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神经干细胞原代培养及GABA能神经元的诱导分化 被引量:1
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作者 鲁明 牛朝诗 +8 位作者 傅先明 汪业汉 钱若兵 汤深凤 王林 李光武 贾雪梅 沈韶辉 黄大可 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第5期528-531,共4页
目的 探讨神经干细胞(NSC)的原代培养及γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的诱导分化、鉴定。方法 取出生1—3dSD大鼠全脑,分离、培养NSC并诱导分化了GABA能神经元,用免疫荧光染色进行鉴定。结果培养24h后,由单细胞发展成2~4细胞神经... 目的 探讨神经干细胞(NSC)的原代培养及γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的诱导分化、鉴定。方法 取出生1—3dSD大鼠全脑,分离、培养NSC并诱导分化了GABA能神经元,用免疫荧光染色进行鉴定。结果培养24h后,由单细胞发展成2~4细胞神经球,随时间延长球体增大,神经球均有Nestin阳性细胞;用含10%血清分化液分化1d后,神经球开始贴壁,伸出细长突起,部分可和周边神经球伸出的突起连接。神经球周边见大量散在贴壁的双极或多极细胞,免疫荧光染色可见NSE、GABA阳性细胞。加了分化液的实验组GABA阳性细胞分化率为(30.25±2.12)%,而对照组分化率为(1.14±.39)%。结论 成功从新生大鼠脑组织中分离、培养了NSC,并能较大比率分化GABA能神经元。 展开更多
关键词 干细胞/细胞学 神经形细胞学 细胞 培养 γ-氨 基丁酸 细胞分化
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大鼠颞叶癫痫发作后学习记忆功能障碍 被引量:7
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作者 钱若兵 傅先明 +4 位作者 牛朝诗 李光武 杨艳艳 鲁明 汪业汉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第2期122-124,共3页
目的探讨大鼠颞叶癫痫发作后学习记忆功能障碍的情况。方法建立大鼠颞叶癫痫模型,用Morris水迷宫实验评价颞叶癫痫发作后不同时间段学习记忆障碍的程度。结果大鼠颞叶癫痫发作后,定位航行实验和空间搜索实验均出现不同程度的障碍,障碍... 目的探讨大鼠颞叶癫痫发作后学习记忆功能障碍的情况。方法建立大鼠颞叶癫痫模型,用Morris水迷宫实验评价颞叶癫痫发作后不同时间段学习记忆障碍的程度。结果大鼠颞叶癫痫发作后,定位航行实验和空间搜索实验均出现不同程度的障碍,障碍程度有随着颞叶癫痫发作时间的延长而加重的趋势。结论大鼠颞叶CA3区注射红藻氨酸后诱发颞叶癫痫长期发作会出现明显的学习记忆功能障碍。 展开更多
关键词 癫痫 颞叶/化学诱导 迷宫学习 记忆障碍/并发症
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嗅球摘除昆明小鼠水迷宫和跨杆运动的改变 被引量:3
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作者 刘巧琼 赵乐章 李光武 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第4期387-391,共5页
目的探讨嗅球摘除昆明小鼠的学习记忆行为及可能机制。方法制备嗅球摘除昆明小鼠模型,采用小鼠跨杆运动实验和小鼠水迷宫实验观察其学习记忆活动的改变;应用免疫组织化学方法观察前额叶皮质、边缘系统和纹状体CHAT的表达。结果嗅球完全... 目的探讨嗅球摘除昆明小鼠的学习记忆行为及可能机制。方法制备嗅球摘除昆明小鼠模型,采用小鼠跨杆运动实验和小鼠水迷宫实验观察其学习记忆活动的改变;应用免疫组织化学方法观察前额叶皮质、边缘系统和纹状体CHAT的表达。结果嗅球完全摘除第14天昆明小鼠的游泳时间(P<0.01)和游泳错误次数(P<0.05)均较假手术组和嗅球不完全摘除组升高;嗅球完全摘除第14天小鼠的前额叶皮质、海马、内嗅区皮质、基底前脑M eynert基底核CHAT阳性神经元较假手术组数量减少,染色减弱,平均光密度值减少(P<0.01),而纹状体CHAT阳性神经元无明显改变。结论嗅球摘除昆明小鼠出现明显的陈述性学习记忆障碍,前额叶皮质、海马、内嗅区和M eynert基底核的胆碱能神经元减少,出现AD特征性的行为改变和生化改变。 展开更多
关键词 迷宫学习 记忆障碍 行为障碍 嗅球/外科学 胆碱O-乙酰转移酶 阿尔茨海默病
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GFP-ATZ在HEK 293T中的表达及其细胞毒作用 被引量:1
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作者 王海萍 王法财 沈玉先 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第6期733-736,共4页
目的构建具有绿色荧光蛋白(GFP)标签的α1抗胰蛋白酶Z突变型(ATZ)的真核表达载体,在人胚胎肾细胞(HEK293T)中验证表达情况及检测其对细胞的影响。方法以pcDNA3.1-zeo+-ATZ质粒为模版,设计引物,PCR扩增出ATZ的cDNA序列,插入真核表达载体p... 目的构建具有绿色荧光蛋白(GFP)标签的α1抗胰蛋白酶Z突变型(ATZ)的真核表达载体,在人胚胎肾细胞(HEK293T)中验证表达情况及检测其对细胞的影响。方法以pcDNA3.1-zeo+-ATZ质粒为模版,设计引物,PCR扩增出ATZ的cDNA序列,插入真核表达载体pEGFP-C1中,构建带有GFP标签的ATZ真核表达载体pEGFP-C1-ATZ,脂质体转染体外培养的HEK293T细胞,Western blot、荧光显微镜和激光共聚焦显微镜检测GFP-ATZ在细胞中的表达、分布情况及其对细胞形态和分裂的影响。结果 ATZ片段成功插入pEGFP-C1表达质粒,在表达GFP的HEK293T细胞内,绿色荧光呈弥散的全细胞分布,而表达GFP-ATZ的细胞绿色荧光分布于细胞质内;Western blot结果显示特异性条带,分子量大小与GFP-ATZ预期相符;GFP-ATZ的过度表达引起细胞出现不同程度的形态改变、分裂障碍、聚集体出现甚至死亡。结论成功构建了具有绿色荧光标记的ATZ真核表达载体,GFP-ATZ的表达具有细胞毒性。 展开更多
关键词 α1抗胰蛋白酶缺乏症/遗传学 突变基因表达 转染
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皮层电刺激对左旋多巴诱发异动症大鼠纹状体c-fos及ENK表达的影响
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作者 李芳 孙慧勤 +2 位作者 陈先文 王烈成 李光武 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期602-606,共5页
为了研究皮层电刺激对左旋多巴诱发异动症(LID)大鼠纹状体神经元c-fos及脑啡肽(ENK)表达的影响,探讨皮层-纹状体通路可塑性改变在LID发生机制中的作用,本实验制备Parkinson病(PD)和LID大鼠模型,将实验大鼠分成三组:正常对照组、PD组和LI... 为了研究皮层电刺激对左旋多巴诱发异动症(LID)大鼠纹状体神经元c-fos及脑啡肽(ENK)表达的影响,探讨皮层-纹状体通路可塑性改变在LID发生机制中的作用,本实验制备Parkinson病(PD)和LID大鼠模型,将实验大鼠分成三组:正常对照组、PD组和LID组。电刺激运动皮层后,免疫组化法检测纹状体区c-fos、ENK、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其活化形式磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的表达。结果显示:与对侧比较,皮层电刺激使各组同侧纹状体c-fos、ENK、ERK1/2、p-ERK1/2表达均增加(P<0.01);LID组c-fos(0.67±0.03)以及p-ERK1/2的表达(0.17±0.05)较PD组(0.08±0.03)和正常组(0.07±0.02)增加(P<0.05),LID组ENK(0.21±0.07)的表达和PD组(0.18±0.08)相比较无统计学差异(P>0.05),但均较正常组(0.08±0.01)增加(P<0.01);三组ERK1/2的表达无统计学差异(P>0.05),但LID组p-ERK1/2的表达(0.17±0.05)较PD组和正常组有所增加(P<0.01)。本研究结果表明,LID大鼠皮层-纹状体通路兴奋使纹状体c-fos以及p-ERK1/2表达增加,ENK的表达没有显著变化。上述结果提示皮层-纹状体通路活动增强以及p-ERK1/2表达的增加与LID的发生机制有关,而ENK在LID的发生过程中可能不发挥重要作用。 展开更多
关键词 左旋多巴 异动症 C-FOS 脑啡肽 细胞外信号调节激酶1/2 大鼠
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