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骨保护素修饰的Beagle犬骨髓基质细胞表达体系的建立与鉴定
被引量:
1
1
作者
赵春晖
操小马
梅陵宣
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期673-676,共4页
目的利用pSecTag2/B-OPG真核分泌表达穿梭载体,建立经骨保护素基因(OPG)修饰的Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)瞬时表达体系并检测其表达能力,为基因工程与组织工程联合治疗牙周病提供细胞基础。方法体外分离、培养Beagle犬BMSC,通过脂质体...
目的利用pSecTag2/B-OPG真核分泌表达穿梭载体,建立经骨保护素基因(OPG)修饰的Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)瞬时表达体系并检测其表达能力,为基因工程与组织工程联合治疗牙周病提供细胞基础。方法体外分离、培养Beagle犬BMSC,通过脂质体法将已鉴定的目的基因瞬时转染至BMSC,并用RT-PCR鉴定OPG是否有转录,同时通过Westernblot方法检测OPG在6周内的表达水平。结果重组质粒pSecTag2/B-OPG经HindⅢ单酶切及EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GeneBank中[gi:33878056]提供的序列一致;鉴定正确的重组质粒在BMSC中有转录,并且在39d内都明显有OPG表达。结论建立了骨保护素基因修饰的骨髓基质细胞瞬时表达体系。
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关键词
成骨细胞
骨髓基质细胞
基因表达
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职称材料
变链素的纯化
2
作者
杨柳
许晓芳
+2 位作者
杨佰霞
柳雯
李颂
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期565-569,共5页
目的从变异链球菌临床株中分离纯化变链素,为进一步从分子水平研究变链素奠定基础。方法通过抑菌活性检测,从变异链球菌临床株中选择出抑菌活性较强的菌株。用氯仿抽提法从该菌株培养液中粗提变链素,经固相萃取和反相高效液相色谱(RP-HP...
目的从变异链球菌临床株中分离纯化变链素,为进一步从分子水平研究变链素奠定基础。方法通过抑菌活性检测,从变异链球菌临床株中选择出抑菌活性较强的菌株。用氯仿抽提法从该菌株培养液中粗提变链素,经固相萃取和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对粗提物进行纯化。结果获得变链素活性较强的菌株1G。从其200 mL液体培养基中粗提出变链素约15μg,经固相萃取柱洗脱,再经过RP-HPLC的2次纯化,得到有抑菌活性的成分,此为纯化的变链素。结论变链素相对分子质量小,分离提纯步骤复杂,本实验得到纯化的变链素,为下一步研究变链素的氨基酸序列和基因序列奠定了基础。
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关键词
变异链球菌
变链素
反相高效液相色谱
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职称材料
题名
骨保护素修饰的Beagle犬骨髓基质细胞表达体系的建立与鉴定
被引量:
1
1
作者
赵春晖
操小马
梅陵宣
机构
安徽医科大学口腔医学院口腔内科教研室
安徽
省合肥市第二人民医院
口腔
科
出处
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期673-676,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(C03031101)
安徽省教育厅自然科学基金资助项目(2004kj219)
安徽医科大学校基金资助项目(2003zr01)
文摘
目的利用pSecTag2/B-OPG真核分泌表达穿梭载体,建立经骨保护素基因(OPG)修饰的Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)瞬时表达体系并检测其表达能力,为基因工程与组织工程联合治疗牙周病提供细胞基础。方法体外分离、培养Beagle犬BMSC,通过脂质体法将已鉴定的目的基因瞬时转染至BMSC,并用RT-PCR鉴定OPG是否有转录,同时通过Westernblot方法检测OPG在6周内的表达水平。结果重组质粒pSecTag2/B-OPG经HindⅢ单酶切及EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GeneBank中[gi:33878056]提供的序列一致;鉴定正确的重组质粒在BMSC中有转录,并且在39d内都明显有OPG表达。结论建立了骨保护素基因修饰的骨髓基质细胞瞬时表达体系。
关键词
成骨细胞
骨髓基质细胞
基因表达
Keywords
osteoblasts: bone marrow stromal cells: gene expression
分类号
R78 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
变链素的纯化
2
作者
杨柳
许晓芳
杨佰霞
柳雯
李颂
机构
安徽医科大学口腔医学院口腔内科教研室
安徽医科大学
第一附属医院检验科
出处
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期565-569,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30640074)
安徽省教育厅重点基金资助项目(KJ2007A027)
安徽医科大学博士基金资助项目(2004)
文摘
目的从变异链球菌临床株中分离纯化变链素,为进一步从分子水平研究变链素奠定基础。方法通过抑菌活性检测,从变异链球菌临床株中选择出抑菌活性较强的菌株。用氯仿抽提法从该菌株培养液中粗提变链素,经固相萃取和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对粗提物进行纯化。结果获得变链素活性较强的菌株1G。从其200 mL液体培养基中粗提出变链素约15μg,经固相萃取柱洗脱,再经过RP-HPLC的2次纯化,得到有抑菌活性的成分,此为纯化的变链素。结论变链素相对分子质量小,分离提纯步骤复杂,本实验得到纯化的变链素,为下一步研究变链素的氨基酸序列和基因序列奠定了基础。
关键词
变异链球菌
变链素
反相高效液相色谱
Keywords
Streptococcus mutans
mutacin
reversed-phase high performance liquid chromatography
分类号
R780.2 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
骨保护素修饰的Beagle犬骨髓基质细胞表达体系的建立与鉴定
赵春晖
操小马
梅陵宣
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
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职称材料
2
变链素的纯化
杨柳
许晓芳
杨佰霞
柳雯
李颂
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
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职称材料
已选择
0
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