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敏感性PCR检测猪肉弓形虫方法的建立与应用
被引量：
9
1
作者
余莉
朱新伊
+3 位作者
胡元生
张俊玲
罗庆礼
沈继龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期895-899,共5页
目的建立一种敏感快速的猪肉弓形虫PCR检测方法,并用来检测市售猪肉弓形虫的感染情况。方法采用不同数量的弓形虫模拟感染猪肉样本,分别以529 bp重复序列、B1基因、SAG1、SAG2、SAG3作为目标检测基因,对其敏感性进行评价,在此基础上运...
目的建立一种敏感快速的猪肉弓形虫PCR检测方法,并用来检测市售猪肉弓形虫的感染情况。方法采用不同数量的弓形虫模拟感染猪肉样本,分别以529 bp重复序列、B1基因、SAG1、SAG2、SAG3作为目标检测基因,对其敏感性进行评价,在此基础上运用敏感的靶标检测100份市售猪肉样本中弓形虫的感染情况。结果 529 bp重复序列的敏感性最高,用此靶标检测合肥市售猪肉,弓形虫阳性率为17%。结论 529 bp重复序列基因是一个可用于肉制品中弓形虫PCR检测的理想靶标。
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关键词
弓形虫
PCR
猪肉
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职称材料
日本血吸虫酪氨酸羟化酶基因的克隆、真核表达及鉴定
2
作者
石杜娟
徐元宏
+5 位作者
胡元生
周银娣
刘丽丽
钟政荣
罗庆礼
沈继龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1114-1117,共4页
目的扩增日本血吸虫的酪氨酸羟化酶(Schistosoma japonicumTyrosine Hydroxylase,Sj TH)编码基因,构建pcDNA3.1(+)-SjTH真核表达载体,并检测其在COS-7细胞中的表达情况。方法以日本血吸虫成虫cDNA为模板,RACE PCR扩增Sj TH编码基因,并与...
目的扩增日本血吸虫的酪氨酸羟化酶(Schistosoma japonicumTyrosine Hydroxylase,Sj TH)编码基因,构建pcDNA3.1(+)-SjTH真核表达载体,并检测其在COS-7细胞中的表达情况。方法以日本血吸虫成虫cDNA为模板,RACE PCR扩增Sj TH编码基因,并与pGEM-T连接进行亚克隆,双酶切后回收目的基因,并与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,PCR和双酶切初步鉴定后测序,纯化无内毒素重组质粒pcDNA3.1(+)-Sj TH,转染入COS-7细胞,G418筛选阳性克隆,RT-PCR和Western blot鉴定重组Sj TH蛋白的表达。结果 RACE PCR扩增出SjTH编码基因,大小约1392bp,经双酶切鉴定、测序及Blast分析鉴定重组真核质粒构建成功。脂质体介导无内毒重组真核质粒pcDNA3.1(+)-SjTH转染入COS-7细胞,G418筛选出阳性克隆,RT-PCR证实阳性单克隆细胞带有SjTH编码基因,Western blot鉴定单克隆细胞表达重组SjTH蛋白,大小约54kD。结论真核表达载体pcDNA3.1(+)-SjTH构建成功,G418筛选出阳性克隆,真核表达重组SjTH蛋白,为后续研究SjTH蛋白功能奠定基础。
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关键词
日本血吸虫
酪氨酸羟化酶
真核表达
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职称材料
题名
敏感性PCR检测猪肉弓形虫方法的建立与应用
被引量：
9
1
作者
余莉
朱新伊
胡元生
张俊玲
罗庆礼
沈继龙
机构
安徽医科大学
病原生物学教研室
安徽医科大学第三附属医院检验科
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期895-899,共5页
基金
国家自然科学基金青年基金(No.30800965)
安徽省教育厅高校自然科学基金(No.KJ2008B291)联合资助
文摘
目的建立一种敏感快速的猪肉弓形虫PCR检测方法,并用来检测市售猪肉弓形虫的感染情况。方法采用不同数量的弓形虫模拟感染猪肉样本,分别以529 bp重复序列、B1基因、SAG1、SAG2、SAG3作为目标检测基因,对其敏感性进行评价,在此基础上运用敏感的靶标检测100份市售猪肉样本中弓形虫的感染情况。结果 529 bp重复序列的敏感性最高,用此靶标检测合肥市售猪肉,弓形虫阳性率为17%。结论 529 bp重复序列基因是一个可用于肉制品中弓形虫PCR检测的理想靶标。
关键词
弓形虫
PCR
猪肉
Keywords
Toxoplasma gondii
PCR
pork
分类号
R382 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
日本血吸虫酪氨酸羟化酶基因的克隆、真核表达及鉴定
2
作者
石杜娟
徐元宏
胡元生
周银娣
刘丽丽
钟政荣
罗庆礼
沈继龙
机构
安徽医科大学
第一
附属
医院
检验
科
安徽医科大学第三附属医院检验科
安徽医科大学
人兽共患病研究所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1114-1117,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30872210)
安徽省高等学校省级自然科学基金(KJ2008B19ZC)联合资助
文摘
目的扩增日本血吸虫的酪氨酸羟化酶(Schistosoma japonicumTyrosine Hydroxylase,Sj TH)编码基因,构建pcDNA3.1(+)-SjTH真核表达载体,并检测其在COS-7细胞中的表达情况。方法以日本血吸虫成虫cDNA为模板,RACE PCR扩增Sj TH编码基因,并与pGEM-T连接进行亚克隆,双酶切后回收目的基因,并与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,PCR和双酶切初步鉴定后测序,纯化无内毒素重组质粒pcDNA3.1(+)-Sj TH,转染入COS-7细胞,G418筛选阳性克隆,RT-PCR和Western blot鉴定重组Sj TH蛋白的表达。结果 RACE PCR扩增出SjTH编码基因,大小约1392bp,经双酶切鉴定、测序及Blast分析鉴定重组真核质粒构建成功。脂质体介导无内毒重组真核质粒pcDNA3.1(+)-SjTH转染入COS-7细胞,G418筛选出阳性克隆,RT-PCR证实阳性单克隆细胞带有SjTH编码基因,Western blot鉴定单克隆细胞表达重组SjTH蛋白,大小约54kD。结论真核表达载体pcDNA3.1(+)-SjTH构建成功,G418筛选出阳性克隆,真核表达重组SjTH蛋白,为后续研究SjTH蛋白功能奠定基础。
关键词
日本血吸虫
酪氨酸羟化酶
真核表达
Keywords
Schistosoma japonicum
tyrosine hydroxylase
eukaryotic expression
分类号
R383.2 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
敏感性PCR检测猪肉弓形虫方法的建立与应用
余莉
朱新伊
胡元生
张俊玲
罗庆礼
沈继龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
日本血吸虫酪氨酸羟化酶基因的克隆、真核表达及鉴定
石杜娟
徐元宏
胡元生
周银娣
刘丽丽
钟政荣
罗庆礼
沈继龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
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