维甲酸类衍生物诱导K562细胞分化的活性筛选 被引量：10

1

作者 徐佼 陈飞虎 +5 位作者 阮晶晶 沈娟 石静波 吴繁荣 程昌斌 汪渊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第5期598-602,共5页

目的探讨维甲酸类衍生物对白血病细胞株K562细胞的抑制增殖和诱导分化活性,以寻找新的具有抗瘤活性的药物。方法在体外通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验法检测其对细胞生长抑制的作用;瑞氏染色法观察细胞形态学改变;硝基四唑氮蓝(NBT)还原... 目的探讨维甲酸类衍生物对白血病细胞株K562细胞的抑制增殖和诱导分化活性,以寻找新的具有抗瘤活性的药物。方法在体外通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验法检测其对细胞生长抑制的作用;瑞氏染色法观察细胞形态学改变;硝基四唑氮蓝(NBT)还原实验法分析细胞的分化指标;利用流式细胞术检测细胞表面分化抗原及细胞周期的变化情况。结果维甲酸类衍生物作用3 d后,细胞增殖抑制率最高可达到57.74%,IC50为2.82E-05;油镜下观察发现细胞形态学趋向成熟,NBT还原实验也表明维甲酸类衍生物具有诱导K562细胞株分化成熟的作用;细胞周期分析显示细胞表面分化抗原CD11b表达量增加,G0/G1期细胞增加,而S期减少。结论维甲酸类衍生物对K562细胞具有诱导分化并对其克隆生长有抑制作用,其中以2a-03、4a-01、4a-02和5a-02的作用较为突出,进一步研究开发有一定的价值。 展开更多

关键词 维甲酸/类似物和衍生物/药理学 白血病/药物疗法 细胞分化/药物作用

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人内皮细胞特异性分子-1的转染及其在ECV304中的表达 被引量：1

2

作者 陈厚早 卜丽佳 +4 位作者 张素梅 吴强 周青 桂淑玉 汪渊 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第2期93-96,共4页

目的　构建人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)真核表达载体 ,转染人脐静脉内皮细胞系ECV30 4 ,并在ECV30 4中获得表达。方法　将ESM 1cDNA插入真核载体pIRES的多克隆位点中 ,转染人脐静脉内皮细胞。原位杂交 ,免疫组化检测ESM 1基因的表... 目的　构建人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)真核表达载体 ,转染人脐静脉内皮细胞系ECV30 4 ,并在ECV30 4中获得表达。方法　将ESM 1cDNA插入真核载体pIRES的多克隆位点中 ,转染人脐静脉内皮细胞。原位杂交 ,免疫组化检测ESM 1基因的表达。结果　构建的表达载体经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列分析证实 ,转染后发现ESM 1的表达在转录和蛋白水平都明显的增加。结论　成功构建了人ESM 1真核表达载体和转染了人脐静脉内皮细胞系ECV30 4 ,并获得高水平的表达 ,为进一步研究作好准备。 展开更多

关键词 人内皮细胞特异性分子-1 转染 ECV304 表达 基因表达

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依曲替酸衍生物的合成及抗肿瘤活性研究 被引量：1

3

作者 王璐 陈飞虎 +3 位作者 石静波 洪凡青 徐佼 汪渊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第5期638-642,共5页

目的合成依曲替酸酯及酰胺衍生物,以寻找新的具有抗肿瘤活性的药物。方法以依曲替酸和三氟甲苯衍生物为原料,合成一系列依曲替酸酯及酰胺衍生物。在体外通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验法检测其对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4生长抑制的... 目的合成依曲替酸酯及酰胺衍生物,以寻找新的具有抗肿瘤活性的药物。方法以依曲替酸和三氟甲苯衍生物为原料,合成一系列依曲替酸酯及酰胺衍生物。在体外通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验法检测其对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4生长抑制的作用;利用流式细胞术检测细胞周期的变化情况。结果制备出依曲替酸酯及酰胺衍生物并通过1H-NMR、13C-NMR和HR-MS确认结构。MTT结果显示部分化合物对NB4细胞增殖的抑制作用较为明显;细胞周期分析显示G0/G1期细胞增加,而S期减少。结论初步的药理实验结果显示将依曲替酸通过酯键和酰胺键与三氟甲苯衍生物连接起来能增强其对NB4细胞的诱导分化作用。 展开更多

关键词 维甲酸/类似物和衍生物/药理学 白血病 肿瘤/药物疗法 细胞分化/药物作用

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大鼠肝纤维化中PDGF和TGF-β_1的动态改变 被引量：19

4

作者 吴强 宋少刚 +3 位作者 杨枫 杨雁 汪渊 陈敏珠 《安徽医科大学学报》 CAS 2003年第5期340-342,共3页

目的　探讨肝纤维化过程中血小板衍生生长因子(PDGF)和转化生长因子 (TGF β1)表达的动态变化。方法　采用CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型 ,分别于造模的第 3、7、10周末处死动物 ,取肝组织石蜡包埋 ,制作组织芯片 ,免疫组织化学SP法检测P... 目的　探讨肝纤维化过程中血小板衍生生长因子(PDGF)和转化生长因子 (TGF β1)表达的动态变化。方法　采用CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型 ,分别于造模的第 3、7、10周末处死动物 ,取肝组织石蜡包埋 ,制作组织芯片 ,免疫组织化学SP法检测PDGF、TGF β1的改变。结果　正常肝组织不表达或微弱表达PDGF、TGF β1,纤维化的肝组织PDGF、TGF β1表达明显增强 ,并随肝纤维化时间的延长而增强 (P <0 0 5 ) ,第 7、10周间表达差异无显著性。两者的表达呈正相关。结论　PDGF和TGF 展开更多

关键词 肝纤维化 血小板衍生生长因子 转化生长因子 大鼠 免疫组织化学

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DNA印迹试验 被引量：4

5

作者 汪渊 左艳 +6 位作者 左莉 刘虎 张素梅 熊江霞 卜丽佳 周青 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第2期194-196,共3页

关键词 印迹试验 Southem杂交 DNA片段 琼脂糖凝胶电泳 固相支持物 基因组DNA 硝酸纤维素膜 DNA印迹 限制内切酶 靶DNA 电泳分离 扩增片段 分子大小 PCR 尼龙膜 转移

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小鼠血吸虫病肝组织中ESM-1的表达及黄芪总苷对其影响 被引量：5

6

作者 张岩平 吴强 +4 位作者 丁向东 左莉 张晴 王红群 汪渊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第3期283-287,共5页

目的观察小鼠血吸虫病肝组织中内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)的变化及黄芪总苷(AST)对其影响。方法ICR小鼠120只随机分为AST高剂量(20mg/kg.d-1)组,AST低剂量(10mg/kg.d-1)组,阳性药(护肝片,540mg/kg.d-1)组、模型对照组,每只实验小鼠感... 目的观察小鼠血吸虫病肝组织中内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)的变化及黄芪总苷(AST)对其影响。方法ICR小鼠120只随机分为AST高剂量(20mg/kg.d-1)组,AST低剂量(10mg/kg.d-1)组,阳性药(护肝片,540mg/kg.d-1)组、模型对照组,每只实验小鼠感染血吸虫尾蚴30条,均于感染40d后以吡喹酮(500mg/kg.d-1)治疗2d。同时设30只小鼠为正常对照组。分别于感染后6、10和14周末,每组随机处死10只小鼠,取肝脏组织作常规病理学检测并制作组织芯片,采用免疫组织化学和原位分子杂交技术检测ESM-1mRNA及蛋白。结果①抗ESM-1蛋白抗体在血吸虫肝病组织中的炎细胞、成纤维细胞、胆管上皮细胞、血管内皮细胞、肝细胞均呈不同程度的阳性反应,ESM-1mR-NA主要在炎细胞、胆管上皮细胞、血管内皮细胞和肝细胞表达,成纤维细胞未检测出ESM-1mRNA;②10周和14周末AST两个剂量组ESM-1的蛋白水平低于模型组(P<0.01),10周末AST高、低剂量组ESM-1mRNA阳性细胞计数低于模型组(P<0.01)。结论小鼠血吸虫病肝组织中,炎细胞可产生ESM-1,成纤维细胞可能存在ESM-1受体。ESM-1可能通过旁分泌作用参与血吸虫肝纤维化过程,黄芪总苷对ESM-1的抑制作用可能是其抗纤维化的机制之一。 展开更多

关键词 血吸虫 日本 肝硬化 黄芪苷/药理学 内皮细胞 基因表达

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成人急性淋巴细胞白血病巯嘌呤甲基转移酶基因多态性研究 被引量：3

7

作者 葛健 夏瑞祥 +5 位作者 卜丽佳 左艳 左莉 周青 汪渊 曾庆曙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第2期185-188,共4页

目的研究我国成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者及健康汉族人群巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因多态性。方法从78例成人ALL患者和154例健康汉族人外周血提取白细胞基因组DNA,采用等位基因特异性PCR(ASPCR)和PCR结合限制性片断长度多态性(PCRR... 目的研究我国成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者及健康汉族人群巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因多态性。方法从78例成人ALL患者和154例健康汉族人外周血提取白细胞基因组DNA,采用等位基因特异性PCR(ASPCR)和PCR结合限制性片断长度多态性(PCRRFLP)技术对TPMT2、TPMT3A、TPMT3B和TPMT3C的等位基因频率进行分析。结果在成人ALL患者和健康汉族人中仅检测到6例TPMT3C杂合子,没有检到TPMT2、TPMT3A和TPMT3B。成人ALL患者TPMT总的突变型等位基因频率(1.28%)与健康汉族人群(1.30%)相近。结论TPMT3C可能是中国成人ALL和健康汉族人群最主要的突变型等位基因,预先检测TPMT基因型对使用巯嘌呤类药物治疗的中国成人ALL患者有临床裨益。 展开更多

关键词 白血病 淋巴细胞 急性/遗传学 甲基转移酶类 巯嘌呤 多态现象(遗传学)

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重组蛋白在原核细胞中的表达 被引量：4

8

作者 汪渊 任传利 +6 位作者 王雪 张素梅 储兵 卜丽佳 谢斌 周青 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第5期407-409,共3页

关键词 重组蛋白质类 原核细胞

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核酸探针的制备 被引量：1

9

作者 汪渊 张孝林 +5 位作者 张素梅 任传利 熊江霞 卜丽佳 周青 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第1期95-96,共2页

关键词 人内皮细胞 肾癌 地高辛 特异性 核酸探针 基因 CDNA探针 随机引物 MRNA转录 分子

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LPS对人脐静脉内皮细胞增殖和ESM-1表达的影响 被引量：1

10

作者 卜丽佳 左莉 +4 位作者 任传利 张素梅 周青 桂淑玉 汪渊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第1期7-9,共3页

目的探讨LPS对人脐静脉内皮细胞(ECV304)的生长和内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell-specific molecule-1,ESM-1)表达的影响.方法在体外,用1 ml/L和5 ml/L的LPS在不同时间作用于ECV304,观察细胞形态的变化,用MTT法和免疫细胞化学... 目的探讨LPS对人脐静脉内皮细胞(ECV304)的生长和内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell-specific molecule-1,ESM-1)表达的影响.方法在体外,用1 ml/L和5 ml/L的LPS在不同时间作用于ECV304,观察细胞形态的变化,用MTT法和免疫细胞化学方法对细胞增殖和ESM-1、ERK、p-ERK在细胞中的表达.结果 LPS作用于ECV304 24 h后,细胞形态发生变化,梭形明显,排列紊乱.短时间内(0.5、1 h)LPS对ECV304有增殖作用.LPS可快速促进ESM-1的表达,在0.5、1 h时表达量较高.LPS作用后,ERK的表达无明显变化,但在一段时间(0.5～4 h)内ERK的磷酸化明显增加.结论 LPS对ECV304中ESM-1的表达有促进作用.推测ESM-1可能作为一种细胞因子与LPS在炎症反应中发挥着作用. 展开更多

关键词 LPS 表达量 ERK 人脐静脉内皮细胞 ECV304 细胞形态 增殖作用 磷酸化 免疫细胞化学方法 变化

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真核细胞阳性细胞克隆的筛选与鉴定

11

作者 汪渊 卜丽佳 +4 位作者 陈厚早 张素梅 左莉 周青 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第6期486-489,共4页

关键词 真核细胞 克隆细胞

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