模型教学法在经支气管镜高频电圈套术培训中的应用 被引量：9

1

作者 钱堃 黄海东 +4 位作者 王琴 陈长明 宁允叶 白冲 李强 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1528-1532,共5页

目的探讨基于一种支气管镜诊疗模型的综合教学法在经支气管镜高频电圈套术培训中的作用。方法采用前瞻性自身对照研究,选择20名在第二军医大学长海医院呼吸内镜中心受训的学员作为培训对象,由2名长海医院呼吸内镜专家指导,通过理论知识... 目的探讨基于一种支气管镜诊疗模型的综合教学法在经支气管镜高频电圈套术培训中的作用。方法采用前瞻性自身对照研究,选择20名在第二军医大学长海医院呼吸内镜中心受训的学员作为培训对象,由2名长海医院呼吸内镜专家指导,通过理论知识辅导和模型训练的综合教学法开展经支气管镜高频电圈套操作培训。比较培训前后学员在高频电圈套操作的准确性、流畅度、操作耗时、病灶切除率等方面的差异,并针对培训效果进行问卷调查。结果 20名学员均顺利完成操作培训。与培训前相比,培训后学员经支气管镜高频电圈套切除目标病灶的操作准确性评分由5.73±1.37提高到8.50±0.81,差异有统计学意义(P<0.01);操作流畅度评分由5.20±1.61提高到8.27±1.00,差异有统计学意义(P<0.01);操作总耗时由(214.9±112.6)s缩短到(88.1±18.2)s,差异有统计学意义(P=0.01);一次性病灶切除率由(60.0±16.3)%提高到(76.0±12.6)%,差异有统计学意义(P=0.05)。对学员的问卷调查结果显示,模型教学法在操作可重复性、仿真度、安全性,以及增加操作稳定性、提高培训效率方面均具有一定优势。结论采用基于支气管镜诊疗模型的综合教学法开展经支气管镜高频电圈套术的培训,教学效果显著,值得推广。 展开更多

关键词 支气管镜 教育模型 培训 高频电圈套术

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PEDF对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力和转移相关蛋白表达水平的影响 被引量：6

2

作者 程宇 束军 +1 位作者 徐胜 李晓峰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第3期345-350,共6页

目的观察色素上皮衍生因子(PEDF)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力以及对转移相关蛋白如纤维连接蛋白(FN)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达水平的影响。方法设不加PEDF的肺腺癌A549细胞为阴性对照组,PEDF干预组细胞分别加入180、360和720 nm... 目的观察色素上皮衍生因子(PEDF)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力以及对转移相关蛋白如纤维连接蛋白(FN)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达水平的影响。方法设不加PEDF的肺腺癌A549细胞为阴性对照组,PEDF干预组细胞分别加入180、360和720 nmol/L PEDF;Transwell检测PEDF对A549细胞迁移和侵袭能力的影响;半定量RT-PCR法检测PEDF对FN、MMP-9 mRNA表达水平的影响;ELISA法检测PEDF对A549细胞培养上清液中和细胞内的FN、MMP-9蛋白表达水平的影响。结果 PEDF干预组的A549细胞迁移细胞数和侵袭细胞数均显著低于阴性对照组(P<0.05),随着PEDF浓度的增加,迁移和侵袭细胞数逐渐减少(P<0.05)。各浓度PEDF干预组A549细胞的FN、MMP-9表达水平较阴性对照组显著降低(P<0.05),随着PEDF浓度的增加,FN、MMP-9表达水平逐渐降低(P<0.05)。结论 PEDF在体外能显著抑制肺腺癌A549细胞的迁移和侵袭能力,能显著抑制转移相关蛋白(FN、MMP-9)的表达水平。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 肺腺癌 转移 迁移 侵袭

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高浓度葡萄糖对肺腺癌A549细胞生长及VEGF、MMP-2表达的影响 被引量：4

3

作者 李晓峰 束军 +2 位作者 程宇 徐胜 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第3期363-368,共6页

目的观察高浓度葡萄糖对肺腺癌A549细胞生长及血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法根据处理条件不同,将A549细胞分为:对照组(无干预)、甘露醇组(25 mmol/L甘露醇)、葡萄糖组(10、20、30、40 mmol/L葡萄糖... 目的观察高浓度葡萄糖对肺腺癌A549细胞生长及血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法根据处理条件不同,将A549细胞分为:对照组(无干预)、甘露醇组(25 mmol/L甘露醇)、葡萄糖组(10、20、30、40 mmol/L葡萄糖)、顺铂组(5、10、20、40μmol/L顺铂)和联合组(30 mmol/L葡萄糖联合5、10、20、40μmol/L顺铂),分别处理48 h后,采用MTT法检测细胞的增殖率,比较不同组别间细胞增殖率的差异;对照组、葡萄糖组、甘露醇组处理24 h和48 h后,采用半定量RT-PCR法检测细胞中VEGF、MMP-2的mRNA水平,采用ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF、MMP-2的蛋白浓度,比较不同组别间VEGF、MMP-2的表达水平差异。结果除10 mmol/L葡萄糖组外,葡萄糖组的细胞增殖率均高于对照组(P<0.05);相同顺铂浓度下,联合组的细胞增殖率高于顺铂组(P<0.05);与对照组比较,葡萄糖组VEGF、MMP-2表达明显增强(P<0.05),且对葡萄糖浓度有一定依赖性,葡萄糖浓度为30 mmol/L时VEGF mRNA、MMP-2的mRNA和蛋白水平达最高值,40 mmol/L时VEGF蛋白浓度最高;相同干预条件,48 h细胞的VEGF、MMP-2表达水平高于24 h(P<0.05)。结论高浓度葡萄糖能促进肺腺癌A549细胞的增殖,增强对顺铂的耐受力及VEGF、MMP-2的表达。 展开更多

关键词 葡萄糖 肺腺癌 生长 血管内皮生长因子 基质金属蛋白酶-2

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miRNA-16对肺腺癌A549细胞增殖和VEGF-A表达水平的影响 被引量：4

4

作者 徐胜 束军 +2 位作者 李晓峰 程宇 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第4期489-492,共4页

目的探讨miRNA-16作用不同时间对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖的影响,以及对VEGF-A表达水平的影响。方法将50 nmol/L,的miRNA-16和阴性对照序列用Lipofectamine 2000转染进人肺腺癌A549细胞中,通过qRT-PCR法检测转染后A549细胞中miRN... 目的探讨miRNA-16作用不同时间对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖的影响,以及对VEGF-A表达水平的影响。方法将50 nmol/L,的miRNA-16和阴性对照序列用Lipofectamine 2000转染进人肺腺癌A549细胞中,通过qRT-PCR法检测转染后A549细胞中miRNA-16的表达水平,MTT法检测转染miRNA-16后细胞的增殖抑制情况,ELISA法检测转染miRNA-16后细胞VEGF-A表达水平。结果转染培养24h后,测得转染组miRNA-16表达水平明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);转染组细胞增殖抑制率明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);转染组细胞VEGF-A表达水平较阴性对照组和空白对照组明显降低(P<0.05)。结论 miRNA-16能引起细胞增殖抑制,并且可能与下调VEGF-A的表达有关。 展开更多

关键词 肺腺癌 VEGF-A miRNA-16 细胞增殖

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3-溴丙酮酸对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白表达水平的影响 被引量：1

5

作者 张梅 束军 +1 位作者 朱宁 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第8期1174-1178,共5页

目的 观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白-9(MMP-9)表达能力的影响。方法 划痕实验和Transwell实验检测A549细胞的迁移、侵袭能力;己糖激酶-2(HK2)活性试剂盒检测A54... 目的 观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白-9(MMP-9)表达能力的影响。方法 划痕实验和Transwell实验检测A549细胞的迁移、侵袭能力;己糖激酶-2(HK2)活性试剂盒检测A549细胞内的HK2活性;ELISA检测试剂盒检测不同浓度3-BrPA对A549细胞培养上清液中和细胞内MMP-9、Vimentin表达水平的影响。结果 划痕实验和Transwell结果显示,3-BrPA干预组的A549细胞迁移距离、迁移细胞数和侵袭细胞数均显著低于阴性对照组(P<0.05);HK2活性结果显示,3-BrPA干预组A549细胞内HK2活性明显低于阴性对照组(P<0.05);ELISA实验结果显示,3-BrPA干预组MMP-9、Vimentin表达水平明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论 3-BrPA能显著抑制人肺腺癌A549细胞的迁移和侵袭能力,能显著抑制肿瘤转移相关蛋白MMP-9和Vimentin的表达水平。 展开更多

关键词 3-溴丙酮酸 肺腺癌 迁移 侵袭

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TXNIP和CEA联合检测对良恶性胸腔积液的诊断价值 被引量：7

6

作者 袁杰清 束军 +1 位作者 王丹平 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第3期341-344,共4页

目的探讨硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)、癌胚抗原(CEA)联合检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中价值。方法收集57例胸腔积液患者(良性32例,恶性25例)的临床资料,采用ELISA法测定血清和胸腔积液中TXNIP和CEA浓度水平。结果恶性胸腔积液中TXNI... 目的探讨硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)、癌胚抗原(CEA)联合检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中价值。方法收集57例胸腔积液患者(良性32例,恶性25例)的临床资料,采用ELISA法测定血清和胸腔积液中TXNIP和CEA浓度水平。结果恶性胸腔积液中TXNIP浓度明显低于良性胸腔积液中的含量;良恶性胸腔积液患者的血清中TXNIP浓度水平差异无统计学意义。TXNIP浓度89.57μg/L为最佳临界值,恶性胸腔积液的诊断灵敏度76%,特异度87.5%,符合率86.96%;CEA浓度5.285μg/L为最佳临界值,恶性胸腔积液的诊断灵敏度88%,特异度90.6%,符合率91.23%。联合试验,并联诊断的灵敏度为97.12%,特异度为79.28%;串联诊断灵敏度为66.88%,特异度98.83%。结论 TXNIP对恶性胸腔积液的诊断具有一定价值,与CEA联合检测可以提高诊断灵敏度与特异度。但是TXNIP对恶性胸腔积液的诊断价值并不优于CEA。 展开更多

关键词 硫氧还蛋白结合蛋白 癌胚抗原 胸腔积液 诊断

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PEDF对人肺腺癌A549细胞增殖与凋亡的影响 被引量：4

7

作者 娄志霞 束军 +1 位作者 金程 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第10期1361-1364,共4页

目的探讨不同浓度色素上皮衍生因子(PEDF)作用不同时间对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度(0、80、160、320、640 nmol/L)的重组人PEDF蛋白对体外培养的人肺腺癌细胞株A549进行干预,在处理24、48、72 h后,... 目的探讨不同浓度色素上皮衍生因子(PEDF)作用不同时间对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度(0、80、160、320、640 nmol/L)的重组人PEDF蛋白对体外培养的人肺腺癌细胞株A549进行干预,在处理24、48、72 h后,分别用MTT法检测PEDF对A549细胞增殖的抑制率并比较;在作用48 h后,以流式细胞仪检测技术计算、分析A549细胞凋亡率。结果不同浓度PEDF(0、80、160、320、640 nmol/L)干预A549细胞相同作用时间(24、48、72 h)情况下,随着PEDF浓度的增加,PEDF对A549细胞的增殖抑制率递增(P<0.05);相同PEDF浓度(80、160、320、640 nmol/L)情况下,除了80、160 nmol/L PEDF作用24 h和48 h的细胞增殖抑制率间差异无统计学意义外,随着PEDF作用时间的延长,PEDF对A549细胞的增殖抑制率也基本呈递增趋势(P<0.05)。上述不同浓度的PEDF处理A549细胞48 h,细胞凋亡率随着PEDF浓度的升高呈递增趋势(P<0.05)。结论 PEDF在体外能抑制人肺腺癌细胞株A549的增殖并诱导其凋亡。PEDF抑制细胞增殖作用可能和PEDF浓度及作用时间有关,PEDF诱导细胞凋亡作用的强弱也与PEDF浓度有一定关系。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 肺腺癌 A549 细胞增殖 细胞凋亡

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乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响 被引量：4

8

作者 朱宁 束军 +1 位作者 张梅 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第8期1247-1251,1257,共6页

目的 探讨不同浓度乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin(GF)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 体外培养肺腺癌A549细胞,实验分为对照组(无GF处理组)和实验组(GF处理组,浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L),分别使用CCK-8、... 目的 探讨不同浓度乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin(GF)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 体外培养肺腺癌A549细胞,实验分为对照组(无GF处理组)和实验组(GF处理组,浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L),分别使用CCK-8、划痕实验、Transwell法检测不同浓度GF在不同作用时间条件下对A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响;分别使用乳酸脱氢酶活性检测试剂盒、乳酸定量试剂盒检测不同浓度GF对乳酸脱氢酶活性、乳酸生成量的影响。结果 CCK-8结果表明,GF对A549细胞具有增殖抑制作用,并且在一定浓度和时间范围内呈现出依赖性(P<0.05)。划痕实验结果表明,实验组细胞迁移率小于对照组(P<0.05),随着GF浓度的增加,迁移率逐渐降低(P<0.05)。Transwell结果表明,实验组细胞侵袭细胞数小于对照组(P<0.05),随着GF浓度的增加,侵袭细胞数逐渐减少(P<0.05)。乳酸脱氢酶活性检测结果表明,实验组乳酸脱氢酶活性较对照组显著降低(P<0.05),随着GF浓度的增加,乳酸脱氢酶活性逐渐降低(P<0.05)。乳酸检测结果表明,实验组乳酸生成量较对照组显著减少(P<0.05),随着GF浓度的增加,乳酸生成量逐渐减少(P<0.05)。结论 GF在体外能够抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,其机制可能是通过抑制乳酸脱氢酶活性从而抑制肺癌细胞糖酵解。 展开更多

关键词 Galloflavin 肺腺癌 增殖 迁移 侵袭

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PEDF对人脐静脉内皮细胞和肺癌SK-MES-1细胞增殖的影响及作用机制 被引量：3

9

作者 孟静 束军 李志斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第5期682-687,共6页

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对SK-MES-1细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响及可能的机制。方法 CCK-8法检测不同浓度PEDF在不同作用时间条件下对HUVECs和SK-MES-1细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度PEDF对此两种细胞凋... 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对SK-MES-1细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响及可能的机制。方法 CCK-8法检测不同浓度PEDF在不同作用时间条件下对HUVECs和SK-MES-1细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度PEDF对此两种细胞凋亡的影响;qRTPCR检测PEDF对此两种细胞中血管内皮生长因子(VEGF)基因表达水平的影响。结果 CCK-8结果显示,PEDF对HUVECs和SK-MES-1细胞具有增殖抑制作用,呈一定浓度和时间依赖性(P<0.05);流式细胞术结果表明,实验组细胞的凋亡率高于对照组(P<0.05),高浓度用药组凋亡率高于低浓度用药组(P<0.05);qRT-PCR结果表明,与对照组相比,PEDF能抑制HUVECs和SK-MES-1细胞中VEGF mRNA水平的表达(P<0.05)。结论 PEDF的抗肿瘤作用主要包括抑制肿瘤血管生成和直接作用于肿瘤细胞两方面,PEDF对HUVECs和SK-MES-1细胞增殖的影响可能与降低VEGF表达水平有关。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 脐静脉内皮细胞 血管内皮生长因子 肺癌

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色素上皮衍生因子对非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响 被引量：5

10

作者 刘正兵 束军 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第6期604-607,共4页

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对非小细胞肺癌NCI-H460细胞株增殖及凋亡的影响。方法分别以不同浓度的PEDF干预人肺癌NCI-H460细胞株,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测PEDF对NCI-H460细胞增殖的影响;通过倒置显微镜观察NCI-H460细胞的... 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对非小细胞肺癌NCI-H460细胞株增殖及凋亡的影响。方法分别以不同浓度的PEDF干预人肺癌NCI-H460细胞株,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测PEDF对NCI-H460细胞增殖的影响;通过倒置显微镜观察NCI-H460细胞的形态学变化;流式细胞术及Annexin V-FITC/PI双染试剂盒检测PEDF对NCI-H460细胞凋亡的影响。结果 MTT法检测表明PEDF对NCI-H460细胞有明显的增殖抑制作用;通过倒置显微镜可观察到细胞明显的形态学改变;流式细胞术检测结果显示:180、360、720 nmol/L的PEDF干预NCI-H460细胞48 h后,细胞凋亡率分别为10.9%、11.4%及14.3%;随着PEDF浓度的升高,细胞凋亡率逐渐增高,且各干预组与阴性对照组相比,细胞凋亡率的差异均有统计学意义(P<0.01)。结论PEDF可显著抑制NCI-H460细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 非小细胞肺癌 细胞增殖 凋亡

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不同类型非小细胞肺癌细胞株中PEDF的表达 被引量：4

11

作者 王莉苹 束军 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第8期889-892,共4页

目的观察不同类型非小细胞肺癌细胞株中色素上皮衍生因子(PEDF)的表达水平。方法应用人永生化肺上皮细胞株16HBE作对照,对于人肺腺癌细胞株A549、肺鳞癌细胞株SK-MES-1和大细胞肺癌细胞株NCI-H460,分别采用半定量RT-PCR法检测PEDF mRNA... 目的观察不同类型非小细胞肺癌细胞株中色素上皮衍生因子(PEDF)的表达水平。方法应用人永生化肺上皮细胞株16HBE作对照,对于人肺腺癌细胞株A549、肺鳞癌细胞株SK-MES-1和大细胞肺癌细胞株NCI-H460,分别采用半定量RT-PCR法检测PEDF mRNA表达水平,用ELISA法检测24 h细胞培养上清液中和胞内PEDF蛋白。比较各肺癌细胞株与肺上皮细胞株间、不同类型肺癌细胞株间PEDF的表达水平差异。结果 A549、SK-MES-1、NCI-H460和16HBE 4种细胞株PEDF的表达水平均依次增强,除了NCI-H460与16HBE、A549与SK-MES-1细胞株间差异无统计学意义外,A549与NCI-H460、A549与16HBE、SK-MES-1与NCI-H460、SK-MES-1与16HBE细胞株间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论无论转录或蛋白水平,较之于大细胞肺癌或肺上皮细胞株,肺腺癌和鳞癌细胞株中PEDF均呈低表达;而肺腺癌与鳞癌大细胞肺癌与肺上皮细胞株间未见PEDF表达水平的实质性差异。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 色素上皮衍生因子 细胞株 诊断

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不同浓度葡萄糖对肺腺癌细胞PEDF表达的影响 被引量：2

12

作者 金程 束军 +1 位作者 娄志霞 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第8期1084-1087,共4页

目的观察不同浓度葡萄糖对肺腺癌细胞株A549中色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法在基础培养液中,根据加入的葡萄糖浓度分为:对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、甘露醇组(5.6 mmol/L葡萄糖+25 mmol/L甘露醇)、高糖A组(10 mmol/L葡萄糖)、... 目的观察不同浓度葡萄糖对肺腺癌细胞株A549中色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法在基础培养液中,根据加入的葡萄糖浓度分为:对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、甘露醇组(5.6 mmol/L葡萄糖+25 mmol/L甘露醇)、高糖A组(10 mmol/L葡萄糖)、高糖B组(20 mmol/L葡萄糖)、高糖C组(30 mmol/L葡萄糖),进行A549细胞培养,分别于24、48、96 h后取样:采用半定量RT-PCR法检测不同时间点、含不同浓度葡萄糖组细胞PEDF mRNA水平,用ELISA法检测细胞培养上清液中和胞内PEDF蛋白,比较不同组间PEDF表达水平差异。结果与对照组相比,随着葡萄糖浓度的增加,各组A549细胞PEDF的表达水平有明显下降趋势(P<0.05),呈剂量依赖性改变;随着葡萄糖作用时间的延长,除RT-PCR检测中的高糖C组,及ELISA检测中的高糖B组外,各组A549细胞PEDF的表达水平有明显下降趋势(P<0.05),呈时间依赖性改变。结论高浓度葡萄糖、较长时间作用可能降低肺腺癌细胞PEDF的表达水平。 展开更多

关键词 肺腺癌 色素上皮衍生因子 葡萄糖 浓度 影响

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丙戊酸钠对肺腺癌细胞的增殖、迁移能力的影响 被引量：2

13

作者 代丽丽 束军 +2 位作者 朱宁 张梅 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第5期702-706,共5页

目的探讨不同浓度丙戊酸钠(VPA)对肺腺癌PC9细胞增殖、迁移能力的影响及其可能的机制。方法体外培养PC9细胞,实验分为对照组(无VPA处理组)和实验组(VPA处理组,浓度分别为2、4、8、16 mmol/L),检测不同浓度VPA在不同作用时间条件下对PC9... 目的探讨不同浓度丙戊酸钠(VPA)对肺腺癌PC9细胞增殖、迁移能力的影响及其可能的机制。方法体外培养PC9细胞,实验分为对照组(无VPA处理组)和实验组(VPA处理组,浓度分别为2、4、8、16 mmol/L),检测不同浓度VPA在不同作用时间条件下对PC9细胞增殖、迁移能力的影响分别使用CCK-8、划痕实验;检测不同浓度VPA对乳酸脱氢酶(LDH)活性、乳酸(LD)生成量的影响分别使用(LDH)活性检测试剂盒、LD定量试剂盒,检测VPA干预PC9细胞后上清液及细胞内的E-钙黏蛋白(E-cad)及波形蛋白(VIM)的表达水平用ELISA法。结果CCK-8结果表明,VPA可以抑制PC9细胞的增殖,并且呈现出浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05)。划痕实验结果表明,实验组细胞迁移距离小于对照组(P<0.05),划痕宽度比对照组窄。VPA浓度越高,迁移距离越短(P<0.05),划痕宽度越窄。LDH活性和LD检测结果表明,实验组LDH活性和LD生成量较对照组显著降低(P<0.05),随着VPA浓度的增加,LDH活性和LD生成量逐渐降低(P<0.05)。ELISA结果显示,实验组细胞内外E-cad蛋白浓度与对照组相比均显著增高,并且随着VPA浓度增加,E-cad浓度逐渐增高(P<0.05);实验组细胞内外VIM蛋白浓度与对照组相比均显著降低,并且随着VPA浓度增加,VIM蛋白浓度逐渐降低(P<0.05)。结论VPA在体外能够抑制PC9细胞的增殖、迁移,且有可能是通过抑制有氧糖酵解和上皮间质转化途径。 展开更多

关键词 丙戊酸钠 肺腺癌 增殖 迁移

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二甲双胍丁酸盐对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡与迁移能力的影响 被引量：2

14

作者 陈晴晴 束军 +1 位作者 谢庆书 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第2期171-175,共5页

目的研究不同浓度的二甲双胍丁酸盐(MFB)作用不同时间后对人肺腺癌细胞A549增殖、凋亡与迁移能力的影响。方法用梯度浓度(0、0.5、1、2、4、8 mmol/L)的MFB对离体培养的A549细胞进行处理,在作用24、48 h后,用MTT法检测MFB对A549细胞增... 目的研究不同浓度的二甲双胍丁酸盐(MFB)作用不同时间后对人肺腺癌细胞A549增殖、凋亡与迁移能力的影响。方法用梯度浓度(0、0.5、1、2、4、8 mmol/L)的MFB对离体培养的A549细胞进行处理,在作用24、48 h后,用MTT法检测MFB对A549细胞增殖的抑制率;干预24、48 h后用流式细胞术分析A549细胞的凋亡率。用划痕实验分析MFB对A549细胞株迁移能力的影响。结果 MTT实验表明,MFB对A549细胞的增殖具有抑制作用,并且在一定浓度范围内呈现出浓度和时间依赖性(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示:实验组细胞凋亡率大于对照组(P<0.05),具有一定的时间和浓度依赖性(P<0.05)。划痕实验结果显示实验组细胞迁移率小于对照组,高浓度用药组细胞迁移率小于低浓度用药组(P<0.05),且药物作用48 h后细胞迁移率<24 h(P<0.05)。结论 MFB在体外能够抑制人肺腺癌A549细胞的增殖和迁移,促进其凋亡,其强度可能与其浓度和作用时间有关。 展开更多

关键词 二甲双胍丁酸盐 肺腺癌 增殖 凋亡 迁移

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高良姜素对于肺腺癌细胞增殖、迁移能力的影响 被引量：5

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作者 汪新 束军 +1 位作者 代丽丽 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第8期1212-1217,共6页

目的探讨不同浓度高良姜素(Ga)对于人肺腺癌A549、PC9细胞增殖、迁移能力的影响及其可能的机制。方法体外培养肺腺癌A549、PC9细胞,并分为对照组(DMSO溶剂对照组、0药对照组)和实验组(Ga浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L)。使用CCK-... 目的探讨不同浓度高良姜素(Ga)对于人肺腺癌A549、PC9细胞增殖、迁移能力的影响及其可能的机制。方法体外培养肺腺癌A549、PC9细胞,并分为对照组(DMSO溶剂对照组、0药对照组)和实验组(Ga浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L)。使用CCK-8实验和细胞划痕实验分别检测各组肺腺癌细胞的增殖和迁移能力;生化检测各组细胞乳酸(LD)生成量、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及ATP生成量;ELISA法检测各组细胞上清液中的E-钙黏蛋白(E-cad)和N-钙黏蛋白(E-cad)的蛋白表达水平。统计分析上述各指标的组间差异。结果CCK-8实验表明,Ga作用于肺腺癌细胞后,细胞出现一定的增殖抑制现象。细胞划痕实验表明,Ga作用于肺腺癌细胞后,细胞出现一定的迁移抑制现象。生化检测实验表明,Ga作用于肺腺癌细胞后,LD生成量、LDH活性及ATP生成量均出现降低现象。ELISA法表明,Ga作用于肺腺癌细胞后,实验组细胞上清液中E-cad蛋白表达量高于对照组,而N-cad蛋白表达量低于对照组。结论Ga在体外实验中可以抑制肺腺癌A549、PC9细胞的增殖、迁移能力,并且有可能系通过抑制糖酵解及上皮间质转化(EMT)途径实现。 展开更多

关键词 高良姜素 肺腺癌 增殖 迁移

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铁冬青酸对人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响 被引量：3

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作者 杨彩梅 束军 +1 位作者 郑江霞 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第11期1782-1789,共8页

目的观察铁冬青酸(RA)对人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其机制。方法以人肺腺癌A549和PC9细胞作为研究对象,分为细胞对照组、空白对照组、溶剂组和20、40、60、80μmol/L铁冬青酸实验组。使用CCK-8实验和划痕实验... 目的观察铁冬青酸(RA)对人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其机制。方法以人肺腺癌A549和PC9细胞作为研究对象,分为细胞对照组、空白对照组、溶剂组和20、40、60、80μmol/L铁冬青酸实验组。使用CCK-8实验和划痕实验分别检测人肺腺癌细胞的增殖能力和水平迁移能力;用Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验分别检测各组A549和PC9细胞的纵向迁移能力和侵袭能力;用ELISA检测各组细胞上清液中酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)和转录激活蛋白3(STAT3)的蛋白表达量,用RT-PCR法检测各组细胞中JAK2和STAT3的mRNA表达水平。分析上述各指标的组间差异。结果RA作用于肺腺癌细胞后,与对照组相比,实验组人肺腺癌A549和PC9细胞活力下降(P<0.05),肺腺癌细胞的迁移面积减少(P<0.05),穿过聚碳酸酯膜和基质胶的细胞数量均减少(P<0.05),细胞上清液中JAK2和STAT3蛋白表达量降低(P<0.05),JAK2和STAT3的mRNA表达水平降低(P<0.05),且上述指标的降低呈浓度依赖性,组间差异有统计学意义(P<0.05);对照组与溶剂组人肺腺癌A549和PC9细胞活力组间差异无统计学意义。结论RA在体外实验中对于人肺腺癌A549和PC9细胞的增殖、迁移和侵袭能力具有抑制作用,且呈一定的浓度依赖性;其作用机制可能与细胞JAK2/STAT3通路的负向调控有关。 展开更多

关键词 铁冬青酸 人肺腺癌细胞 增殖 迁移 侵袭 酪氨酸蛋白激酶2 转录激活蛋白3

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基于蛋白质组学的胸腔积液蛋白标志物筛选与验证

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作者 李志斌 束军 孟静 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第5期700-704,共5页

目的用蛋白质组学技术对比分析良、恶性胸腔积液标本,寻找蛋白标志物为其鉴别诊断提供帮助和新线索。方法采用双向电泳分离、搜寻蛋白,基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白,ELISA验证蛋白在良恶性胸腔积液样本中具体含... 目的用蛋白质组学技术对比分析良、恶性胸腔积液标本,寻找蛋白标志物为其鉴别诊断提供帮助和新线索。方法采用双向电泳分离、搜寻蛋白,基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白,ELISA验证蛋白在良恶性胸腔积液样本中具体含量。结果恶性组胶图对比良性组共显示明显差异蛋白点(上调或下调≥2倍)43个,上调9个,下调34个;对其中7个显著差异点(上调或下调≥3倍)质谱鉴定明确了具体类型;挑选显著差异点中免疫球蛋白λ(Igλ)、结合珠蛋白(Hp)进行ELISA验证,结果表明Igλ在良、恶性胸腔积液中含量差异无统计学意义,Hp含量组间差异有统计学意义(P<0.05)。进一步评估显示诊断标准为胸腔积液中Hp<389.02μg/L时,诊断恶性胸腔积液灵敏度为75.00%,特异度为52.38%。结论蛋白质组学技术的应用对胸腔积液蛋白标志物搜寻具有较大帮助,本研究搜寻到的标志物Hp对于良、恶性胸腔积液鉴别诊断具有一定价值,值得进一步研究。 展开更多

关键词 免疫球蛋白λ 结合珠蛋白 蛋白质组学 胸腔积液 诊断

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全人源化PD-L1单抗功能活性及其对人肺腺癌HCC827细胞毒性作用的研究

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作者 谢庆书 束军 +1 位作者 陈晴晴 胡思怡 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第2期176-181,共6页

目的初步探索自行研制的全人源化PD-L1单抗的功能活性及其对人肺腺癌HCC827细胞毒性作用的影响。方法利用十二烷基硫酸钠聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定阿特朱单抗及自研PD-L1单抗的纯度;以阿特朱单抗为阳性对照,酶联免疫吸附测定法(ELI... 目的初步探索自行研制的全人源化PD-L1单抗的功能活性及其对人肺腺癌HCC827细胞毒性作用的影响。方法利用十二烷基硫酸钠聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定阿特朱单抗及自研PD-L1单抗的纯度;以阿特朱单抗为阳性对照,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测该自研PD-L1单抗的结合活性和竞争性阻断活性;细胞阻断试验分别测定两抗体的细胞阻断活性;流式细胞术(FACS)测定人肺腺癌HCC827细胞表面PD-L1的表达;检测两抗体的抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)效应。结果 SDS-PAGE鉴定出高纯度阿特朱单抗及自研PD-L1单抗;ELISA法检测结果显示自研PD-L1单抗、阿特朱单抗均可与人PD-L1结合并且阻断PD-L1与PD-1结合;自研PD-L1单抗及阿特朱单抗均可以阻断两细胞表面分子PD-L1与PD-1的结合,其EC50分别为0.208 5、0.154 8μg/ml,在一定浓度上两者差异无统计学意义;FACS结果显示人肺腺癌HCC827细胞高表达PDL1分子;细胞毒性实验结果表明当效应细胞与靶细胞比值一定时,自研PD-L1单抗与阿特朱单抗对人肺腺癌HCC827细胞都有强的毒性作用。结论该自研全人源化PD-L1单抗有一定的功能活性,可通过阻断细胞表面的PD-L1与PD-1的结合而减弱T细胞受体信号,并可通过ADCC效应发挥一定的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 PD-L1单抗 阿特朱单抗 ADCC 肺癌

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苯噻啶对人肺腺癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

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作者 郑江霞 束军 +2 位作者 汪新 杨彩梅 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第8期1294-1299,1304,共7页

目的观察不同浓度苯噻啶(Pizotifen)对人肺腺癌A549和PC9细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响,并初步探究其机制。方法取对数生长期的A549和PC9细胞,分为对照组(细胞对照组为培养基直接作用于细胞,溶剂对照组为含有0.1%DMSO的培养基作用于细... 目的观察不同浓度苯噻啶(Pizotifen)对人肺腺癌A549和PC9细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响,并初步探究其机制。方法取对数生长期的A549和PC9细胞,分为对照组(细胞对照组为培养基直接作用于细胞,溶剂对照组为含有0.1%DMSO的培养基作用于细胞)和实验组(浓度分别为10、20、30、40μmol/L的苯噻啶作用于细胞)。CCK-8法检测人肺腺癌细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell迁移实验检测其迁移能力,Transwell侵袭实验检测其侵袭能力,ELISA法检测Wnt3a/β-catenin信号通路蛋白、上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。结果与溶剂对照组相比:CCK-8结果显示,实验组A549和PC9细胞活力降低,出现不同程度的增殖抑制现象,在20、30、40μmol/L浓度组有一定的时间依赖性(P<0.05);划痕实验结果表明,实验组划痕愈合率小于对照组,苯噻啶浓度越高,划痕愈合率越低(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验结果显示,实验组穿过小室的肺腺癌细胞数量明显低于对照组,具有浓度依赖性(P<0.05);ELISA结果显示,实验组细胞中Wnt3a、β-catenin、MMP-9蛋白浓度与对照组相比均显著降低,并且随着苯噻啶浓度增加,Wnt3a、β-catenin、MMP-9蛋白浓度逐渐降低(P<0.05);实验组细胞中E-cad蛋白浓度与对照组相比显著增高,并且随着苯噻啶浓度增加,E-cad浓度逐渐增高(P<0.05)。结论在体外细胞实验中,苯噻啶对人肺腺癌A549、PC9细胞的增殖、迁移和侵袭能力具有抑制作用,抑制作用的强弱依赖于苯噻啶的浓度和作用时间。其作用机制,可能包括Wnt3a/β-catenin-EMT通路的阻断。 展开更多

关键词 苯噻啶 人肺腺癌 信号通路 上皮-间质转化

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