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犬急性心肌梗死晚期再灌注对心肌Fas/FasL系统的影响及其可能的氧化应激机制 被引量:15
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作者 徐少东 马礼坤 +3 位作者 屈朝法 余华 贾雪梅 周青 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期307-310,共4页
目的:探讨急性心肌梗死晚期再灌注对心肌细胞凋亡基因Fas/FasL表达的影响及其可能的氧化应激机制。方法:18条健康成年杂种犬,按随机方法分为3组,每组6条。晚期再灌注组:结扎冠状动脉前降支6 h后再灌注6 h;持续缺血组:开胸后6 h,结扎冠... 目的:探讨急性心肌梗死晚期再灌注对心肌细胞凋亡基因Fas/FasL表达的影响及其可能的氧化应激机制。方法:18条健康成年杂种犬,按随机方法分为3组,每组6条。晚期再灌注组:结扎冠状动脉前降支6 h后再灌注6 h;持续缺血组:开胸后6 h,结扎冠状动脉前降支6 h,不行再灌注处理;对照组:冠状动脉前降支只穿线不结扎持续12 h。免疫组化法检测梗死边缘区心肌Fas和FasL蛋白表达,TUNEL法测心肌细胞凋亡指数(AI),比色法测定心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原性谷胱甘肽酶(GR)活性、丙二醛(MDA)含量等。结果:心肌Fas和FasL蛋白表达以及细胞凋亡指数在持续缺血组和晚期再灌注组明显高于对照组(分别为P<0.05,P<0.01),而且晚期再灌注组明显高于持续缺血组(P<0.05)。持续缺血组和晚期再灌注组的心肌细胞SOD活性和GR活性明显低于对照组(分别为P<0.05,P<0.01),而MDA含量均明显高于对照组(P<0.05),并且两组之间亦有显著差别(P<0.05)。结论:AM I晚期再灌注使梗死边缘区心肌细胞Fas/FasL蛋白表达以及细胞凋亡指数增加,提示晚期再灌注仍然存在再灌注损伤,其机制可能与氧化应激有关。 展开更多
关键词 心肌梗死 再灌注 FAS/FASL 氧化性应激
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二重实时PCR快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 被引量:3
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作者 王艳 叶冬青 +1 位作者 李家斌 张胜权 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期225-228,255,共5页
目的建立二重实时聚合酶链反应(duplex real-time PCR)快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。方法采用二重SYBR Green实时PCR快速检测MRSA的决定基因mecA和金葡菌的种特异性基因nuc,经熔解曲线分析鉴定产物。结果所有MRSA菌株的熔... 目的建立二重实时聚合酶链反应(duplex real-time PCR)快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。方法采用二重SYBR Green实时PCR快速检测MRSA的决定基因mecA和金葡菌的种特异性基因nuc,经熔解曲线分析鉴定产物。结果所有MRSA菌株的熔解曲线均呈现mecA、nuc基因特异性的峰,甲氧西林敏感的金葡菌仅有nuc峰,耐甲氧西林的表葡菌仅有mecA峰,甲氧西林敏感的表葡菌与其他菌种的菌株无特异峰出现;当MRSA菌浓度达102cfu/ml时就可检出。在131株金葡菌中,30.53%(40/131)耐药;二重实时PCR扩增mecA基因29.01%(38/131)阳性,nuc基因100%阳性。单引物与二重实时PCR两者阳性扩增符合率为100%。结论对mecA、nuc基因进行二重实时PCR能准确、快速地鉴定耐甲氧西林的金葡菌和凝固酶阴性的葡萄球菌。 展开更多
关键词 实时聚合酶链反应 耐甲氧西林金葡菌 MECA基因 nuc基因
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大鼠Neurogenesin-1基因真核表达载体的构建及在cos-7细胞中的表达 被引量:2
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作者 高维陆 尹宗生 +1 位作者 张胜权 张辉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第4期430-433,共4页
目的克隆大鼠海马中Neurogenesin-1(Ng1)基因片段,构建pSecTag2/HygroB-Ng1真核表达载体,并检测其在cos-7细胞中的表达,为进一步研究该基因对脊髓神经干细胞分化的影响提供实验依据。方法在无RNA酶污染的条件下提取出大鼠海马总RNA。利... 目的克隆大鼠海马中Neurogenesin-1(Ng1)基因片段,构建pSecTag2/HygroB-Ng1真核表达载体,并检测其在cos-7细胞中的表达,为进一步研究该基因对脊髓神经干细胞分化的影响提供实验依据。方法在无RNA酶污染的条件下提取出大鼠海马总RNA。利用逆转录聚合酶链反应扩增出Ng1基因片段。将该基因片段连接到真核表达载体pSecTag2/HygroB,聚合酶链反应初步筛选,双酶切鉴定后送测序。将构建成功的重组真核表达载体转染入cos-7细胞,Westernblot鉴定重组Ng1蛋白的表达。结果逆转录聚合酶链反应成功获得大鼠Ng1cDNA。随机挑选10个重组真核表达载体的克隆,聚合酶链反应筛选出阳性克隆2个,经双酶切鉴定、测序及Blast分析鉴定重组质粒构建成功。脂质体介导转染cos-7细胞48h后,Westernblot鉴定重组Ng1蛋白在cos-7细胞中的表达,在46ku处出现阳性条带。结论大鼠海马Ng1基因的真核表达载体pSecTag2/HygroB-Ng1构建成功,转染cos-7细胞后能够表达重组Ng1蛋白。 展开更多
关键词 大鼠 基因表达 遗传载体 Neurogenesin-1
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内皮型一氧化氮合酶基因疗法防治小血管吻合口血栓形成的实验研究 被引量:1
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作者 章有才 尹宗生 +1 位作者 张胜权 王伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第3期347-350,共4页
目的探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitricoxide synthase,eNOS)基因局部转基因表达对小血管吻合口血栓形成的影响。方法大鼠30只,随机分为实验组和对照组,切断大鼠双侧股动脉,行原位端端吻合,并向吻合口血管腔内注入真核表达载体... 目的探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitricoxide synthase,eNOS)基因局部转基因表达对小血管吻合口血栓形成的影响。方法大鼠30只,随机分为实验组和对照组,切断大鼠双侧股动脉,行原位端端吻合,并向吻合口血管腔内注入真核表达载体pcDNA3.0-eNOS质粒与脂质体Lipofectin 2000的混合溶液(实验组)或真核表达载体pcD-NA3.0质粒与脂质体Lipofectin 2000的混合溶液(对照组),使之在腔内滞留30min。术后d5在两组中随机各取5只大鼠,切取以吻合口为中心,长1.5cm股动脉,将其分成3等份,每份0.5cm,分别行RT-PCR、Western blotting和组织化学法检测以了解eNOS表达情况。其余大鼠于术后14d处死,切取以吻合口为中心0.5cm长血管段行病理形态学检测。结果试验组RT-PCR在591bp处出现明显条带;Western blotting检测试验组eNOS含量分别为0.517±0.140,明显高于对照组0.248±0.062.;组织化学法检测试验组一氧化氮(nitric oxide,NO)含量(7.6±0.3)μmol/L,明显高于对照组(2.4±0.2)μmol/L。实验组吻合口血栓出现率明显低于对照组(P<0.01)。结论脂质体介导的携带eNOS基因的真核表达载体可以在小血管吻合口中成功表达,并且能有效地防止小血管吻合口血栓的形成。 展开更多
关键词 基因疗法 血栓栓塞/预防和控制
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兔缺血预适应心肌中环氧化酶-2的表达及阿司匹林的影响作用
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作者 解玉泉 陈大年 +6 位作者 王邦宁 沈玉芳 黄其植 周青 汪渊 吴正升 吴强 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第1期46-49,共4页
 目的 观察兔晚期缺血预适应 (DPC)心肌中环氧化酶 2(COX 2)的表达量以及不同剂量阿司匹林对其影响。方法 新西兰兔 32只,随机分为 4组,DPC组(A组,n=8);正常对照组 (B组,n=8 );小剂量阿司匹林 ( 10mg/kg) +DPC组(C组,n=8);大剂量阿...  目的 观察兔晚期缺血预适应 (DPC)心肌中环氧化酶 2(COX 2)的表达量以及不同剂量阿司匹林对其影响。方法 新西兰兔 32只,随机分为 4组,DPC组(A组,n=8);正常对照组 (B组,n=8 );小剂量阿司匹林 ( 10mg/kg) +DPC组(C组,n=8);大剂量阿司匹林 (20mg/kg) +DPC组(D组,n=8)。结扎兔冠状动脉左前降支建立缺血预适应模型, 24h后取心肌组织,使用Western blotting及免疫组化方法分别测定兔DPC心肌中COX 2的表达。结果 兔DPC心肌COX 2表达量比对照组明显上升,差异有显著性 (P<0 01);实验前分别给予小、大剂量阿司匹林对COX 2表达量影响较小,差异无显著性(P>0 05)。结论 兔DPC心肌中COX 2明显表达,缺血预适应分别前予小、大剂量阿司匹林对COX 2表达量影响较小。 展开更多
关键词 缺血处理 氧化还原酶类
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