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实时定量PCR检测内质网应激相关基因方法的建立
1
作者
王夏
沈玉君
+1 位作者
徐元宏
沈玉先
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2012年第8期988-991,共4页
从人外周血白细胞中扩增目的基因片段,构建标准品质粒,应用SYBR GreenⅠ荧光染料进行实时定量PCR,检测内质网应激相关基因的拷贝数。所建立的实时定量PCR方法在起始模板量106~1013拷贝/μl范围内,荧光信号达到阈值的循环数Ct值与模板...
从人外周血白细胞中扩增目的基因片段,构建标准品质粒,应用SYBR GreenⅠ荧光染料进行实时定量PCR,检测内质网应激相关基因的拷贝数。所建立的实时定量PCR方法在起始模板量106~1013拷贝/μl范围内,荧光信号达到阈值的循环数Ct值与模板浓度线性关系良好(R2=0.991 9),是检测内质网应激相关基因有效的手段。
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关键词
实时定量PCR
SYBR
GreenⅠ
内质网应激
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职称材料
复方芪参提取物对瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad蛋白连接区的影响
被引量:
4
2
作者
黄维娟
何淑芳
+4 位作者
杨雁
周伏圣
方巧云
杨森
张学军
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010年第6期780-784,共5页
目的研究复方芪参提取物(CASE)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)内Smad蛋白连接区的影响。方法 MTT法检测CASE对新生牛血清(NBS)诱导的KFs增殖的影响;细胞免疫荧光染色法观察不同浓度(7.5、15、30mg/L)CASE对T...
目的研究复方芪参提取物(CASE)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)内Smad蛋白连接区的影响。方法 MTT法检测CASE对新生牛血清(NBS)诱导的KFs增殖的影响;细胞免疫荧光染色法观察不同浓度(7.5、15、30mg/L)CASE对TGF-β1诱导的KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化的影响;人体正常成纤维细胞(NFs)作为对照。结果 CASE(15、30、60mg/L)能够显著抑制NBS诱导的KFs的增殖,其IC50为18.90mg/L;TGF-β1能够诱导KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化,而CASE(7.5、15、30mg/L)对这两种蛋白的磷酸化均具有明显的抑制作用,而TGF-β1对NFs中Smad2L和Smad3L蛋白表达无明显影响。结论 CASE能够抑制KFs细胞的增殖,其作用机制可能与抑制Smad2连接区和Smad3连接区磷酸化有关。
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关键词
瘢痕疙瘩
成纤维细胞
转化生长因子-Β1
SMAD蛋白质类
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职称材料
题名
实时定量PCR检测内质网应激相关基因方法的建立
1
作者
王夏
沈玉君
徐元宏
沈玉先
机构
安徽医科大学
药学院
安徽医科大学
基础医学院
安徽医科大学
教育部
重要
遗传病
基因
资源
利用
重点
实验室
(
省
部
共建
)
安徽医科大学
第一附属医院检验科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2012年第8期988-991,共4页
文摘
从人外周血白细胞中扩增目的基因片段,构建标准品质粒,应用SYBR GreenⅠ荧光染料进行实时定量PCR,检测内质网应激相关基因的拷贝数。所建立的实时定量PCR方法在起始模板量106~1013拷贝/μl范围内,荧光信号达到阈值的循环数Ct值与模板浓度线性关系良好(R2=0.991 9),是检测内质网应激相关基因有效的手段。
关键词
实时定量PCR
SYBR
GreenⅠ
内质网应激
Keywords
real-time quantitative PCR; SYBR GreenⅠ; ER stress
分类号
R331 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
复方芪参提取物对瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad蛋白连接区的影响
被引量:
4
2
作者
黄维娟
何淑芳
杨雁
周伏圣
方巧云
杨森
张学军
机构
安徽医科大学
基础医学院药理教研室
安徽医科大学
皮肤病研究所
安徽医科大学
教育部
重要
遗传病
基因
资源
利用
重点
实验室
(
省
部
共建
)
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010年第6期780-784,共5页
基金
安徽省人才基金(编号:2008Z027)
安徽省教育厅自然科学(重点)基金(编号:KJ2008A30ZC)
文摘
目的研究复方芪参提取物(CASE)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)内Smad蛋白连接区的影响。方法 MTT法检测CASE对新生牛血清(NBS)诱导的KFs增殖的影响;细胞免疫荧光染色法观察不同浓度(7.5、15、30mg/L)CASE对TGF-β1诱导的KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化的影响;人体正常成纤维细胞(NFs)作为对照。结果 CASE(15、30、60mg/L)能够显著抑制NBS诱导的KFs的增殖,其IC50为18.90mg/L;TGF-β1能够诱导KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化,而CASE(7.5、15、30mg/L)对这两种蛋白的磷酸化均具有明显的抑制作用,而TGF-β1对NFs中Smad2L和Smad3L蛋白表达无明显影响。结论 CASE能够抑制KFs细胞的增殖,其作用机制可能与抑制Smad2连接区和Smad3连接区磷酸化有关。
关键词
瘢痕疙瘩
成纤维细胞
转化生长因子-Β1
SMAD蛋白质类
Keywords
keloid
fibroblasts
transforming growth factor beta 1
Smad proteins
分类号
R282.71 [医药卫生—中药学]
R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时定量PCR检测内质网应激相关基因方法的建立
王夏
沈玉君
徐元宏
沈玉先
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2012
0
在线阅读
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职称材料
2
复方芪参提取物对瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad蛋白连接区的影响
黄维娟
何淑芳
杨雁
周伏圣
方巧云
杨森
张学军
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2010
4
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0
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