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慢性间歇性低氧激活NLRP1炎性小体引起小鼠肝损伤
1
作者
余孝海
孙敏琼
+1 位作者
汪金丽
张森
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期327-332,共6页
目的 探讨慢性间歇性低氧(CIH)是否能激活含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白1(NLRP1)炎性小体引起肝损伤。方法 将C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、 CIH组。CIH组小鼠放入CIH仓进行造模(每天8 h,连续4周)。造模后,采用H...
目的 探讨慢性间歇性低氧(CIH)是否能激活含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白1(NLRP1)炎性小体引起肝损伤。方法 将C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、 CIH组。CIH组小鼠放入CIH仓进行造模(每天8 h,连续4周)。造模后,采用HE染色观察肝组织细胞形态、试剂盒检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,二氢乙啶(DHE)标记检测肝组织活性氧(ROS)的水平,免疫组织化学染色法检测小鼠肝组织NLRP1、含胱天蛋白酶激活和募集结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和胱天蛋白酶1(caspase-1)的表达和定位,Western blot法检测小鼠肝组织中NLRP1、 ASC、 caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达,ELISA检测小鼠血清IL-1β、 TNF-α水平。结果与对照组相比,CIH组肝细胞病变明显,细胞出现破裂、坏死、炎症细胞聚集,ALT、 AST、 ROS、 IL-1β和TNF-α水平显著升高;NLRP1、 ASC、caspase-1、IL-1β和TNF-α的蛋白表达升高。结论 CIH通过激活NLRP1炎性小体引起肝损伤。
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关键词
慢性间歇性低氧(CIH)
炎性小体(inflammasome)
肝损伤
活性氧(ROS)
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职称材料
ZNF300基因在肝癌耐药细胞HepG2/VCR中的表达及功能初探
被引量：
4
2
作者
李静
王涛
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期951-955,共5页
目的建立人肝癌HepG2/VCR耐药细胞株,检测ZNF300基因在HepG2/VCR中的表达并初步分析其在肝癌多药耐药(MDR)中发挥的功能。方法采用体外低浓度梯度递增的诱导方法建立长春新碱(VCR)获得性HepG2/VCR耐药细胞株。MTT法检测确定HepG2/VCR耐...
目的建立人肝癌HepG2/VCR耐药细胞株,检测ZNF300基因在HepG2/VCR中的表达并初步分析其在肝癌多药耐药(MDR)中发挥的功能。方法采用体外低浓度梯度递增的诱导方法建立长春新碱(VCR)获得性HepG2/VCR耐药细胞株。MTT法检测确定HepG2/VCR耐药细胞株对VCR的耐药性,用Western blot方法检测人锌指蛋白ZNF300基因编码的ZNF300及多药耐药基因编码的P糖蛋白(P-gp)在HepG2和HepG2/VCR细胞中的表达差异;在HepG2/VCR细胞中转染ZNF300基因正向或反向cDNA质粒后,MTT法检测VCR对耐药细胞IC50值的变化,Westernblot方法检测细胞内P-gp表达的影响。结果 MTT检测确认HepG2/VCR耐药细胞构建成功,Western blot检测发现耐药细胞中ZNF300及P-gp的表达相对于HepG2细胞明显增高。在HepG2/VCR细胞中转染正向ZNF300 cDNA质粒后,MTT和Western blot检测发现ZNF300过表达可使VCR对耐药细胞的IC50值增高,并使细胞内P-gp表达上调;在转染反向cDNA质粒Knockdown ZNF300基因表达后得到相反的结果。结论 ZNF300基因在HepG2/VCR耐药细胞中表达明显增高,并能通过上调耐药蛋白P-gp的表达促进肝癌细胞耐药性,可以作为逆转肝癌多药耐药的分子作用靶点。
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关键词
ZNF300
肝癌
多药耐药
P-糖蛋白
化疗
锌指蛋白
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职称材料
题名
慢性间歇性低氧激活NLRP1炎性小体引起小鼠肝损伤
1
作者
余孝海
孙敏琼
汪金丽
张森
机构
安徽医科大学
基础
医学院
机能
学
实验
中心
安徽
城市管理职业
学院
健康养老
学院
公共管理教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期327-332,共6页
基金
安徽高校科学研究项目(2022AH052393)
安徽医科大学校科研基金(2019xkj009)
+2 种基金
安徽省研究生教育质量工程项目(2022xscx053)
安徽城市管理职业学院校科研基金(2022zrkx007)
安徽省自然科学基金(2008085QH426)。
文摘
目的 探讨慢性间歇性低氧(CIH)是否能激活含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白1(NLRP1)炎性小体引起肝损伤。方法 将C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、 CIH组。CIH组小鼠放入CIH仓进行造模(每天8 h,连续4周)。造模后,采用HE染色观察肝组织细胞形态、试剂盒检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,二氢乙啶(DHE)标记检测肝组织活性氧(ROS)的水平,免疫组织化学染色法检测小鼠肝组织NLRP1、含胱天蛋白酶激活和募集结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和胱天蛋白酶1(caspase-1)的表达和定位,Western blot法检测小鼠肝组织中NLRP1、 ASC、 caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达,ELISA检测小鼠血清IL-1β、 TNF-α水平。结果与对照组相比,CIH组肝细胞病变明显,细胞出现破裂、坏死、炎症细胞聚集,ALT、 AST、 ROS、 IL-1β和TNF-α水平显著升高;NLRP1、 ASC、caspase-1、IL-1β和TNF-α的蛋白表达升高。结论 CIH通过激活NLRP1炎性小体引起肝损伤。
关键词
慢性间歇性低氧(CIH)
炎性小体(inflammasome)
肝损伤
活性氧(ROS)
Keywords
chronic intermittent hypoxia(CIH)
inflammasome
liver injury
reactive oxygen species(ROS)
分类号
R575.1 [医药卫生—消化系统]
R364.5 [医药卫生—病理学]
R393-33 [医药卫生—基础医学]
R364.4 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
ZNF300基因在肝癌耐药细胞HepG2/VCR中的表达及功能初探
被引量：
4
2
作者
李静
王涛
机构
安徽医科大学基础医学院机能实验中心
安徽医科大学
基础
医学院
病理生理学教研室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期951-955,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81001455)
安徽医科大学博士科研基金资助项目(No XJ200912)
文摘
目的建立人肝癌HepG2/VCR耐药细胞株,检测ZNF300基因在HepG2/VCR中的表达并初步分析其在肝癌多药耐药(MDR)中发挥的功能。方法采用体外低浓度梯度递增的诱导方法建立长春新碱(VCR)获得性HepG2/VCR耐药细胞株。MTT法检测确定HepG2/VCR耐药细胞株对VCR的耐药性,用Western blot方法检测人锌指蛋白ZNF300基因编码的ZNF300及多药耐药基因编码的P糖蛋白(P-gp)在HepG2和HepG2/VCR细胞中的表达差异;在HepG2/VCR细胞中转染ZNF300基因正向或反向cDNA质粒后,MTT法检测VCR对耐药细胞IC50值的变化,Westernblot方法检测细胞内P-gp表达的影响。结果 MTT检测确认HepG2/VCR耐药细胞构建成功,Western blot检测发现耐药细胞中ZNF300及P-gp的表达相对于HepG2细胞明显增高。在HepG2/VCR细胞中转染正向ZNF300 cDNA质粒后,MTT和Western blot检测发现ZNF300过表达可使VCR对耐药细胞的IC50值增高,并使细胞内P-gp表达上调;在转染反向cDNA质粒Knockdown ZNF300基因表达后得到相反的结果。结论 ZNF300基因在HepG2/VCR耐药细胞中表达明显增高,并能通过上调耐药蛋白P-gp的表达促进肝癌细胞耐药性,可以作为逆转肝癌多药耐药的分子作用靶点。
关键词
ZNF300
肝癌
多药耐药
P-糖蛋白
化疗
锌指蛋白
Keywords
ZNF300
hepatic cancer
multi-drug re- sistance
P-gp
chemotherapy
zinc finger protein
分类号
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
R735.705 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
慢性间歇性低氧激活NLRP1炎性小体引起小鼠肝损伤
余孝海
孙敏琼
汪金丽
张森
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
ZNF300基因在肝癌耐药细胞HepG2/VCR中的表达及功能初探
李静
王涛
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
4
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