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MiR140-5p在HepG2细胞中对对氧磷酶1表达的调控及其临床应用
被引量：
5
1
作者
刘佳星
王冰
+3 位作者
邢继成
何玉杰
杨爱珍
邱红
《临床检验杂志》
CAS
2019年第2期137-141,共5页
目的探讨微小RNA(miRNA)对对氧磷酶1(paraoxonase 1,PON1)表达的影响及其在非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)患者中的临床应用价值。方法采用生物信息学方法对PON1相关调控miRNA进行预测分析;构建PON1荧光素酶报...
目的探讨微小RNA(miRNA)对对氧磷酶1(paraoxonase 1,PON1)表达的影响及其在非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)患者中的临床应用价值。方法采用生物信息学方法对PON1相关调控miRNA进行预测分析;构建PON1荧光素酶报告基因载体,分析双荧光素酶活性;在HepG2细胞中上/下调miRNA水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组miRNA的表达情况,并采用western blot检测HepG2细胞中PON1蛋白的表达水平;采用qRT-PCR分析健康人群和NASH患者血清中miR140-5p的水平。结果 Target Scan数据库预测到miR140-5p能与PON13'-UTR端互补结合。双荧光素酶报告基因活性分析显示,miR-140-5p模拟物对PON1野生型载体的报告荧光有明显的下调作用(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,与正常细胞对照组、模拟物阴性对照组相比,miR-140-5p模拟物组均呈现出过表达(P<0.01),而miR-140-5p抑制剂组则出现相应的低表达(P<0.05)。western blot结果表明,转染miR140-5p模拟物对PON1有明显的下调作用(P<0.01),而miR140-5p抑制剂对PON1有明显的上调作用(P<0.01)。与健康人对照组相比,NASH患者血清中miR140-5p表达水平降低(P<0.01)。结论 miR140-5p可能通过对PON1的转录后水平基因表达调控,参与NASH的进展。
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关键词
miR140-5p
对氧磷酶1
HEPG2细胞
非酒精性脂肪性肝炎
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职称材料
逆转录重组酶介导的新型冠状病毒可视化快速检测方法的建立
被引量：
4
2
作者
蔡欣
周婷婷
+4 位作者
朱进
孙学伟
刘晓光
杨展
汪茂荣
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2022年第5期471-477,共7页
目的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传播迅速,对经济造成威胁。研究快速检测方法,为其检测建立新的方法储备。方法根据严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)基因、刺突蛋白(S)基因及开放阅读区(ORF1ab)基因保守区序列结...
目的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传播迅速,对经济造成威胁。研究快速检测方法,为其检测建立新的方法储备。方法根据严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)基因、刺突蛋白(S)基因及开放阅读区(ORF1ab)基因保守区序列结合逆转录重组酶介导的等温扩增(RT-RAA)和荧光定量、胶体金侧向流免疫层析试纸条(LFD)建立逆转录重组酶介导的等温扩增荧光法(荧光RT-RAA法)和试纸条法(RT-RAA-LFD法)并进行优化,分别以构建的N、S、ORF1ab基因质粒为模板评估这两种方法的灵敏性和重复性;对其他冠状病毒质粒[如HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、SARS]模板进行检测,验证这两种方法的特异性。结果两种检测方法均可在39℃恒温条件下12 min内完成检测。荧光RT-RAA法中,ORF1ab基因可检测至10^(0)拷贝数,N、S基因可检测至10^(1)拷贝数。RT-RAA-LFD法中,3种基因均可检测至10^(3)拷贝数。两种方法与其他类型的冠状病毒无交叉反应,具有良好的特异性。结论RT-RAA法和LFD法检测时间短并具有较好的特异性、灵敏性和重复性,可用于SARS-CoV-2的快速筛查、诊断和监测。
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关键词
新型冠状病毒肺炎
新型冠状病毒
重组酶介导的等温扩增
快速检测
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职称材料
题名
MiR140-5p在HepG2细胞中对对氧磷酶1表达的调控及其临床应用
被引量：
5
1
作者
刘佳星
王冰
邢继成
何玉杰
杨爱珍
邱红
机构
安徽医科大学八一临床学院
中国人民解放军第
八一
医院检验科
中国人民解放军第
八一
医院中心实验科
出处
《临床检验杂志》
CAS
2019年第2期137-141,共5页
基金
南京军区医学创新项目(15MS059)
文摘
目的探讨微小RNA(miRNA)对对氧磷酶1(paraoxonase 1,PON1)表达的影响及其在非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)患者中的临床应用价值。方法采用生物信息学方法对PON1相关调控miRNA进行预测分析;构建PON1荧光素酶报告基因载体,分析双荧光素酶活性;在HepG2细胞中上/下调miRNA水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组miRNA的表达情况,并采用western blot检测HepG2细胞中PON1蛋白的表达水平;采用qRT-PCR分析健康人群和NASH患者血清中miR140-5p的水平。结果 Target Scan数据库预测到miR140-5p能与PON13'-UTR端互补结合。双荧光素酶报告基因活性分析显示,miR-140-5p模拟物对PON1野生型载体的报告荧光有明显的下调作用(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,与正常细胞对照组、模拟物阴性对照组相比,miR-140-5p模拟物组均呈现出过表达(P<0.01),而miR-140-5p抑制剂组则出现相应的低表达(P<0.05)。western blot结果表明,转染miR140-5p模拟物对PON1有明显的下调作用(P<0.01),而miR140-5p抑制剂对PON1有明显的上调作用(P<0.01)。与健康人对照组相比,NASH患者血清中miR140-5p表达水平降低(P<0.01)。结论 miR140-5p可能通过对PON1的转录后水平基因表达调控,参与NASH的进展。
关键词
miR140-5p
对氧磷酶1
HEPG2细胞
非酒精性脂肪性肝炎
Keywords
miR140-5p
paraoxonase 1
HepG2 cell
nonalcoholic steatohepatitis
分类号
R575.1 [医药卫生—消化系统]
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职称材料
题名
逆转录重组酶介导的新型冠状病毒可视化快速检测方法的建立
被引量：
4
2
作者
蔡欣
周婷婷
朱进
孙学伟
刘晓光
杨展
汪茂荣
机构
东部战区总医院秦淮医疗区肝病科教研室/
安徽医科大学八一临床学院
东部战区疾病预防控制中心
滨州医
学院
基础医
学院
南方
医科大
学南京
临床
医
学院
(东部战区总医院)呼吸与危重症医学科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2022年第5期471-477,共7页
基金
军队后勤科研重大项目(2019SWAQ05-5-4)
江苏省社会发展项目(BE2018617)。
文摘
目的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传播迅速,对经济造成威胁。研究快速检测方法,为其检测建立新的方法储备。方法根据严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)基因、刺突蛋白(S)基因及开放阅读区(ORF1ab)基因保守区序列结合逆转录重组酶介导的等温扩增(RT-RAA)和荧光定量、胶体金侧向流免疫层析试纸条(LFD)建立逆转录重组酶介导的等温扩增荧光法(荧光RT-RAA法)和试纸条法(RT-RAA-LFD法)并进行优化,分别以构建的N、S、ORF1ab基因质粒为模板评估这两种方法的灵敏性和重复性;对其他冠状病毒质粒[如HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、SARS]模板进行检测,验证这两种方法的特异性。结果两种检测方法均可在39℃恒温条件下12 min内完成检测。荧光RT-RAA法中,ORF1ab基因可检测至10^(0)拷贝数,N、S基因可检测至10^(1)拷贝数。RT-RAA-LFD法中,3种基因均可检测至10^(3)拷贝数。两种方法与其他类型的冠状病毒无交叉反应,具有良好的特异性。结论RT-RAA法和LFD法检测时间短并具有较好的特异性、灵敏性和重复性,可用于SARS-CoV-2的快速筛查、诊断和监测。
关键词
新型冠状病毒肺炎
新型冠状病毒
重组酶介导的等温扩增
快速检测
Keywords
COVID-19
SARS-CoV-2
recombinase-aided amplification
rapid detection
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MiR140-5p在HepG2细胞中对对氧磷酶1表达的调控及其临床应用
刘佳星
王冰
邢继成
何玉杰
杨爱珍
邱红
《临床检验杂志》
CAS
2019
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
逆转录重组酶介导的新型冠状病毒可视化快速检测方法的建立
蔡欣
周婷婷
朱进
孙学伟
刘晓光
杨展
汪茂荣
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2022
4
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