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体外siRNA-Nav1.5干扰口腔鳞癌HSC-3细胞生物学行为研究 被引量:2
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作者 戴永铮 钱成炜 +1 位作者 徐小立 蒋勇 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第8期1227-1232,共6页
目的 探究电压门控钠离子通道(VGSC)亚型Nav1.5在口腔鳞癌细胞系和组织中的表达及小干扰RNA(siRNA)转染对HSC-3口腔鳞癌细胞的生物学行为的影响,并进一步分析其可能机制。方法 选取临床口腔鳞癌组织和正常口腔上皮组织免疫组化染色显示N... 目的 探究电压门控钠离子通道(VGSC)亚型Nav1.5在口腔鳞癌细胞系和组织中的表达及小干扰RNA(siRNA)转染对HSC-3口腔鳞癌细胞的生物学行为的影响,并进一步分析其可能机制。方法 选取临床口腔鳞癌组织和正常口腔上皮组织免疫组化染色显示Nav1.5在组织中的表达。免疫荧光激光共聚焦显示细胞内Nav1.5的表达。利用脂质体转染siRNA-Nav1.5干扰HSC-3细胞中Nav1.5的表达水平,CCK8和Transwell侵袭实验检测转染后细胞的增殖和侵袭能力。实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot验证与细胞增殖侵袭相关的蛋白:细胞增殖核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9表达变化。结果 免疫组化结果可见在口腔鳞癌组织中Nav1.5阳性表达,正常组织中未见明显表达。免疫荧光结果可见HSC-3细胞中Nav1.5阳性表达。转染siRNA-Nav1.5明显降低HSC-3细胞的增殖和侵袭能力。转染siRNA-Nav1.5的HSC-3细胞PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达降低。结论 Nav1.5可通过调控PCNA、MMP-2和MMP-9的表达促进口腔鳞癌细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 电压门控钠离子通道 NAV1.5 侵袭 增殖
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超小氧化钆点缀的介孔二氧化硅作为磁共振T_1造影剂的实验研究 被引量:4
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作者 司元纯 张桂龙 +3 位作者 王丹 吴正岩 邹多宏 陈乔尔 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第5期684-690,共7页
目的利用超小氧化钆(Gd_2O_3)改性介孔二氧化硅(SiO_2)开发出高性能的磁共振(MRI)纳米T_1造影剂,并验证其造影性能和细胞生物安全性。方法通过探讨钆(Gd)的添加量,研究SiO_2/Gd_2O_3(氧化钆点缀的二氧化硅,记为SG)比表面积和孔径的变化... 目的利用超小氧化钆(Gd_2O_3)改性介孔二氧化硅(SiO_2)开发出高性能的磁共振(MRI)纳米T_1造影剂,并验证其造影性能和细胞生物安全性。方法通过探讨钆(Gd)的添加量,研究SiO_2/Gd_2O_3(氧化钆点缀的二氧化硅,记为SG)比表面积和孔径的变化规律,获取最佳的Gd添加量;通过透射电子显微镜(TEM)、X射线能谱分析仪(EDS)、电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-OES)、3. 0 T磁共振成像仪等仪器,测量纳米复合材料形貌、磁共振性能、稳定性和生物兼容性。结果当六水合氯化钆(GdCl_3·6H_2O)添加量为0. 1 g(记为SG0. 1)时,制备的纳米复合材料具有最高的比表面积(661 cm^3/g)和孔隙率;此外TEM结果显示SG0. 1具有均一的尺寸,完整的球形,且直径约50 nm; EDS分析证实了纳米复合材料中Gd元素的存在,进一步说明Gd_2O_3被成功点缀进介孔SiO_2中;同时ICP-OES测得SG0. 1中Gd元素的质量百分比约为1. 6%;磁共振成像仪的检测结果证明SG0. 1具有超高的纵向驰豫率(45. 1 mmol^(-1)·s^(-1)),预示其超高的T_1造影性能。在pH 4. 5以上,Gd离子释放率几乎可以忽略,表明其具有较高的安全性; CCK-8实验结果表明,在SG0. 1培养牙髓干细胞(DPSCs) 24 h和48 h未见明显的细胞凋亡,预示该纳米造影剂具有良好的生物兼容性。结论成功制备出基于Gd_2O_3改性介孔SiO_2的新型磁共振T_1纳米造影剂,为其预临床研究和商业应用提供重要依据。 展开更多
关键词 氧化钆 介孔二氧化硅 磁共振成像 T1造影剂
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ephrinB2基因转染脱落乳牙来源的牙髓干细胞提高其成骨/成牙本质分化的研究 被引量:1
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作者 胡晓燕 朱绍跃 +2 位作者 徐建光 李午丽 张菁 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期564-569,共6页
目的观察促红细胞生成素肝细胞激酶受体B4/促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2 (EphB4/ephrinB2)信号通路在调控过表达ephrinB2的脱落乳牙来源牙髓干细胞(SHEDs)成骨/成牙本质分化中的作用。方法从滞留乳牙中分离出SHEDs,用hEfnB2-GFP-... 目的观察促红细胞生成素肝细胞激酶受体B4/促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2 (EphB4/ephrinB2)信号通路在调控过表达ephrinB2的脱落乳牙来源牙髓干细胞(SHEDs)成骨/成牙本质分化中的作用。方法从滞留乳牙中分离出SHEDs,用hEfnB2-GFP-Bsd载体和空载体(GFP-Bsd)转染后进行成骨/成牙本质分化诱导。用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、碱性磷酸酶实验(ALP)实验、茜素红S染色实验来检测EfnB2-SHEDs组、空载体对照组(Vector-SHEDs)的成骨分化效果,并用Western blot、免疫沉淀和免疫共沉淀试验来检测ephrinB2和EphB4磷酸化蛋白表达水平。结果 ALP实验和茜素红S染色实验证实:EfnB2-SHEDs组比Vector-SHEDs组表现出更高的ALP活性和矿化能力。RT-PCR显示:EfnB2-SHEDs组成牙本质/成骨标志物的表达明显高于Vector-SHEDs组,在成骨分化中,EphB4受体通过磷酸化被活化。结论基因转染ephrinB2能够通过刺激ephrinB2和EphB4的磷酸化来提高SHEDs的成骨/成牙本质分化。 展开更多
关键词 乳牙牙髓干细胞 EPHRINB2 基因转染 成骨分化
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抗变异链球菌卵黄抗体对变异链球菌致龋毒力因子及菌斑生物膜的影响 被引量:4
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作者 周莉莉 徐燕 +4 位作者 蒋鹏 徐涵颖 辛保见 沈继龙 程婷 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第5期448-452,共5页
目的:制备并纯化抗变异链球菌卵黄抗体(抗S.mutans-IgY),观察其对变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)胞外多糖、葡糖基转移酶活性、生物膜形成及活性的影响。方法:将甲醛灭活的S.mutans免疫150日龄白航蛋鸡4次,每次间隔10 d,取... 目的:制备并纯化抗变异链球菌卵黄抗体(抗S.mutans-IgY),观察其对变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)胞外多糖、葡糖基转移酶活性、生物膜形成及活性的影响。方法:将甲醛灭活的S.mutans免疫150日龄白航蛋鸡4次,每次间隔10 d,取鸡蛋用两步硫酸铵沉淀法提取IgY,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫后效价变化。蒽酮法测定水不溶性及水溶性胞外多糖;Neson-Somogyi法测定葡萄糖基转移酶活性;二甲氧唑黄[2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrzo lium hydroxide,XTT]还原比色法研究IgY对生物膜总量的影响;采用激光共聚焦显微镜观察牙菌斑生物膜中死菌和活菌的构成。结果:经4次免疫后抗体最高效价为1∶256000,维持40 d;IgY对S.mutans合成水不溶性胞外多糖的能力较对照组有明显抑制(P<0.01);药物作用后S.mutans还原糖、酶活力均降低(P<0.01);XTT法结果显示IgY对S.mutans生物膜抑制率为17.02%~74.13%;激光共聚焦显微镜观察到随着药液浓度增加,绿色的活菌、团块结构减少,生物膜厚度明显减小。结论:一定浓度IgY能够抑制S.mutans的增殖,具有抗龋作用。 展开更多
关键词 变异链球菌 卵黄抗体 葡糖基转移酶 水不溶性多糖 菌斑生物膜
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抗中间普氏菌卵黄抗体对大鼠妊娠期龈炎疗效的初探 被引量:4
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作者 蒋鹏 徐燕 +5 位作者 周莉莉 徐涵颖 辛保见 叶兴如 沈继龙 程婷 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第5期466-470,共5页
目的:制备和纯化抗中间普氏菌特异性卵黄免疫球蛋白(IgY),并评价其对实验性妊娠期大鼠牙龈炎的治疗作用。方法:两步硫酸铵沉淀法获得特异性IgY,将24只雌性SD大鼠随机分为4组,A组(空白组)、B组(阴性组):造模、C组:(阳性组)造模+替硝唑溶... 目的:制备和纯化抗中间普氏菌特异性卵黄免疫球蛋白(IgY),并评价其对实验性妊娠期大鼠牙龈炎的治疗作用。方法:两步硫酸铵沉淀法获得特异性IgY,将24只雌性SD大鼠随机分为4组,A组(空白组)、B组(阴性组):造模、C组:(阳性组)造模+替硝唑溶液、D组:(实验组)造模+IgY溶液,通过牙龈指数(GI)、菌斑指数(PLI)、体重变化、RT-qPCR,及组织病理学切片观察特异性IgY的治疗作用。结果:通过对大鼠实验性妊娠期牙龈炎的治疗GI、PLI(P<0.001)、体重(P<0.05)均得到改善,龈下菌斑治疗前后中间普氏菌的构成比明显降低(P<0.05)。结论:抗中间普氏菌特异性卵黄抗体可改善大鼠实验性妊娠期的牙龈炎症状况。 展开更多
关键词 中间普氏菌 牙龈炎 实时荧光定量PCR
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