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IL-10调控HaCaT细胞增殖及分化的分子机制
被引量：
2
1
作者
尹雪莉
贾波
+7 位作者
刘莉
李明聪
张军
杨振
白红枚
胡伟康
张素梅
张胜权
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023年第6期890-895,共6页
目的探讨白细胞介素10(IL-10)对皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖影响和对氯化钙(CaCl 2)诱导的角质形成细胞分化标志物的表达影响及其可能的分子机制。方法以不同浓度IL-10(0、3、10、30 ng/ml)处理HaCaT细胞不同时间(0、24、48、72 h),MT...
目的探讨白细胞介素10(IL-10)对皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖影响和对氯化钙(CaCl 2)诱导的角质形成细胞分化标志物的表达影响及其可能的分子机制。方法以不同浓度IL-10(0、3、10、30 ng/ml)处理HaCaT细胞不同时间(0、24、48、72 h),MTS分析细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期;IL-10(终浓度为10 ng/ml)预处理HaCaT 1 h,加入或不加CaCl 2(终浓度为1.2 mmol/L)培养24、48、72 h,Western blot检测IL-10对HaCaT分化标志物表达影响;丝裂原蛋白激活激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)特异性抑制剂PD98059及磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT)特异性抑制剂LY294002预处理HaCaT细胞,分别提取细胞总RNA和蛋白,荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测IL-10对HaCaT细胞分化标志物(Keratin1、Keratin5、Involucrin)表达影响。结果MTS结果显示,在72 h内,IL-10(30 ng/ml和较低浓度)对HaCaT细胞增殖无影响;流式细胞分析结果提示IL-10不影响HaCaT细胞周期进程。Western blot分析显示,IL-10上调HaCaT角质形成细胞角质细胞分化标志物Involucrin表达,而对Keratin1及Keratin5没有显著的影响。机制研究分析显示,IL-10能够活化ERK1/2和AKT,增加其磷酸化水平;RT-qPCR和Western blot结果显示PD98059及LY294002部分阻断IL-10诱导的Involucrin的表达。结论IL-10在一定浓度范围内不影响HaCaT的增殖;IL-10部分通过MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径上调HaCaT分化标志物Involucrin表达。
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关键词
HACAT细胞
细胞增殖
IL-10
分化标志物
信号途径
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职称材料
丰富环境干预对小鼠梨状皮层锥体神经元兴奋性的影响
被引量：
2
2
作者
陈昌锋
陈磊
+1 位作者
江勤
尹艳艳
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2018年第6期898-902,共5页
目的探讨丰富环境干预下的小鼠梨状皮层锥体神经元兴奋性的变化特点。方法选用15日龄的C57BL/6小鼠30只,随机分为丰富环境组(EE组)15只和常规环境组(SE组)15只,EE组采用丰富环境刺激饲养3周,SE组则在正常实验室环境下饲养3周。全细胞电...
目的探讨丰富环境干预下的小鼠梨状皮层锥体神经元兴奋性的变化特点。方法选用15日龄的C57BL/6小鼠30只,随机分为丰富环境组(EE组)15只和常规环境组(SE组)15只,EE组采用丰富环境刺激饲养3周,SE组则在正常实验室环境下饲养3周。全细胞电流钳模式下记录小鼠梨状皮层锥体神经元的各电生理指标,锥体神经元的兴奋性指标包括动作电位间距(ISI)、能障(Vts-Vr)和绝对不应期(ARP)。结果与常规环境组比较,丰富环境干预下的小鼠梨状皮层神经元的ISI减小(P<0.05),Vts-Vr降低(P<0.05),ARP缩短(P<0.05)。结论丰富环境干预可提高梨状皮层锥体神经元的兴奋性,提示丰富环境可能有助于梨状皮层锥体神经元的发育成熟。
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关键词
丰富环境
梨状皮层
锥体神经元
膜片钳
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职称材料
IL28RA真核表达载体的构建和对HaCaT细胞迁移能力的影响
3
作者
尹雪莉
张胜权
张学军
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2019年第11期1776-1779,共4页
目的构建白介素28受体ɑ(IL28RA)基因的真核表达载体,并转染HaCaT细胞,观察该基因对HaCaT细胞迁移能力的影响。方法从HepG2细胞中提取总RNA,逆转录后以其cDNA为模板PCR扩增IL28RA编码片段。将其插入质粒pCMV6构建pCMV6-IL28RA重组表达体...
目的构建白介素28受体ɑ(IL28RA)基因的真核表达载体,并转染HaCaT细胞,观察该基因对HaCaT细胞迁移能力的影响。方法从HepG2细胞中提取总RNA,逆转录后以其cDNA为模板PCR扩增IL28RA编码片段。将其插入质粒pCMV6构建pCMV6-IL28RA重组表达体;重组体经酶切分析及测序鉴定,将其转染至HaCaT细胞中,经G418筛选出稳定过表达IL28RA细胞株。为检测转染效率,反转录实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR)分析转染细胞中IL28RA mRNA相对表达水平。伤口愈合实验检测过表达IL28RA对HaCaT细胞迁移能力的影响。结果IL28RA基因成功构建并在HaCaT中表达,RT-qPCR检测转染效率显示与对照细胞相比,过表达细胞中IL28RA mRNA相对表达水平显著升高。细胞伤口愈合实验检测显示与对照细胞相比,IL28RA过表达抑制HaCaT细胞迁移能力。结论IL28RA基因过表达降低HaCaT细胞迁移能力。
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关键词
IL28RA
基因重组
HACAT
迁移
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职称材料
题名
IL-10调控HaCaT细胞增殖及分化的分子机制
被引量：
2
1
作者
尹雪莉
贾波
刘莉
李明聪
张军
杨振
白红枚
胡伟康
张素梅
张胜权
机构
安徽医科大学机能实验中心
安徽医科大学
科研
实验
中心
湖北省襄阳市食品药品监督局
合肥市第二人民医院病理科
安徽医科大学
生物化学与分子生物学教研室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023年第6期890-895,共6页
基金
安徽省自然科学基金(编号:2108085MH266)
安徽省高校科学研究项目(编号:2022AH050737)
安徽医科大学博士科研资助基金(编号:XJ201939)。
文摘
目的探讨白细胞介素10(IL-10)对皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖影响和对氯化钙(CaCl 2)诱导的角质形成细胞分化标志物的表达影响及其可能的分子机制。方法以不同浓度IL-10(0、3、10、30 ng/ml)处理HaCaT细胞不同时间(0、24、48、72 h),MTS分析细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期;IL-10(终浓度为10 ng/ml)预处理HaCaT 1 h,加入或不加CaCl 2(终浓度为1.2 mmol/L)培养24、48、72 h,Western blot检测IL-10对HaCaT分化标志物表达影响;丝裂原蛋白激活激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)特异性抑制剂PD98059及磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT)特异性抑制剂LY294002预处理HaCaT细胞,分别提取细胞总RNA和蛋白,荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测IL-10对HaCaT细胞分化标志物(Keratin1、Keratin5、Involucrin)表达影响。结果MTS结果显示,在72 h内,IL-10(30 ng/ml和较低浓度)对HaCaT细胞增殖无影响;流式细胞分析结果提示IL-10不影响HaCaT细胞周期进程。Western blot分析显示,IL-10上调HaCaT角质形成细胞角质细胞分化标志物Involucrin表达,而对Keratin1及Keratin5没有显著的影响。机制研究分析显示,IL-10能够活化ERK1/2和AKT,增加其磷酸化水平;RT-qPCR和Western blot结果显示PD98059及LY294002部分阻断IL-10诱导的Involucrin的表达。结论IL-10在一定浓度范围内不影响HaCaT的增殖;IL-10部分通过MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径上调HaCaT分化标志物Involucrin表达。
关键词
HACAT细胞
细胞增殖
IL-10
分化标志物
信号途径
Keywords
HaCaT cells
cell proliferation
IL-10
differentiation markers
signaling pathways
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
丰富环境干预对小鼠梨状皮层锥体神经元兴奋性的影响
被引量：
2
2
作者
陈昌锋
陈磊
江勤
尹艳艳
机构
安徽医科大学机能实验中心
安徽医科大学
药理学教研室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2018年第6期898-902,共5页
基金
安徽省自然科学基金(编号:1508085MH186)
文摘
目的探讨丰富环境干预下的小鼠梨状皮层锥体神经元兴奋性的变化特点。方法选用15日龄的C57BL/6小鼠30只,随机分为丰富环境组(EE组)15只和常规环境组(SE组)15只,EE组采用丰富环境刺激饲养3周,SE组则在正常实验室环境下饲养3周。全细胞电流钳模式下记录小鼠梨状皮层锥体神经元的各电生理指标,锥体神经元的兴奋性指标包括动作电位间距(ISI)、能障(Vts-Vr)和绝对不应期(ARP)。结果与常规环境组比较,丰富环境干预下的小鼠梨状皮层神经元的ISI减小(P<0.05),Vts-Vr降低(P<0.05),ARP缩短(P<0.05)。结论丰富环境干预可提高梨状皮层锥体神经元的兴奋性,提示丰富环境可能有助于梨状皮层锥体神经元的发育成熟。
关键词
丰富环境
梨状皮层
锥体神经元
膜片钳
Keywords
enriched environment
piriform cortex
pyramidal neurons
patch clamp
分类号
R338.8 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
IL28RA真核表达载体的构建和对HaCaT细胞迁移能力的影响
3
作者
尹雪莉
张胜权
张学军
机构
安徽医科大学
第一附属医院皮肤科
安徽医科大学机能实验中心
安徽医科大学
生物化学与分子生物学教研室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2019年第11期1776-1779,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:81130031)
文摘
目的构建白介素28受体ɑ(IL28RA)基因的真核表达载体,并转染HaCaT细胞,观察该基因对HaCaT细胞迁移能力的影响。方法从HepG2细胞中提取总RNA,逆转录后以其cDNA为模板PCR扩增IL28RA编码片段。将其插入质粒pCMV6构建pCMV6-IL28RA重组表达体;重组体经酶切分析及测序鉴定,将其转染至HaCaT细胞中,经G418筛选出稳定过表达IL28RA细胞株。为检测转染效率,反转录实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR)分析转染细胞中IL28RA mRNA相对表达水平。伤口愈合实验检测过表达IL28RA对HaCaT细胞迁移能力的影响。结果IL28RA基因成功构建并在HaCaT中表达,RT-qPCR检测转染效率显示与对照细胞相比,过表达细胞中IL28RA mRNA相对表达水平显著升高。细胞伤口愈合实验检测显示与对照细胞相比,IL28RA过表达抑制HaCaT细胞迁移能力。结论IL28RA基因过表达降低HaCaT细胞迁移能力。
关键词
IL28RA
基因重组
HACAT
迁移
Keywords
IL28RA
recombination
HaCaT
migration
分类号
R758.63 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
IL-10调控HaCaT细胞增殖及分化的分子机制
尹雪莉
贾波
刘莉
李明聪
张军
杨振
白红枚
胡伟康
张素梅
张胜权
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023
2
在线阅读
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职称材料
2
丰富环境干预对小鼠梨状皮层锥体神经元兴奋性的影响
陈昌锋
陈磊
江勤
尹艳艳
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2018
2
在线阅读
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职称材料
3
IL28RA真核表达载体的构建和对HaCaT细胞迁移能力的影响
尹雪莉
张胜权
张学军
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2019
0
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职称材料
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