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犬尿氨酸-3-单加氧酶在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞和滑膜组织中的表达及意义
1
作者
宗雪梅
林茜茜
+4 位作者
陈悦兰
王鑫铭
魏伟
严尚学
常艳
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第7期1218-1224,共7页
目的探讨犬尿氨酸-3-单加氧酶(KMO)在类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)、滑膜组织和成纤维样滑膜细胞(FLS)中的表达及临床意义。方法收集25例健康对照(HC)个体和25例确诊为RA患者的外周血样本,采用实时荧光定量PCR和Western ...
目的探讨犬尿氨酸-3-单加氧酶(KMO)在类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)、滑膜组织和成纤维样滑膜细胞(FLS)中的表达及临床意义。方法收集25例健康对照(HC)个体和25例确诊为RA患者的外周血样本,采用实时荧光定量PCR和Western blot法对RA组和HC组PBMC中KMO基因和蛋白表达进行检测,并分析RA患者PBMC中KMO基因表达水平与实验室检测指标之间的相关性。同时,利用免疫组化和免疫荧光技术检测RA组和HC组滑膜组织及FLS中KMO的表达情况。结果(1)RA组PBMC中KMO基因和蛋白表达高于HC组,差异有统计学意义(P<0.001)。(2)RA组PBMC中KMO基因表达水平与疾病活动指数28评分、血沉、类风湿因子呈正相关(r_(s)=0.417,P=0.038;r=0.545,P=0.005;r_(s)=0.433,P=0.031),与C反应蛋白、抗环瓜氨酸多肽抗体无相关性。(3)RA组滑膜组织中KMO表达高于HC组,差异有统计学意义(P<0.01);RA组滑膜组织FLS中KMO表达高于HC组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论RA患者PBMC、滑膜组织及FLS中KMO表达增加,且KMO基因表达水平与RA患者疾病活动性相关,提示KMO可能促进RA病程。
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关键词
类风湿关节炎
犬尿氨酸-3-单加氧酶
犬尿氨酸
3-羟基犬尿氨酸
外周血单个核细胞
滑膜组织
成纤维样滑膜细胞
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职称材料
肿瘤坏死因子受体相关因子2杂合子敲除小鼠构建和表型研究
2
作者
王伟康
左书俊
+4 位作者
谷金涛
郭富媛
郭昊周
韩陈陈
魏伟
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第7期1291-1296,共6页
目的应用CRISPR/Cas9技术构建肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)杂合子敲除小鼠,用于研究TNF-α-TRAF2信号转导异常介导的炎症免疫性疾病的病理机制及新靶点药物的开发。方法构建靶向敲除TRAF2基因的载体,通过显微注射,将先导RNA和Cas9 ...
目的应用CRISPR/Cas9技术构建肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)杂合子敲除小鼠,用于研究TNF-α-TRAF2信号转导异常介导的炎症免疫性疾病的病理机制及新靶点药物的开发。方法构建靶向敲除TRAF2基因的载体,通过显微注射,将先导RNA和Cas9 mRNA导入到C57BL/6JGpt小鼠的受精卵中,介导小鼠TRAF2基因突变,提取鼠尾蛋白,通过PCR和Western blot测定F0代基因型,成功获得TRAF2^(+/-)小鼠。使用F0代小鼠与C57BL/6JGpt野生型小鼠回交,获得稳定的TRAF2^(+/-)小鼠用于扩繁及后续实验。检测TRAF2^(+/-)小鼠体质量;Western blot检测TRAF2^(+/-)小鼠脾脏、肝脏及肾脏组织中TRAF2表达;HE染色检测TRAF2^(+/-)小鼠脾脏、肝脏及肾脏组织的发育情况。结果利用引物进行PCR鉴定,结果表明TRAF2^(+/-)小鼠在679 bp出现目的条带;Western blot结果表明,与野生型组比较,TRAF2^(+/-)小鼠鼠尾蛋白中TRAF2的表达明显下降(P<0.01)。与野生型小鼠比较,TRAF2^(+/-)小鼠体质量减轻(P<0.05);Western blot结果表明,与野生型小鼠比较,TRAF2^(+/-)小鼠的脾脏、肝脏及肾脏组织中TRAF2蛋白表达均降低(P<0.01)。HE染色结果表明,与野生型小鼠比较,TRAF2^(+/-)小鼠脾脏、肝脏及肾脏组织内细胞形态无明显差异。结论成功构建TRAF2^(+/-)小鼠,为探究TRAF2在发育调控中的作用、揭示TNF-α-TRAF2信号异常介导的炎症免疫疾病机制以及筛选相关药物靶点提供了重要动物模型。
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关键词
TRAF2
CRISPR/Cas9
基因敲除
基因工程小鼠
基因型鉴定
表型研究
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职称材料
题名
犬尿氨酸-3-单加氧酶在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞和滑膜组织中的表达及意义
1
作者
宗雪梅
林茜茜
陈悦兰
王鑫铭
魏伟
严尚学
常艳
机构
安徽医科大学药学科学学院
临床药理研究所
安徽医科大学
第一附属医院药剂科
安徽医科大学
实验动物中心
出处
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第7期1218-1224,共7页
基金
安徽省自然科学基金(编号:2108085MH320)
安徽省转化医学研究院科研基金项目(编号:2023zhyx-C11)。
文摘
目的探讨犬尿氨酸-3-单加氧酶(KMO)在类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)、滑膜组织和成纤维样滑膜细胞(FLS)中的表达及临床意义。方法收集25例健康对照(HC)个体和25例确诊为RA患者的外周血样本,采用实时荧光定量PCR和Western blot法对RA组和HC组PBMC中KMO基因和蛋白表达进行检测,并分析RA患者PBMC中KMO基因表达水平与实验室检测指标之间的相关性。同时,利用免疫组化和免疫荧光技术检测RA组和HC组滑膜组织及FLS中KMO的表达情况。结果(1)RA组PBMC中KMO基因和蛋白表达高于HC组,差异有统计学意义(P<0.001)。(2)RA组PBMC中KMO基因表达水平与疾病活动指数28评分、血沉、类风湿因子呈正相关(r_(s)=0.417,P=0.038;r=0.545,P=0.005;r_(s)=0.433,P=0.031),与C反应蛋白、抗环瓜氨酸多肽抗体无相关性。(3)RA组滑膜组织中KMO表达高于HC组,差异有统计学意义(P<0.01);RA组滑膜组织FLS中KMO表达高于HC组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论RA患者PBMC、滑膜组织及FLS中KMO表达增加,且KMO基因表达水平与RA患者疾病活动性相关,提示KMO可能促进RA病程。
关键词
类风湿关节炎
犬尿氨酸-3-单加氧酶
犬尿氨酸
3-羟基犬尿氨酸
外周血单个核细胞
滑膜组织
成纤维样滑膜细胞
Keywords
rheumatoid arthritis
kynurenine 3-monooxygenase
kynurenine
3-hydroxykynurenine
peripheral blood mononuclear cells
synovial tissue
fibroblast-like synoviocytes
分类号
R593.22 [医药卫生—内科学]
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
肿瘤坏死因子受体相关因子2杂合子敲除小鼠构建和表型研究
2
作者
王伟康
左书俊
谷金涛
郭富媛
郭昊周
韩陈陈
魏伟
机构
安徽医科大学药学科学学院
临床药理研究所
出处
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第7期1291-1296,共6页
基金
国家自然科学基金(编号:82104187、82173824)。
文摘
目的应用CRISPR/Cas9技术构建肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)杂合子敲除小鼠,用于研究TNF-α-TRAF2信号转导异常介导的炎症免疫性疾病的病理机制及新靶点药物的开发。方法构建靶向敲除TRAF2基因的载体,通过显微注射,将先导RNA和Cas9 mRNA导入到C57BL/6JGpt小鼠的受精卵中,介导小鼠TRAF2基因突变,提取鼠尾蛋白,通过PCR和Western blot测定F0代基因型,成功获得TRAF2^(+/-)小鼠。使用F0代小鼠与C57BL/6JGpt野生型小鼠回交,获得稳定的TRAF2^(+/-)小鼠用于扩繁及后续实验。检测TRAF2^(+/-)小鼠体质量;Western blot检测TRAF2^(+/-)小鼠脾脏、肝脏及肾脏组织中TRAF2表达;HE染色检测TRAF2^(+/-)小鼠脾脏、肝脏及肾脏组织的发育情况。结果利用引物进行PCR鉴定,结果表明TRAF2^(+/-)小鼠在679 bp出现目的条带;Western blot结果表明,与野生型组比较,TRAF2^(+/-)小鼠鼠尾蛋白中TRAF2的表达明显下降(P<0.01)。与野生型小鼠比较,TRAF2^(+/-)小鼠体质量减轻(P<0.05);Western blot结果表明,与野生型小鼠比较,TRAF2^(+/-)小鼠的脾脏、肝脏及肾脏组织中TRAF2蛋白表达均降低(P<0.01)。HE染色结果表明,与野生型小鼠比较,TRAF2^(+/-)小鼠脾脏、肝脏及肾脏组织内细胞形态无明显差异。结论成功构建TRAF2^(+/-)小鼠,为探究TRAF2在发育调控中的作用、揭示TNF-α-TRAF2信号异常介导的炎症免疫疾病机制以及筛选相关药物靶点提供了重要动物模型。
关键词
TRAF2
CRISPR/Cas9
基因敲除
基因工程小鼠
基因型鉴定
表型研究
Keywords
TRAF2
CRISPR/Cas9
gene knockout
genetically engineered mice
genotyping
phenotypic study
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
犬尿氨酸-3-单加氧酶在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞和滑膜组织中的表达及意义
宗雪梅
林茜茜
陈悦兰
王鑫铭
魏伟
严尚学
常艳
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
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职称材料
2
肿瘤坏死因子受体相关因子2杂合子敲除小鼠构建和表型研究
王伟康
左书俊
谷金涛
郭富媛
郭昊周
韩陈陈
魏伟
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025
0
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