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EZH2与α-SMA在风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动患者心肌组织中的表达变化研究 被引量:3
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作者 徐盛松 陶辉 +1 位作者 石开虎 丁季飞 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第12期1371-1375,共5页
目的:探讨风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动(AF)患者心肌组织中组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶EZH2与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化研究。方法:将20例风湿性心脏瓣膜病接受瓣膜置换手术患者,于体外循环前切取的右心耳组织作为研究对象,... 目的:探讨风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动(AF)患者心肌组织中组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶EZH2与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化研究。方法:将20例风湿性心脏瓣膜病接受瓣膜置换手术患者,于体外循环前切取的右心耳组织作为研究对象,分为两组:AF组(n=10)和窦性心律(SR)组(n=10),分别应用Masson染色观察心肌组织中胶原沉积情况,应用免疫组化、qRT-PCR、Western blot法检测心肌组织中EZH2与α-SMA表达变化。结果:Masson染色提示AF组与SR组相比,AF组中胶原沉积明显增多,胶原容积分数增加(P<0.05);免疫组化检测显示AF组与SR组相比,AF组EZH2与α-SMA蛋白表达增加(P<0.05)。同时,Western blot检测显示AF组与SR组相比,AF组EZH2与α-SMA蛋白表达增加(P<0.05)。qRT-PCR显示AF组与SR组相比,AF组EZH2与α-SMA mRNA表达增加(P<0.05)。结论:EZH2与α-SMA在房颤组织中高表达,提示EZH2与α-SMA可能促进风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动发生发展。 展开更多
关键词 风湿性心脏病 心房颤动 组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶EZH2 Α-SMA
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microRNA-200b下调DNMT3A的表达对SD大鼠心肌纤维化抑制作用的机制研究 被引量:7
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作者 秦润禾 陶辉 +4 位作者 倪世豪 代晨 丁季飞 施鹏 石开虎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1465-1470,共6页
目的研究微小RNA200b(miR-200b)靶向下调DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对SD大鼠心肌纤维化的影响。方法 SD大鼠构建心肌纤维化模型,HE和Masson法观察病理学改变;qRT-PCR检测miR-200b的表达;Western blot法测定α-SMA、Col1A1、DNMT3A的表... 目的研究微小RNA200b(miR-200b)靶向下调DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对SD大鼠心肌纤维化的影响。方法 SD大鼠构建心肌纤维化模型,HE和Masson法观察病理学改变;qRT-PCR检测miR-200b的表达;Western blot法测定α-SMA、Col1A1、DNMT3A的表达。提取SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),将miR-200b促进剂和抑制剂分别转染于CFs中,同时设立空白及阴性对照组。qRT-PCR检测miR-200b、DNMT3A、Col1A1和α-SMA水平;Western blot测定DNMT3A、Col1A1和α-SMA的蛋白表达;MTT法观察CFs的增殖情况。结果 HE和Masson染色结果显示,模型组SD大鼠心肌组织胶原纤维明显增多,心肌细胞排列杂乱;qRT-PCR显示miR-200b表达降低;Western blot显示,α-SMA、Col1A1、DNMT3A蛋白水平升高。体外实验qRT-PCR结果显示,α-SMA、Col1A1、DNMT3A在miR-200b促进剂组中的表达降低,miR-200b抑制剂组则相反;Western blot显示,miR-200b促进剂组中DNMT3A、Col1A1和α-SMA的表达降低,miR-200b抑制剂组结果则相反;MTT结果显示,外源性过表达miR-200b 24、48、72、96 h后,CFs增殖水平降低,而miR-200b抑制剂组结果相反。结论 miR-200b可能通过下调DNMT3A来影响CFs的活化增殖,从而改善心肌纤维化。 展开更多
关键词 miR-200b Α-SMA COL1A1 DNMT3A 心肌纤维化 心肌成纤维细胞
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DNMT3A和Hyp在ISO诱导大鼠心肌纤维化中的表达及相关性研究 被引量:6
3
作者 汪裕琪 石开虎 +6 位作者 吴君旭 徐盛松 陶辉 宣海洋 曹炜 沙纪名 占红英 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第5期606-609,共4页
目的探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)和羟脯氨酸(Hyp)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化中的表达及相关性研究。方法将40只雄性SD大鼠随机等分为正常对照组和模型组。模型组给予ISO[5 mg/kg·d)],正常对照组皮下注射给予等... 目的探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)和羟脯氨酸(Hyp)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化中的表达及相关性研究。方法将40只雄性SD大鼠随机等分为正常对照组和模型组。模型组给予ISO[5 mg/kg·d)],正常对照组皮下注射给予等量生理盐水,连续7 d后处死大鼠获取血液标本,并取心肌组织。同时,测定心重指数(HW/BW)、左心室质量指数(LVW/BW);采用ELISA法检测血清中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量;HE染色和Masson染色法观察心肌纤维化程度;Western blot法测定DNMT3A和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;紫外分光光度法测定心肌组织中Hyp的含量。结果与正常对照组比较,模型组HW/BW、LVW/BW明显增加;模型组血清标本中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量较正常对照组明显增加;HE染色和Masson染色显示模型组心肌组织出现明显的胶原纤维增生;Western blot法检测显示模型组DNMT3A和α-SMA的表达明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01);同时,紫外分光光度法检测显示模型组心肌组织中Hyp含量明显增高(P<0.05);DNMT3A和Hyp在大鼠心肌纤维化组织中的表达呈正相关(r=0.675,P<0.05)。结论 DNMT3A表达上调在心肌纤维化的形成过程中起重要促进作用,可能与Hyp升高有一定的相关性。 展开更多
关键词 心肌纤维化 DNMT3A HYP 胶原
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DNMT3A与CTGF在AAC致大鼠心肌纤维化中的表达及相关性研究 被引量:5
4
作者 杨健康 石开虎 +3 位作者 陶辉 代晨 秦润禾 占红英 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第9期1302-1305,共4页
目的探讨经腹主动脉缩窄(AAC)导致大鼠心肌纤维化中DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)与结缔组织生长因子(CTGF)的表达及相关性。方法将60只8周龄雄性SD大鼠随机分为模型组及对照组。模型组行AAC术,对照组行假手术,术后2周处死大鼠获取血液标本,... 目的探讨经腹主动脉缩窄(AAC)导致大鼠心肌纤维化中DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)与结缔组织生长因子(CTGF)的表达及相关性。方法将60只8周龄雄性SD大鼠随机分为模型组及对照组。模型组行AAC术,对照组行假手术,术后2周处死大鼠获取血液标本,并取心脏。同时测定心重指数,采用ELISA法测量Ⅰ型胶原和CTGF在心肌组织匀浆中的含量,HE和Masson染色法观察心肌组织病理学改变;Western blot法测定DNMT3A和CTGF的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠的心重指数显著上升,且心肌组织中Ⅰ型胶原和CTGF的含量明显增加;HE和Masson染色显示,模型组心肌组织呈现明显的胶原沉积;Western blot检测表明模型组DNMT3A、CTGF的含量水平明显高于对照组;DNMT3A和CTGF在大鼠心肌纤维化组织中的表达呈正相关性(r=0.64,P<0.01)。结论 DNMT3A参与心肌纤维化的形成过程,并在其中起到一定的促进作用,可能与CTGF的升高有一定的相关性。 展开更多
关键词 心肌纤维化 腹主动脉缩窄术 DNA甲基转移酶3A 结缔组织生长因子
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风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动患者中DNMT3A与Kv1.5蛋白的表达变化及相关性研究 被引量:3
5
作者 随志辉 石开虎 +6 位作者 吴君旭 徐盛松 陶辉 宣海洋 曹炜 沙纪名 占红英 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第1期105-108,共4页
目的探讨风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动(AF)患者DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)与超速延迟整流性钾通道蛋白(Kv1.5)表达水平变化及其相关性研究。方法将20例风湿性心脏瓣膜病接受瓣膜置换手术患者于体外循环前切取的右心耳组织作为研究对象,根... 目的探讨风湿性心脏瓣膜病合并心房颤动(AF)患者DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)与超速延迟整流性钾通道蛋白(Kv1.5)表达水平变化及其相关性研究。方法将20例风湿性心脏瓣膜病接受瓣膜置换手术患者于体外循环前切取的右心耳组织作为研究对象,根据AF的定义将标本分为AF组(n=10)和窦性心律(SR)组(n=10),分别应用免疫组化、Western blot法检测心房肌组织中DNMT3A和Kv1.5蛋白表达水平变化。结果免疫组化检测显示AF组与SR组相比,DNMT3A蛋白表达增加(P<0.05);而Kv1.5蛋白表达减少(P<0.05)。同时,Western blot检测显示AF组与SR组相比,DNMT3A蛋白表达增加(P<0.05),而Kv1.5蛋白表达减少(P<0.05)。相关性分析显示DNMT3A与Kv1.5之间存在一定负相关性(r=-0.64,P<0.01)。结论 DNMT3A与Kv1.5之间存在负相关性,提示DNMT3A可能参与调控Kv1.5通道蛋白的表达。 展开更多
关键词 风湿性心脏病 心房颤动 DNA甲基转移酶3A 超速延迟整流性钾通道蛋白
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LncRNA-MEG3在心肌纤维化过程中的表达变化研究
6
作者 蒋书美 施鹏 +3 位作者 王立超 王璨 徐盛松 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第9期1356-1360,共5页
目的研究LncRNA-MEG3在大鼠心肌纤维化及心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖过程中的表达变化。方法用异丙肾上腺素(ISO)腹部皮下注射SD大鼠构造心肌纤维化动物模型为实验组(ISO组),对照组注射等量的生理盐水;提取乳鼠CFs,采用转化生长因子β1... 目的研究LncRNA-MEG3在大鼠心肌纤维化及心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖过程中的表达变化。方法用异丙肾上腺素(ISO)腹部皮下注射SD大鼠构造心肌纤维化动物模型为实验组(ISO组),对照组注射等量的生理盐水;提取乳鼠CFs,采用转化生长因子β1(TGF-β1)作用CFs构建细胞水平纤维化模型为实验组(TGF-β1组),对照组为未经TGF-β1作用正常培养的CFs;HE、Masson染色观察心肌组织胶原变化;用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原分子(CollagenⅠ)蛋白的表达;qRT-PCR法检测CollagenⅠ、α-SMA mRNA和MEG3的表达;CCK-8法检测经TGF-β1作用CFs后的吸光度(OD)值。结果与对照组比较,ISO组的心肌细胞体积变大、紊乱,组织胶原面积明显增加;ISO组和TGF-β1组中CollagenⅠ、α-SMA蛋白和mRNA表达都显著增多,LncRNA-MEG3表达显著减少;CCK-8实验结果提示使用TGF-β1刺激CFs 24、48 h后较对照组的细胞OD值明显增加,即细胞增殖活性增强。结论 LncRNA-MEG3在大鼠心肌纤维化组织及CFs细胞活化增殖中的表达显著降低,提示MEG3在大鼠心肌纤维化及CFs活化增殖中可能发挥了负调控作用,为临床心肌纤维化防治和研究提供新的思路。 展开更多
关键词 LncRNA-MEG3 Α-SMA CollagenⅠ 心肌纤维化 心肌成纤维细胞
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重症心脏瓣膜病换瓣后发生低心排综合征的危险因素分析 被引量:25
7
作者 钱鹏 石开虎 +4 位作者 陶辉 代晨 秦润禾 汪裕琪 徐盛松 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第9期1436-1439,共4页
目的探讨重症心脏瓣膜病患者行瓣膜置换术后发生低心排综合征(LCOS)的相关危险因素。方法对87例重症心脏瓣膜病患者行心脏瓣膜置换术,根据术后是否发生LCOS将其分为观察组(发生LCOS)和对照组(未发生LCOS)。采用单因素分析和二分类Logis... 目的探讨重症心脏瓣膜病患者行瓣膜置换术后发生低心排综合征(LCOS)的相关危险因素。方法对87例重症心脏瓣膜病患者行心脏瓣膜置换术,根据术后是否发生LCOS将其分为观察组(发生LCOS)和对照组(未发生LCOS)。采用单因素分析和二分类Logistic回归分析对患者的临床资料进行统计分析。结果单因素分析结果显示:术前心功能Ⅳ级、术前合并肾功能不全、主动脉阻断时间>70min、失血比>20%(失血量/总血容量>20%)、高血压、体外循环时间>100 min、术前心律失常等组间差异有统计学意义(P=0.030、0.016、0.048、0.019、0.013、0.017、0.029);进一步二分类Logistic回归分析表明:患者术前心功能Ⅳ级、体外循环时间>100 min、失血比>20%、术前合并肾功能不全是术后发生LCOS的独立危险因素(P=0.035、0.030、0.019、0.014)。结论患者术前心功能Ⅳ级、体外循环时间>100 min、失血比>20%、术前合并肾功能不全为重症心脏瓣膜病患者术后发生LCOS的重要危险因素。 展开更多
关键词 重症心脏瓣膜病 瓣膜置换术 低心排综合征 危险因素
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过表达LncRNA GAS5对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响 被引量:8
8
作者 张家贵 陶辉 +4 位作者 施鹏 陈泽文 曹炜 占红英 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期328-332,共5页
目的应用长链非编码RNA GAS5(LncRNA GAS5)过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)转染SD大鼠心肌成纤维细胞,观察其对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法提取SD大鼠心肌成纤维细胞,转化生长因子β1(TGF-β1)刺激其增殖,分为pEGFP-C1-GAS5组、阴性... 目的应用长链非编码RNA GAS5(LncRNA GAS5)过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)转染SD大鼠心肌成纤维细胞,观察其对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法提取SD大鼠心肌成纤维细胞,转化生长因子β1(TGF-β1)刺激其增殖,分为pEGFP-C1-GAS5组、阴性对照组和空白对照组,应用LncRNA GAS5基因的过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)通过脂质体瞬时转染细胞,48 h后收获细胞。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测GAS5、Ⅰ型胶原前胶原(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,Western blot分析Col1A1和α-SMA蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖活力。结果 TGF-β1刺激心肌成纤维细胞后,qRT-PCR结果显示LncRNA GAS5的表达量较正常组下降(P<0.05);与阴性对照组和空白对照组比较,转染了pEG-FP-C1-GAS5的实验组,qRT-PCR结果显示实验组的GAS5表达均明显升高(P<0.05),同时α-SMA和Col1A1 mRNA表达显著降低(P<0.05);Western blot结果显示转染pEG-FP-C1-GAS5的实验组α-SMA和Col1A1蛋白表达量均明显降低(P<0.05);MTT法检测结果表明在实验组心肌成纤维细胞的增殖活力低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论过表达LncRNA GAS5可显著降低心肌成纤维细胞的增殖活力,提示GAS5有抑制心肌成纤维细胞的活化增殖的作用,为以后进一步研究提供依据。 展开更多
关键词 LncRNA GAS5 心肌成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原前胶原
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miR-369-5p对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响 被引量:5
9
作者 代晨 陶辉 +1 位作者 石开虎 徐盛松 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1693-1697,共5页
目的探讨miR-369-5p对大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)活化增殖的影响。方法差速贴壁离心法提取CFs,并于倒置相差显微镜下进行形态鉴定。分别向各组细胞瞬时转染miR-369-5p抑制物、miR-369-5p模拟物、阴性对照组(NC)24~4... 目的探讨miR-369-5p对大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)活化增殖的影响。方法差速贴壁离心法提取CFs,并于倒置相差显微镜下进行形态鉴定。分别向各组细胞瞬时转染miR-369-5p抑制物、miR-369-5p模拟物、阴性对照组(NC)24~48 h后,应用实时定量PCR检测miR-369-5p、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原前胶原A1(Col1A1)的蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖活性;Western blot测定α-SMA和Col1A1蛋白表达。结果 miR-369-5p在模拟物组CFs中表达上调;而在抑制物组中的表达下降。Western blot结果显示,α-SMA和Col1A1蛋白在模拟物组中的表达明显降低,在抑制物组中的表达明显增加。CFs瞬时转染miR-369-5p模拟物后培养48 h,CFs增殖活力明显下降,而抑制物组的CFs活力明显增强。结论 miR-369-5p表达下调能够促进CFs的活化增殖,提示miR-369-5p是心肌纤维化的可能作用靶点。 展开更多
关键词 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 miR-369-5p 增殖 Α-平滑肌肌动蛋白 COL1A1
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化学合成microRNA-29a inhibitors和mimics对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响 被引量:3
10
作者 陈泽文 陶辉 +5 位作者 周晓 施鹏 张家贵 宣海洋 占红英 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第4期493-496,共4页
目的探讨微小RNA-29a(miR-29a)inhibitors和mimics对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法取SD大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养SD大鼠心肌成纤维细胞。应用Lipofectamine^(TM)2000 Reagent分别... 目的探讨微小RNA-29a(miR-29a)inhibitors和mimics对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法取SD大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养SD大鼠心肌成纤维细胞。应用Lipofectamine^(TM)2000 Reagent分别向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染miR-29a inhibitors和miR-29a mimics 24 h和48 h后,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-29a、Ⅰ型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的RNA水平的表达,MTT法检测细胞增殖活性。结果与正常对照组和阴性对照组比较,在瞬时转染miR-29a inhibitors的心肌成纤维细胞中,miR-29a的表达水平下调;而在转染miR-29a mimics的心肌成纤维细胞中,miR-29a的表达水平上调。CoilA1在miR-29a inhibitors组中表达水平升高,而在miR-29a mimics组中则表达水平降低。α-SMA在miR-29a inhibitors组中表达水平升高,在miR-29a mimics组中则表达水平降低。瞬时转染miR-29a mimics 24、48 h后,与空白对照组和其阴性对照组相比较,心肌成纤维细胞活力明显下降;而瞬时转染miR-29a inhibitors 24、48 h后,心肌成纤维细胞活力则明显增强。结论 miR-29a mimics可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,而miR-29a inhibitors则显著提高心肌成纤维细胞的增殖活性,提示心肌纤维化的形成可能与miR-29a表达下调有关,其潜在的分子作用机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 microRNA-29a 心肌成纤维细胞 CollA1 Α-SMA quantitative real-time PCR
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靶向沉默SIRT1对乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响 被引量:5
11
作者 施鹏 陶辉 +4 位作者 张家贵 曹炜 钱鹏 占红英 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第4期471-475,共5页
目的探究沉默信息调节因子1(SIRT1)对乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响作用。方法应用转化生长因子-β1处理乳鼠原代心肌成纤维细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测SIRT1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达水平;Western ... 目的探究沉默信息调节因子1(SIRT1)对乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响作用。方法应用转化生长因子-β1处理乳鼠原代心肌成纤维细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测SIRT1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达水平;Western blot法检测SIRT1、α-SMA的蛋白表达水平;MTT法检测心肌成纤维细胞的细胞增殖活性;使用LipofectamineTM2000 Reagent向乳鼠原代心肌成纤维细胞中转染siRNA-SIRT1。结果转染siRNA-SIRT1的心肌成纤维细胞,SIRT1蛋白和mRNA表达下降,同时α-SMA蛋白和mRNA表达下降;转染siRNA-SIRT1明显抑制心肌成纤维细胞的增殖活性。结论 siRNA-SIRT1对心肌成纤维细胞增殖活性有明显抑制作用,SIRT1可能成为心脏结构重构防治的新靶点,其调控剂的应用将为心肌纤维化的防治提供新的思路和方案。 展开更多
关键词 SIRT1 心肌成纤维细胞 Α-SMA
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二叶式主动脉瓣畸形合并升主动脉扩张的外科治疗 被引量:1
12
作者 石开虎 宣海洋 +2 位作者 张飞 徐盛松 曹炜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第12期1321-1323,共3页
二叶式主动脉瓣畸形(bicuspid aortic valve,BAV)是一种常见的先天性畸形,不仅可发生主动脉瓣狭窄、关闭不全、感染性心内膜炎,而且可导致升主动脉瘤样扩张,甚至并发主动脉夹层。因此,心血管外科手术在处理主动脉瓣畸形的同时应... 二叶式主动脉瓣畸形(bicuspid aortic valve,BAV)是一种常见的先天性畸形,不仅可发生主动脉瓣狭窄、关闭不全、感染性心内膜炎,而且可导致升主动脉瘤样扩张,甚至并发主动脉夹层。因此,心血管外科手术在处理主动脉瓣畸形的同时应积极处理扩张的升主动脉。2006年1月~2010年6月,笔者对29例BAV伴升主动脉扩张患者在进行主动脉瓣置换同时行升主动脉成形或替换, 展开更多
关键词 二叶式主动脉瓣 升主动脉扩张 主动脉瓣置换 升主动脉成形术
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靶向沉默HDAC6对乳鼠心房肌成纤维细胞活化增殖的作用 被引量:1
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作者 曹炜 石开虎 +5 位作者 陶辉 施鹏 吴超 宣海洋 沙纪名 占红英 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期356-359,共4页
目的探究组蛋白去乙酰化酶(HDAC6)对乳鼠心房肌成纤维细胞活化增殖的影响作用。方法将50只乳鼠(雄性)分别提取心房肌成纤维细胞,应用Western blot法测定HDAC6和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;运用qRT-PCR技术检测HDAC6和α-SMA m... 目的探究组蛋白去乙酰化酶(HDAC6)对乳鼠心房肌成纤维细胞活化增殖的影响作用。方法将50只乳鼠(雄性)分别提取心房肌成纤维细胞,应用Western blot法测定HDAC6和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;运用qRT-PCR技术检测HDAC6和α-SMA mRNA的表达情况;MTT法检测心房肌成纤维细胞的细胞增殖活性;使用LipofectamineTM2000 Reagent向心房肌成纤维细胞中转染小干扰RNA HDAC6(siRNA-HDAC6)后观察对心房肌成纤维细胞增殖的影响。结果转染心房肌成纤维细胞siRNA-HDAC6组HDAC6和α-SMA的蛋白表达明显下降;qRT-PCR技术检测siRNA-HDAC6组中HDAC6和α-SMA的mRNA表达明显下降;转染siRNA-HDAC6明显抑制心房肌成纤维细胞的增殖活性。结论靶向沉默HDAC6可抑制心房肌成纤维细胞活化增殖,提示其在心房纤维化中可能发挥调控作用。 展开更多
关键词 心房肌成纤维细胞 HDAC6 Α-SMA
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HDAC3在H9C2细胞缺血再灌注损伤中的表达及干预机制 被引量:1
14
作者 占红英 陶辉 +4 位作者 徐盛松 曹炜 汪裕琪 施鹏 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第5期674-677,共4页
目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在大鼠H9C2心肌细胞缺血再灌注损伤中的表达及其部分机制研究。方法将H9C2细胞分为以下3组:正常对照组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+曲古霉素(TSA)组。MTT法检测细胞增殖活力;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在大鼠H9C2心肌细胞缺血再灌注损伤中的表达及其部分机制研究。方法将H9C2细胞分为以下3组:正常对照组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+曲古霉素(TSA)组。MTT法检测细胞增殖活力;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;Western blot法测定细胞内HDAC3蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测HDAC3 mRNA表达情况。结果 MTT法检测结果显示:与正常对照组比较,I/R组、I/R+TSA组抑制率均显著提高,并且I/R组显著高于I/R+TSA组;I/R组LDH活性明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组;Western blot检测显示:I/R组、I/R+TSA组HDAC3的表达明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组;实时荧光定量PCR检测I/R组、I/R+TSA组HDAC3的mRNA表达明显高于正常对照组,I/R+TSA组显著低于I/R组。结论HDAC3表达上调可能在H9C2细胞缺血再灌注损伤中起到重要作用。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 组蛋白去乙酰化酶3 H9C2细胞
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DNA甲基化转移酶3A调控心肌成纤维细胞活化过程中胶原的表达
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作者 代晨 陶辉 +1 位作者 石开虎 徐盛松 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第12期1237-1241,共5页
目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试... 目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试剂分为5组:DNMT3A组(CFs转染重组的DNMT3A基因过表达质粒)、空载体组(CFs转染p EGFP-C3空载体质粒)、DNMT3A siRNA组(CFs转染小干扰DNMT3A siRNA)、DNMT3A siRNA NC组(CFs转染DNMT3A siRNA NC空载体质粒)、空白对照组(CFs不作转染处理)。ELISA检测空白对照组、DNMT3A组、DNMT3A siRNA组细胞上清液胶原变化。qRT-PCR检测5组相关mRNA的表达,Western blot法检测除DNMT3A siRNA NC组外其余4组CFs中ColⅠ、ColⅢ和DNMT3a蛋白的表达及CCK8法检测4组细胞的增殖活性。结果 DNMT3A组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原明显高于空白对照组(P<0.05),DNMT3A siRNA组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量明显低于空白对照组(P<0.05)。DNMT3A组的ColⅠ、ColⅢ及DNMT3A表达量较空白对照组、空载体组明显升高(P<0.05),而DNMT3A siRNA组明显低于空白对照组及空载体组(P<0.05)。DNMT3A组细胞活力(2.087±0.317)明显高于空载体组(1.063±0.223)、空白对照组(1.082±0.207),差异有统计学意义(P<0.05); DNMT3A siRNA组(0.463±0.087)明显低于空载体组、空白对照组(P<0.05)。结论 DNMT3A可以促进CFs的活化增殖,并且能够增加胶原的表达,从而对心肌纤维化产生促进作用。 展开更多
关键词 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 DNA甲基化转移酶3A 增殖 ColⅠ ColⅢ
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化学合成microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响 被引量:6
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作者 张猛 陶辉 +4 位作者 陈泽文 张家贵 宣海洋 占红英 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第5期577-581,共5页
目的探究microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法应用LipofectamineTM2000Reagent向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染microRNA-21 inhibitors 24、48 h后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测microRNA-21、I型... 目的探究microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法应用LipofectamineTM2000Reagent向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染microRNA-21 inhibitors 24、48 h后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测microRNA-21、I型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;Western blot法检测Col1A1和α-SMA的表达水平;MTT法检测microRNA-21 inhibitors对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。结果转染microRNA-21 inhibitors的心肌成纤维细胞中,microRNA-21表达下调,Col1A1和α-SMA的表达下降;转染microRNA-21 inhibitors的心肌成纤维细胞增殖活性明显减弱。结论 microRNA-21 inhibitors可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,提示microRNA-21是心肌成纤维细胞活化增殖的潜在靶向分子,有利于为干预和预防心肌纤维化的发生发展提供新思路。 展开更多
关键词 MICRORNA-21 心肌成纤维细胞 COL1A1 Α-平滑肌 肌动蛋白
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IGFBP-3在大鼠心肌纤维化和心肌成纤维细胞活化增殖中的表达 被引量:5
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作者 宋剑南 陶辉 +2 位作者 丁季飞 徐盛松 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第2期263-268,共6页
目的探究胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在大鼠心肌纤维化和心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的表达变化。方法用40只SD大鼠随机等分成模型组和对照组,模型组大鼠用皮下注射异丙肾上腺素的方式建立心肌组织纤维化模型,对照组注射等... 目的探究胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在大鼠心肌纤维化和心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的表达变化。方法用40只SD大鼠随机等分成模型组和对照组,模型组大鼠用皮下注射异丙肾上腺素的方式建立心肌组织纤维化模型,对照组注射等质的生理盐水。用转化生长因子β1(TGF-β1)刺激乳鼠CFs,使其增殖活化制备细胞模型作为模型组,对照组为未经任何刺激正常培养等时长的CFs。大鼠心肌组织纤维化模型运用HE和Masson染色检测病理变化,用CCK-8测定CFs增殖活化程度,分别用qRT-PCR、Western blot检测IGFBP-3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原前胶原A1(COL1A1)的mRNA和蛋白表达情况。结果与对照组比较,动物模型组中心肌组织胶原纤维增生,心肌细胞排列紊乱,细胞模型组中加入TGF-β1刺激后CFs增殖活化明显。在动物和细胞模型组中与对照组相比,IGFBP-3、α-SMA和COL1A1的蛋白和mRNA的表达显著增高。结论IGFBP-3在纤维化心肌和加入TGF-β1刺激后的CFs中表达明显升高,提示IGFBP-3在心肌纤维化病变过程中可能存在促进或抑制作用,有助于探索心肌纤维化的病理机制。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子结合蛋白-3 心肌纤维化 心肌成纤维细胞 Ⅰ型胶原 增殖 转化生长因子β1
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HDAC8在异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化中的作用 被引量:2
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作者 支敏 陶辉 +4 位作者 陈泽文 汪裕琪 宣海洋 占红英 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第7期950-953,共4页
目的初步探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC8)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化中表达的机制。方法将40只雄性SD大鼠随机均等分为正常组和模型组。模型组给予ISO 1次/d(5 mg/kg),正常组予以等剂量生理盐水皮下注射,连续注射7 d后... 目的初步探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC8)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化中表达的机制。方法将40只雄性SD大鼠随机均等分为正常组和模型组。模型组给予ISO 1次/d(5 mg/kg),正常组予以等剂量生理盐水皮下注射,连续注射7 d后处死大鼠取血液标本,并取心肌组织。测定心脏质量指数;ELISA法检测血清中I型胶原和Ⅲ型胶原的含量;HE和Masson染色法观察心肌纤维化程度;Western blot法测定HDAC8和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达情况;qRT-PCR法检测HDAC8 mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组心脏质量指数明显增加(P<0.05);HE和Masson染色显示模型组心肌组织出现明显的胶原纤维增生;模型组血清标本中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量较正常组明显增加(P<0.05);Western blot法检测显示模型组HDAC8、α-SMA的蛋白表达明显高于正常组(P<0.05,P<0.01);qRT-PCR检测模型组HDAC8 mRNA表达明显高于正常组(P<0.05)。结论 HDAC8在心肌纤维化中高表达,而在正常心肌组织中低表达,提示其在心肌纤维化的发生发展中可能发挥作用。 展开更多
关键词 心肌纤维化 HDAC8 Α-SMA
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