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题名TMEM88真核表达质粒的构建及其功能研究
被引量：2
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作者
倪升丽
胡富勇
李增
孟晓明
王学富
徐涛
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机构
安徽医科大学附属合肥医院(合肥市第二人民医院)肿瘤放疗科
安徽医科大学药学院
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出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2017年第6期839-842,共4页
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基金
合肥市科技攻关计划项目(编号:合科[2015]163号-38)
安徽医科大学博士科研资助基金(编号:XJ201536)
安徽高校自然科学研究重点项目(编号:KJ2016A348)
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文摘
目的构建TMEM88的真核表达质粒,并研究其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法提取人肝星状细胞的总RNA,逆转录成cDNA作为模板,利用PCR法扩增出TMEM88的CDS序列,双酶切后连接到pEGFP-C2载体上,然后进行转化、质粒抽提、酶切鉴定,最后挑取阳性克隆送生物公司测序。将pEGFP-C2-TMEM88真核表达质粒分别转染至人肝癌细胞株SMMC-7721中,通过MTT实验和流式细胞术检测其对细胞增殖和凋亡的影响。结果测序结果显示pEGFP-C2-TMEM88真核表达质粒构建成功;MTT实验结果显示,过表达组细胞的增殖率为(0.625±0.07),显著低于正常组的(0.880±0.09)(P<0.05);流式细胞术结果显示,过表达组细胞的凋亡率为22.1%,显著高于正常组的9.1%。结论 TMEM88能够显著抑制人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并促进其凋亡,为进一步了解TMEM88的功能、寻求肝癌治疗的新方向奠定了基础。
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关键词
TMEM88
转染
增殖
凋亡
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Keywords
TMEM88
transfection
proliferation
apoptosis
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分类号
R349.65
[医药卫生—基础医学]
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