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山西和天津卤虫卵的生化组分分析 被引量:3
1
作者 鲁云霞 汪渊 《生物学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期26-27,36,共3页
运用生化实验方法对来自山西运城和天津盐场的卤虫卵进行了组分的比较研究。结果表明,两地卤虫卵的粗脂含量分别为8 46%和8 83%,碘值分别为70 50和74 78,蛋白质含量分别为29 5%和32 3%,均富含18种氨基酸,其中包括8种必需氨基酸,Tm值分别... 运用生化实验方法对来自山西运城和天津盐场的卤虫卵进行了组分的比较研究。结果表明,两地卤虫卵的粗脂含量分别为8 46%和8 83%,碘值分别为70 50和74 78,蛋白质含量分别为29 5%和32 3%,均富含18种氨基酸,其中包括8种必需氨基酸,Tm值分别为70 8℃和69 3℃,GC值分别为41 24%和37 58%。结论:两地卤虫卵的生化组分有一定的地区差异。 展开更多
关键词 卤虫 粗脂 碘值 氨基酸 Tm值 成化组分 水产养殖 铒料
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安徽地区589名健康人尿中巯基物质的正常值测定 被引量:1
2
作者 王茂音 洪明光 +1 位作者 方敏 周玮 《安徽医科大学学报》 CAS 1992年第2期88-90,共3页
测定安徽不同地区共589名健康人尿中巯基物质(—SH)含量,结果:正常值为123.96±6.13mmol/L((?)±SE),中位数(M)为81.19mmol/L,正常值上限为260mmol/L。男女之间无显著差异。1~10岁年龄组最低,以后迅速上升,21~30岁年龄组达最... 测定安徽不同地区共589名健康人尿中巯基物质(—SH)含量,结果:正常值为123.96±6.13mmol/L((?)±SE),中位数(M)为81.19mmol/L,正常值上限为260mmol/L。男女之间无显著差异。1~10岁年龄组最低,以后迅速上升,21~30岁年龄组达最高值,此后基本上趋于平稳。不同职业人群中,尿中—SH含量以学生最低,农民和工人最高,工人中重工业和轻工业劳动者之间无明显差异,但脑力劳动者尿中—SH量明显低于体力劳动者。本文并对各组人群尿中—SH含量存在的差异进行了初步分析。本省不同地区人群尿中—SH含量的正常值确定,将有助于今后有关的基础和临床研究。 展开更多
关键词 尿 巯基 测定 实验室诊断
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40例颈椎病患者治疗前后尿谷胱甘肽过氧化物酶和巯基物含量的测定 被引量:8
3
作者 王玉龙 吴毅文 +2 位作者 王茂音 洪明光 方敏 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期103-104,共2页
颈椎病患者椎间盘退化,骨赘形成,压迫或刺激了周围的神经、血管和肌肉,使神经根水肿、血管痉挛、肌肉紧张。软组织发生炎症性充血、水肿等综合症状。也有资料证明,在缺血或低氧张力状态下,自由基生成增多,而清除自由基的酶活性下降。
关键词 颈椎病 尿 谷胱甘肽 过氧化物酶
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二甲双胍对2型糖尿病大鼠肝脏JNK表达的影响 被引量:8
4
作者 丁俊 章秋 +2 位作者 李芳 楚能武 鲁云霞 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期334-337,共4页
目的了解二甲双胍对伴胰岛素抵抗(IR)的2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏JNK表达的影响。方法将伴IR的T2DM大鼠随机分为对照组、模型组和二甲双胍组,治疗6周后留取肝脏标本。逆转录聚合酶链反应测定JNK mRNA在肝脏中的表达。免疫组化对肝脏进行H... 目的了解二甲双胍对伴胰岛素抵抗(IR)的2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏JNK表达的影响。方法将伴IR的T2DM大鼠随机分为对照组、模型组和二甲双胍组,治疗6周后留取肝脏标本。逆转录聚合酶链反应测定JNK mRNA在肝脏中的表达。免疫组化对肝脏进行HE染色,并对JNK、p-JNK进行半定量分析。结果①JNK mRNA,JNK、p-JNK蛋白表达量以及p-JNK/JNK比值,模型组均显著高于对照组(P<0.05);二甲双胍组较模型组下降,差异有统计学意义(P<0.05);②细胞学检查显示:模型组肝细胞肿胀、脂肪变性,存在炎细胞浸润,部分出现点、灶状坏死。二甲双胍组肝细胞病理改变明显改善。结论二甲双胍可能通过减少JNK、p-JNK表达来改善2型糖尿病引起的肝脏损害。 展开更多
关键词 2型糖尿病 胰岛素抵抗 二甲双胍 动物模型
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用尿谷胱甘肽过氧化物酶评定颈椎病的康复疗效 被引量:8
5
作者 王玉龙 吴毅文 +1 位作者 王茂音 方敏 《安徽医科大学学报》 CAS 1992年第3期171-173,共3页
测定了44例颈椎病患者康复前后尿液中谷胱甘肤过氧化物酶(GSH-Px)活力的变化。患者在治疗前,尿中GSH-Px活力为1080±310U/L((?)±s),与健康对照组相比差异有高度显著性(P<0.001)。推拿和颈牵治疗后尿中GSH—Px活力平均下降38... 测定了44例颈椎病患者康复前后尿液中谷胱甘肤过氧化物酶(GSH-Px)活力的变化。患者在治疗前,尿中GSH-Px活力为1080±310U/L((?)±s),与健康对照组相比差异有高度显著性(P<0.001)。推拿和颈牵治疗后尿中GSH—Px活力平均下降38.8%,且下降幅度和疗效之间有着明显的平行关系。据此,我们认为颈椎病的发病可能和体内自由基代谢紊乱有关,同时认为,无创伤的尿GSH—Px活力测定可以作为颈椎病康复疗效评定的客观指标,从而为颈椎病康复疗效的评定提供科学的生化依据。 展开更多
关键词 尿 谷胱甘肽 过氧化酶类 颈椎病
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兔实验性动脉粥样硬化血浆脂蛋白脂酶和肝脂酶活性的变化 被引量:3
6
作者 张葵 汪渊 +1 位作者 周青 季秀生 《安徽医科大学学报》 CAS 1993年第2期84-87,共4页
初步建立了兔肝素化血浆脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)活性的测定方法,两种脂酶活性以水解三油酸甘油酯(TG)生成游离脂肪酸(FFA)的含量表示。测得雄性日本大耳白兔肝素化后15min血浆LPL、HL活性最大,批内差异分别为4.96%、3.26%;正常兔LP... 初步建立了兔肝素化血浆脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)活性的测定方法,两种脂酶活性以水解三油酸甘油酯(TG)生成游离脂肪酸(FFA)的含量表示。测得雄性日本大耳白兔肝素化后15min血浆LPL、HL活性最大,批内差异分别为4.96%、3.26%;正常兔LPL、HL分别为12.15±4.07μmol·L^(-1)FFA/h·ml、17.11±6.80μmol·L^(-1)FFA/h·ml;实验兔喂饲胆固醇12wk形成动脉粥样硬化(AS)时LPL、HL活性分别为7.94±3.36μmol·L^(-1)FFA/h·ml、4.54±1.52μmol·L^(-1)FFA/h·ml,两者均较正常兔明显降低(P<0.005)。提示:在高胆固醇负荷时,LPL、NL活性降低可能促进了AS的形成。 展开更多
关键词 脂肪酶 动脉粥样硬化 脂蛋白
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兔血清ApoAI亚类的研究(Ⅱ兔血清ApoAI的纯化、鉴定及抗血清制备) 被引量:2
7
作者 汪渊 张葵 +1 位作者 季秀生 周青 《安徽医科大学学报》 CAS 1990年第2期89-92,共4页
超速离心制备的HDL经甲醇/氯仿法脱脂后、Sephadex G-200凝胶过滤和制备电泳得到兔血清ApoAI,经SDS-PAGE、免疫电泳证明为单一蛋白质,测得MW为26786.7±297.6u,AA组份分析与文献报道一致。以此ApoA Ⅰ作为抗原,免疫豚鼠,获得抗血清... 超速离心制备的HDL经甲醇/氯仿法脱脂后、Sephadex G-200凝胶过滤和制备电泳得到兔血清ApoAI,经SDS-PAGE、免疫电泳证明为单一蛋白质,测得MW为26786.7±297.6u,AA组份分析与文献报道一致。以此ApoA Ⅰ作为抗原,免疫豚鼠,获得抗血清。经免疫双扩散鉴定,与兔ApoAⅡ、LDL及人ApoAI无交叉反应,其效价为1:32。表明我们制备的抗血清是单价的。 展开更多
关键词 载脂蛋白AI 纯化 鉴定 电泳 抗体
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Ⅱ、Ⅳ型高脂血症患者血清apo Al、B及其比值的变化 被引量:2
8
作者 汪渊 季秀生 +5 位作者 张葵 周青 韩卫星 沈玉芳 毕敏明 戴东生 《安徽医科大学学报》 CAS 1992年第3期174-176,共3页
对31例Ⅱa型、31例Ⅱb型、153例Ⅳ型高脂血症患者及100例年龄相近的正常人血清apoAl、B及其血脂含量进行分析,结果表明,3组高脂血症患者血清apoAl水平均明显降低,apoB及apoB/apoAl比值均明显升高;Ⅱa型高脂血症患者LDL-C明显升高,HDL-C... 对31例Ⅱa型、31例Ⅱb型、153例Ⅳ型高脂血症患者及100例年龄相近的正常人血清apoAl、B及其血脂含量进行分析,结果表明,3组高脂血症患者血清apoAl水平均明显降低,apoB及apoB/apoAl比值均明显升高;Ⅱa型高脂血症患者LDL-C明显升高,HDL-C无明显变化;Ⅱb型高脂血症患者LDL-C明显升高,HDL-C明显降低;Ⅳ型高脂血症患者HDL-C明显降低,LDL-C无明显变化;3组高脂血症患者LDL-C/HDL-C比值均明显升高。提示:高脂血症可使血清致动脉粥样硬化(As)因子升高和抗As因子降低,是As的危险因素之一。 展开更多
关键词 脱辅基脂蛋白类 脂蛋白 高血脂病
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电洗脱法纯化DNA片段 被引量:7
9
作者 汪渊 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 1996年第6期566-568,共3页
电洗脱法纯化DNA片段汪渊,桂淑玉分子生物学研究方法作为一类十分有用的技术已在生物学科的各个领域得到广泛的应用。DNA片段的纯化是获得目的DNA的手段,是分子生物学的基本方法,是各种分子生物学研究方法的基础。目前,D... 电洗脱法纯化DNA片段汪渊,桂淑玉分子生物学研究方法作为一类十分有用的技术已在生物学科的各个领域得到广泛的应用。DNA片段的纯化是获得目的DNA的手段,是分子生物学的基本方法,是各种分子生物学研究方法的基础。目前,DNA片段的纯化方法众多,如电洗脱法... 展开更多
关键词 DNA片段 纯化 电洗脱法
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推拿治疗缓解疼痛的机理探讨 被引量:3
10
作者 王茂音 洪明光 方敏 《安徽医科大学学报》 CAS 1991年第4期241-245,共5页
我们测定了100例中老年腰椎间盘突出症患者推拿牵引治疗前后尿中巯基(-SH)及钾含量的变化。患者在治疗前,尿中-SH均值为776.20±33.76mmol/L,中位数(M)=515.04mmol/L;经首次治疗后,降为217.42±9.74mmol/L,M=180.92mmol/L,平均... 我们测定了100例中老年腰椎间盘突出症患者推拿牵引治疗前后尿中巯基(-SH)及钾含量的变化。患者在治疗前,尿中-SH均值为776.20±33.76mmol/L,中位数(M)=515.04mmol/L;经首次治疗后,降为217.42±9.74mmol/L,M=180.92mmol/L,平均下降62%。治疗前后尿-SH含量的差别有极显著意义(P<0.01)。治疗前尿钾均值为29.92±3.0mmol/L,M=17.65mmol/L;首次治疗后降为11.49±0.96mmol/L,M=7.58mmol/L,平均下降58%。治疗前后尿钾含量的差别有极显著意义(P<0.01)。尿中两种物质下降的幅度和疗效(疼痛缓解)之间呈现明显的平行关系,疗效越理想,-SH和K^+含量的下降越明显。病情有反复时,尿中两种物质的含量也相应回升。关于-SH和疼痛之间这种关系的发现。将为疼痛的研究提供一个崭新的内容。本文对此种关系的可能机制进行了初步推测。 展开更多
关键词 推拿 疼痛 腰椎 巯基
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鸡肌球蛋白轻链激酶在大肠杆菌中的表达 被引量:3
11
作者 汪渊 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 1997年第6期679-682,共4页
目的建立鸡肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)cDNA表达克隆。方法将MLCK功能区(自动抑制区、钙调蛋白识别区和活性催化区)的cDNA插入质粒pBKrsv中,重组质粒(pBKr... 目的建立鸡肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)cDNA表达克隆。方法将MLCK功能区(自动抑制区、钙调蛋白识别区和活性催化区)的cDNA插入质粒pBKrsv中,重组质粒(pBKrsv-MLCK)转化入大肠杆菌中并获得表达。结果Western印迹试验表明表达产物的分子量与插入片段cDNA所含信息相一致。结论所获重组克隆在体外表达。 展开更多
关键词 质粒 大肠杆菌 遗传学 MLCL
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聚合酶链反应在MLCK表达载体构建中的应用 被引量:3
12
作者 汪渊 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 1997年第5期527-529,共3页
用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)方法扩增出含有SalⅠ位点和转录起始点ATG的肌球蛋白轻链激酶(myosinLightchainki-nase,MLCK)cDNA片段,并插入质... 用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)方法扩增出含有SalⅠ位点和转录起始点ATG的肌球蛋白轻链激酶(myosinLightchainki-nase,MLCK)cDNA片段,并插入质粒pBKrsv中,构建成能在宿主细胞中表达的表达载体,并通过酶切图谱、SalⅠ位点DNA序列分析得到证实。为进一步研究MLCK的表达奠定基础。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 MLCK 基因载体 质粒 构建
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人视黄醇结合蛋白4 cDNA全长的克隆、表达和纯化 被引量:4
13
作者 孙玉秀 陈利春 +3 位作者 汪凌云 陈兵 陈冠军 鲁云霞 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期298-302,共5页
目的构建人视黄醇结合蛋白4(RBP4)cDNA全长的原核表达质粒(pET-28a(+)-hRBP4)并在大肠杆菌中高效表达。方法取成人正常肝脏组织提取总RNA,RT-PCR后的扩增产物回收,构建克隆载体pMD-RBP4,设计带酶切位点BamHⅠ和HindⅢ的引物,PCR后酶切插... 目的构建人视黄醇结合蛋白4(RBP4)cDNA全长的原核表达质粒(pET-28a(+)-hRBP4)并在大肠杆菌中高效表达。方法取成人正常肝脏组织提取总RNA,RT-PCR后的扩增产物回收,构建克隆载体pMD-RBP4,设计带酶切位点BamHⅠ和HindⅢ的引物,PCR后酶切插入pET-28a(+)中,转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,Western blot检测其特异表达,并对rhRBP4诱导表达时IPTG的浓度、时间和温度等条件进行了优化;用镍亲和层析柱进行纯化,SDS-PAGE鉴定其纯度。结果测序证实所得的hRBP4 cDNA序列与其在GenBank中的序列基本一致,重组质粒pET-28a(+)-RBP4的双酶切结果与预期大小完全一致,IPTG诱导后高效表达的蛋白质以不溶性包涵体形式存在;Western blot结果证实表达产物为RBP4。IPTG诱导的最佳浓度是0.04mmol/L,时间为6h,温度为37℃,镍亲和层析后经电泳证实其纯度可达96%。结论经诱导表达和纯化的rhRBP4可用于制备抗体和进一步研究。 展开更多
关键词 视黄醇结合蛋白质类
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视黄醇结合蛋白4在妊娠期糖尿病发病中的作用及其敲低对ERK磷酸化的影响 被引量:2
14
作者 陈冠军 鲁云霞 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第1期33-33,共1页
目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者脂肪细胞因子瘦素、视黄醇结合蛋白4(RBP4)、脂联素与炎症细胞因子白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系。制备人RBP4分子RNAi载体及真核表达载体并检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/... 目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者脂肪细胞因子瘦素、视黄醇结合蛋白4(RBP4)、脂联素与炎症细胞因子白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系。制备人RBP4分子RNAi载体及真核表达载体并检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法①选择GDM孕妇60例,正常糖耐量孕妇(NGT)44例,采用ELISA法检测两组孕妇血清中脂联素和RBP4水平,放射免疫法检测两组孕妇空腹胰岛素(FIns)、瘦素、IL-6、TNF-α的水平,葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FBG)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI),酶法检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),比色法测定游离脂肪酸(FFA)水平,计算晚孕期体重指数(BMI),并进行Pearson相关分析。②分别构建针对RBP4基因表达框5'端和3'端的干涉载体pSilencerTM4.1-RBP4-5',pSilencerTM4.1-RBP4-3'及pSecTag-RBP4真核表达载体,经测序和酶切鉴定后将干涉载体转染人LO2细胞株,RT-PCR和Western blot法确定其干涉RBP4表达的效率,选择干涉较高的载体用于后续实验。③将LO2细胞分为未转染的空白对照组、阴性对照组、转染pSecTag-RBP4质粒的RBP4高表达组和转染pSilencerTM4.1-RBP4的RBP4低表达组,Western blot检测ERK1/2的表达及磷酸化水平的改变,葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖的残留量。结果①与NGT组孕妇比较,GDM组孕妇的空腹血糖、血脂、FFA、瘦素、IL-6、TNF-α、RBP4均明显升高,脂联素水平明显下降,存在显著的炎性激活及胰岛素抵抗;HOMA-IR、RBP4、瘦素与IL-6、TNF-α呈正相关,ISI、脂联素与IL-6、TNF-α呈负相关。②构建的真核表达载体和干涉载体经酶切、测序鉴定结果正确,并有明显的高表达或干涉效果,选择pSilencerTM4.1-RBP4-5'进行干涉实验。③经Western blot分析,与空白对照组相比,各组蛋白ERK1/2的表达量均无明显变化;pSecTag-RBP4高表达组的ERK1/2的磷酸化显著下降,pSilencerTM4.1-RBP4-5'干涉组的ERK1/2的磷酸化显著上升。胰岛素刺激后pSecTag-RBP4高表达组的葡萄糖摄取明显下降,pSilencerTM4.1-RBP4-5'组的葡萄糖摄取明显增加。结论①GDM患者的炎性激活与过度分泌的脂肪细胞因子之间存在明显的正相关,可能是GDM中胰岛素抵抗发生发展的机制之一。②成功制备RBP4基因的干涉载体和应用于LO2细胞中ERK1/2的研究,为后续RBP4对MAPK信号通路的进一步研究奠定基础。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 视黄醇结合蛋白4 炎症 RNA干涉 LO2细胞 ERK1 2
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人视黄醇结合蛋白4多克隆抗血清的制备及在妊娠糖尿病中的初步应用 被引量:1
15
作者 陈利春 鲁云霞 +4 位作者 孙玉秀 方向东 叶俊良 陈磊 李朝飞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期1050-1052,共3页
目的:制备抗人视黄醇结合蛋白4(retinal binding protein4,RBP4)的多克隆抗血清并用于妊娠糖尿病(GDM)血液和胎盘的检测。方法:用自制rhRBP4蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗血清,Western blot检测特异性,ELISA法测定效价,收集20例GDM患者... 目的:制备抗人视黄醇结合蛋白4(retinal binding protein4,RBP4)的多克隆抗血清并用于妊娠糖尿病(GDM)血液和胎盘的检测。方法:用自制rhRBP4蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗血清,Western blot检测特异性,ELISA法测定效价,收集20例GDM患者和15例正常孕妇的血液和胎盘,检测RBP4的水平和分布。结果:制备的抗血清效价为1∶128000。与正常孕妇相比,GDM患者血清中RBP4水平明显升高,其分娩胎盘的滋养层细胞质和胞膜中RBP4也显著高表达。结论:制备的多克隆抗血清可初步用于GDM患者血清或组织样本中RBP4的检测,为进一步用于临床检测奠定基础。 展开更多
关键词 糖尿病 妊娠 重组人视黄醇结合蛋白4 多克隆抗血清 血清 胎盘
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恶性淋巴瘤组织中内皮细胞特异性分子-1 mRNA及其蛋白的表达 被引量:1
16
作者 倪婧 吴强 +4 位作者 吴正升 张素梅 周青 汪渊 夏瑞祥 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第5期402-404,共3页
目的探讨恶性淋巴瘤组织中内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)mRNA和蛋白的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化S-P法、原位杂交方法对58例淋巴瘤组织和10例正常淋巴结的ESM-1蛋白及mRNA进行检测。结果ESM-1蛋白及mRNA在淋巴瘤组... 目的探讨恶性淋巴瘤组织中内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)mRNA和蛋白的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化S-P法、原位杂交方法对58例淋巴瘤组织和10例正常淋巴结的ESM-1蛋白及mRNA进行检测。结果ESM-1蛋白及mRNA在淋巴瘤组织中均有表达,在血管中较少表达。结论ESM-1分子可能参与了淋巴瘤的发生发展过程。 展开更多
关键词 淋巴瘤 免疫组织化学 原位杂交
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USPIO增强MRI在兔动脉粥样硬化斑块模型的观察研究 被引量:1
17
作者 张勇 李小鹏 +2 位作者 徐智超 朱华庆 胡孝朋 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第1期66-70,共5页
目的探讨单纯高脂饮食建立兔动脉粥样硬化模型的可行性以及超小顺磁性氧化铁(USPIO)增强磁共振成像(MRI)在兔动脉粥样硬化(AS)斑块研究中的价值。方法挑选30只健康的雄性新西兰大白兔作为研究对象,使用随机分组法分为两组,其中实验组20... 目的探讨单纯高脂饮食建立兔动脉粥样硬化模型的可行性以及超小顺磁性氧化铁(USPIO)增强磁共振成像(MRI)在兔动脉粥样硬化(AS)斑块研究中的价值。方法挑选30只健康的雄性新西兰大白兔作为研究对象,使用随机分组法分为两组,其中实验组20只,对照组10只。实验组通过单纯高脂饲料饲养的方法建立兔AS模型,对照组不作其他干预。观察USPIO增强前后动脉斑块的MRI表现,与病理结果进行比较和分析。结果实验组成功建立兔AS模型,其中14例形成AS斑块,USPIO增强T2W1序列表现为斑块中央信号减低,血管壁信噪比值在96 h降低最低,较增强前信号差异有统计学意义(P<0.05),而对照组在增强前后管壁信号无变化。USPIO增强PJN 2D-TOF序列表现为管壁点状充盈缺损。病理检查显示USPIO颗粒主要沉积在内膜下。结论单纯高脂饮食可以建立兔AS模型,USPIO增强MRI能反映出兔AS斑块情况,有助于对AS病变诊断作出评估。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 磁共振成像 超微超顺磁性氧化铁 动物模型
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人PTP1B真核载体在COS-7细胞中的表达及其体外抑制剂实验 被引量:1
18
作者 张吕钊 鲁云霞 李俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第5期477-481,共5页
目的构建人蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)真核表达载体pcDNA3.1-hPTP1B并在猴肾成纤维细胞COS-7中稳定表达,分离纯化表达的重组融合蛋白,进行酶活性测定及抑制剂的初步实验。方法应用RT-PCR从2型糖尿病患者的外周血总RNA中扩增出PTP1BcDNA... 目的构建人蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)真核表达载体pcDNA3.1-hPTP1B并在猴肾成纤维细胞COS-7中稳定表达,分离纯化表达的重组融合蛋白,进行酶活性测定及抑制剂的初步实验。方法应用RT-PCR从2型糖尿病患者的外周血总RNA中扩增出PTP1BcDNA全长序列,并在基因上下游分别引入BamHⅠ、EcoRⅠ两个酶切位点,酶切后定向导入pcDNA3.1/Hismyc-B多克隆位点,构建真核表达载体pcDNA3.1-hPTP1B,转染COS-7细胞,G-418筛选2周后取细胞裂解上清液经Ni2+亲和层析柱纯化后,测定了其酶活性及小分子抑制剂钒酸钠的IC50。结果从2型糖尿病患者外周血中扩增得到1301bpPTP1BcDNA全长序列,经双酶切鉴定及测序分析,表明hPTP1B已克隆到pcD-NA3.1/Hismyc-B中。RT-PCR和免疫印迹表明转染成功。酶活性实验初步显示rhPTP1B的活性随酶浓度增加而增加,随PTP1B的特异性抑制剂钒酸钠的浓度增加而减少。结论获得具有酶活性的融合蛋白rhPTP1B,为进一步筛选其特异性抑制剂奠定基础。 展开更多
关键词 蛋白质酪氨酸磷酸酶/拮抗剂和抑制剂 COS细胞 基因表达 遗传载体
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鸡肌球蛋白轻链激酶表达载体的构建 被引量:4
19
作者 汪渊 桂淑玉 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期520-524,共5页
鸡肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在调节平滑肌细胞收缩中具有重要作用.用PCR产生构建所需的限制性内切酶SalⅠ位点,将鸡MLCKcDNA插入质粒pBKrsv中,构建成pBKrsv-MLCK,并通过酶切图谱、SalⅠ位点... 鸡肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在调节平滑肌细胞收缩中具有重要作用.用PCR产生构建所需的限制性内切酶SalⅠ位点,将鸡MLCKcDNA插入质粒pBKrsv中,构建成pBKrsv-MLCK,并通过酶切图谱、SalⅠ位点序列分析得到证实.重组质粒在大肠杆菌中获得表达. 展开更多
关键词 肌球蛋白 轻链激酶 表达载体
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兔血清apoAl亚类的研究——Ⅲ兔实验性高胆固醇血症血清apoAl、apoB的变化 被引量:1
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作者 汪渊 季秀生 +1 位作者 张葵 周青 《安徽医科大学学报》 CAS 1991年第3期172-174,共3页
喂胆固醇诱导大耳白兔形成高胆固醇血症模型,并观察其血清载脂蛋白A1(apoA1)、apoB及其比值的变化。实验结果表明:高胆固醇血症兔血清apoB含量明显升高,apoA 1/apoB比值明显降低,而apoA1与对照组比较无明显变化。提示:外源性胆固醇刺激... 喂胆固醇诱导大耳白兔形成高胆固醇血症模型,并观察其血清载脂蛋白A1(apoA1)、apoB及其比值的变化。实验结果表明:高胆固醇血症兔血清apoB含量明显升高,apoA 1/apoB比值明显降低,而apoA1与对照组比较无明显变化。提示:外源性胆固醇刺激体内含apoB脂蛋白的生成。 展开更多
关键词 脱辅基脂蛋白 高胆固醇血症
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