠视网膜组织进行转录组测序,共鉴定32473个基因,筛选出差异表达基因154个,其中上调基因79个(前3位分别为Gm38574、Tmem81、Ptpn7),下调基因75个(前3位分别为Gm19802、Fga、Cyp3a11)。GO富集分析显示,差异表达基因多与免疫应答和细胞因子作用有关;KEGG通路富集分析显示,差异表达基因主要富集于Toll样通路和细胞因子信号通路。与对照组比较,EAU组视网膜组织Gm38574、Tmem81、Ptpn7相对表达量上调,Gm19802、Fga、Cyp3a11表达量下调,差异均有统计学意义(t=9.755、5.358、6.289、4.312、6.577、6.118,均P<0.05)。结论EAU小鼠视网膜组织中关键基因Gm38574、Tmem81、Ptpn7、Gm19802、Fga、Cyp3a11表达存在明显差异,主要与细胞因子相互作用通路、Toll样受体传导通路有关。 展开更多
关键词 转录组测序 实验性自身免疫性葡萄膜炎 差异表达基因
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基于IP3-蛋白激酶C通路探讨人视网膜血管内皮细胞高糖性损伤的作用机制
2
作者 刘强 俞华 +1 位作者 董立红 廖荣丰 《安徽医科大学学报》 北大核心 2024年第12期2112-2116,共5页
目的探讨IP3蛋白激酶C通路在高糖条件对人视网膜血管内皮细胞的损伤作用。方法取对数生长期的人视网膜血管内皮细胞,分为实验组(10 mmol/L、20 mmol/L葡萄糖)和对照组(5 mmol/L葡萄糖),在不同浓度葡萄糖培养基下观察细胞形态学变化,流... 目的探讨IP3蛋白激酶C通路在高糖条件对人视网膜血管内皮细胞的损伤作用。方法取对数生长期的人视网膜血管内皮细胞,分为实验组(10 mmol/L、20 mmol/L葡萄糖)和对照组(5 mmol/L葡萄糖),在不同浓度葡萄糖培养基下观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测人视网膜血管内皮细胞的凋亡情况,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测IP3-蛋白激酶C(PKC)通路中PKC的RNA表达水平,蛋白质印迹法检测细胞中PKC的蛋白表达水平。结果高糖条件下,人视网膜血管内皮细胞体积增大,伸展度减小,凋亡率增加,与对照组比较,20 mmol/L葡萄糖组人视网膜血管内皮细胞凋亡率增加(P<0.05);20 mmol/L葡萄糖组人视网膜血管内皮细胞IP3水平(587.9±15.2)ng/ml相较对照组IP3水平(738.9±1.0)ng/ml降低(P<0.05),高糖处理下,PKC mRNA及蛋白表达水平增加(P<0.05)。结论IP3-PKC通路可能参与高糖条件下人视网膜血管内皮细胞的损伤过程,因此可能在糖尿病视网膜病变中起到作用。 展开更多
关键词 人视网膜血管内皮细胞 IP3-蛋白激酶C通路 糖尿病视网膜病变 高糖 凋亡
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不同时机视网膜激光光凝辅助康柏西普治疗视网膜中央静脉阻塞继发黄斑水肿的疗效分析 被引量：10
3
作者 董立红 张大传 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第7期546-550,共5页
目的分析不同时机的视网膜激光光凝辅助康柏西普治疗对视网膜中央静脉阻塞(CRVO)继发黄斑水肿(ME)患者疗效的影响。方法收集2017年6月至2019年6月于安徽医科大学附属巢湖医院眼科收治的101例(101眼)CRVO继发ME患者,按治疗情况分药物组(... 目的分析不同时机的视网膜激光光凝辅助康柏西普治疗对视网膜中央静脉阻塞(CRVO)继发黄斑水肿(ME)患者疗效的影响。方法收集2017年6月至2019年6月于安徽医科大学附属巢湖医院眼科收治的101例(101眼)CRVO继发ME患者,按治疗情况分药物组(康柏西普治疗)、联合组A(康柏西普联合激光光凝治疗,病程<3个月)、联合组B(康柏西普联合激光光凝治疗,病程≥3个月),3组患者均按每月1次的频率接受3次玻璃体内注射康柏西普治疗,3次后接受按需治疗;联合组A、联合组B则在每次药物注射3 d后接受激光光凝治疗;比较3组患者康柏西普注射次数、视力、黄斑中心凹视网膜厚度(CMT)、视网膜出血吸收情况、无灌注区消退及新生血管情况。结果联合组A、联合组B患者康柏西普平均注射次数均显著低于药物组,但联合组A与联合组B患者间比较差异无统计学意义(P>0.05);联合组A、联合组B患者视力变化均优于药物组(均为P<0.001),且联合组A患者视力提高比例优于联合组B(P=0.027);联合组A、联合组B患者治疗后1个月、3个月、6个月、12个月时的CMT均显著高于药物组(均为P<0.05),但联合组A与联合组B患者间各时间点CMT相比差异均无统计学意义(均为P>0.05);联合组A、联合组B患者出血吸收情况及基于无灌区和新生血管情况的疗效等级均优于药物组(均为P<0.001),且联合组A患者的出血吸收情况及疗效等级均优于联合组B(均为P<0.05)。结论CRVO继发ME患者早期开展激光光凝治疗可获得更好的视力改善,出血吸收、无灌注区消退效果更佳,在抑制新生血管形成上优势更显著。 展开更多
关键词 视网膜中央静脉阻塞 黄斑水肿 激光光凝 康柏西普
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