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皮质酮预处理对LPS激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A的抑制作用
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作者 牛耕辰 王俊 +1 位作者 张悦 尹艳艳 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第9期1712-1718,1729,共8页
目的探讨皮质酮(CORT)预处理对脂多糖(LPS)激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A(Bio A)对小胶质细胞活化的抑制作用。方法用MTT法筛选出LPS、CORT和Bio A对BV2细胞的最适浓度;将BV2细胞分为5组:Control组、CORT(50 nmol/L)组、LPS(1μg... 目的探讨皮质酮(CORT)预处理对脂多糖(LPS)激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A(Bio A)对小胶质细胞活化的抑制作用。方法用MTT法筛选出LPS、CORT和Bio A对BV2细胞的最适浓度;将BV2细胞分为5组:Control组、CORT(50 nmol/L)组、LPS(1μg/mL)组、LPS(1μg/mL)+CORT(50 nmol/L)组、LPS(1μg/mL)+CORT(50 nmol/L)+Bio A(5μmol/L)组,除对照组外,各组先加入CORT(50 nmol/L)孵育2 h,然后各组加入相应浓度的LPS(1μg/mL)和BioA(5μmol/L)共同孵育36 h;DCFH-DA探针法测定活性氧(ROS)含量;Western blot法测定炎性细胞因子、5-羟色胺转运体(5-HTT)、糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白1(Caspase-1)的蛋白表达水平。结果与CORT(50 nmol/L)组和LPS(1μg/mL)组比较,CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)组的BV2细胞的活力增加,ROS的含量更高,炎性细胞因子、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达水平增加(P<0.05);与CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)组比较,CORT(50 nmol/L)+LPS(1μg/mL)+Bio A(5μmol/L)组的细胞活力降低,ROS的含量下降,炎性细胞因子、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达减少(P<0.05)。结论小剂量的CORT预处理可以促进LPS激活BV2细胞;Bio A抑制经CORT预处理后LPS诱导的BV2细胞活化,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体的激活有关。 展开更多
关键词 皮质酮 脂多糖 小胶质细胞 鸡豆黄素A 活性氧 NLRP3炎症小体
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瞬时受体电位阳离子通道6在海仁藻酸诱导小鼠癫痫发生中的作用及机制
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作者 程思敏 王浩川 +2 位作者 张雨燕 王宇 吴文宁 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第11期2120-2127,共8页
目的 探究瞬时受体电位阳离子通道6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)在海仁藻酸(kainic acid,KA)诱导小鼠癫痫发生中的作用及机制。方法 C57BL/6和TRPC6-KO(knockout,KO)小鼠分为2组,通过侧脑室预埋套管微量注射K... 目的 探究瞬时受体电位阳离子通道6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)在海仁藻酸(kainic acid,KA)诱导小鼠癫痫发生中的作用及机制。方法 C57BL/6和TRPC6-KO(knockout,KO)小鼠分为2组,通过侧脑室预埋套管微量注射KA(0.03 g·L^(-1),5μL)建立急性癫痫模型组,注射生理盐水作为对照组;采用Racine评分记录KA给药后2 h内小鼠不间断的癫痫发作等级;用免疫组化反应检测小鼠海马脑区神经元丢失和组织损伤情况;免疫荧光染色、Westem blot和qPCR检测小鼠海马脑区TRPC6和NLRP3、A SC、Caspase-1以及p62、Atg7、Atg5、Beclin-1、LC3b-Ⅱ/LC3b-Ⅰ的表达。结果 KA诱导的癫痫小鼠海马CA3脑区出现明显的神经元丢失和组织损伤,同时癫痫小鼠海马脑区TRPC6和NLRP3、ASC、Caspase-1等蛋白表达水平增加,自噬相关蛋白Atg7、Atg5、Beclin-1、LC3b-Ⅱ/LC3b-Ⅰ蛋白表达增加,而p62蛋白表达减少;TRPC6敲除加重KA诱导的癫痫发生、神经元损伤、炎症反应和自噬激活。结论TRPC6参与了KA诱导的癫痫发生,机制可能与TRPC6缺失导致NLRP3炎症小体-自噬信号激活有关。 展开更多
关键词 TRPC6 KA 癫痫 NLRP3 神经炎症 自噬
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