目的探讨趋化因子干扰素诱导蛋白10(IP-10)在系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的表达水平及其对SLE的临床诊断价值。方法采用ELISA法检测96例SLE患者以及30例正常对照组血清中IP-10表达水平,比较分析其与SLE病情活动指数(SLEDAI评分)、疾...目的探讨趋化因子干扰素诱导蛋白10(IP-10)在系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的表达水平及其对SLE的临床诊断价值。方法采用ELISA法检测96例SLE患者以及30例正常对照组血清中IP-10表达水平,比较分析其与SLE病情活动指数(SLEDAI评分)、疾病活动性指标抗双链DNA(dS-DNA)抗体、抗C1q抗体、补体C3、C4水平、24 h尿蛋白定量(24 h UPQ)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、红细胞沉降率(ESR)的相关性,以及通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素-4(IL-4)来判断其在调节炎症免疫反应中的作用。结果总体SLE患者IP-10水平显著高于正常对照组,疾病活动狼疮肾炎(LN)组IP-10水平明显高于疾病活动非肾损伤组和疾病稳定组,差异有统计学意义(P<0.01),而疾病稳定LN组与疾病活动无肾损伤组间IP-10水平差异无统计学意义。在疾病活动期中,IP-10水平与SLEDAI评分、dS-DNA、hs-CRP呈明显正相关(P<0.01),与C3呈负相关(P<0.01),与C4、24 h UPQ、ESR无相关性,而在SLE肾损伤中,无论是活动期还是稳定期IP-10水平均和C1q呈正相关(P<0.05);SLE患者中IFN-γ、IL-4水平均明显高于正常对照组,IP-10与IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值在疾病活动和稳定时均呈正相关(P<0.01),而与IL-4仅在疾病稳定时呈正相关(P<0.01)。结论 IP-10通过介导Th1型炎症免疫反应在SLE中发挥重大作用,其表达水平与SLE疾病活动性密切相关,尤其对狼疮肾炎及狼疮活动的早期监测具有重要意义。展开更多
目的构建含T7RNA聚合酶(T7RNA Polymerase,T7RNP)的真核表达载体,同时构建含T7启动子、增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)和T7RNP转录终止信号的载体,并通过观察EGFP的表达推测T7RNP表达和T7表达系统介导基...目的构建含T7RNA聚合酶(T7RNA Polymerase,T7RNP)的真核表达载体,同时构建含T7启动子、增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)和T7RNP转录终止信号的载体,并通过观察EGFP的表达推测T7RNP表达和T7表达系统介导基因转录的功能。方法根据编码T7RNP的基因序列,应用PCR技术从含有T7RNP基因的E.coli BL21(DE3)基因组中扩增编码T7RNP的基因片段,克隆至载体pcDNA3·1(+)。同时从px8δt载体和pGEM-Teasy/EGFP上切下T7RNP识别的终止信号(terminator,TER)和编码EGFP的基因,克隆至载体pcD-NAII。将获得的两个重组质粒共转染BHK细胞。48h后,通过观察EGFP基因在真核细胞内的表达情况,推测T7RNP基因的表达及表达后识别T7启动子介导基因转录功能。结果成功构建了含T7RNP编码基因的真核表达载体pcDNA3·1(+)/T7RNP和原核表达载体pcDNAII/EG-FP/TER,共转染BHK细胞后,可观察到EGFP表达的绿色荧光。结论T7RNP能顺利在真核细胞内表达,并通过与T7启动子和TER的相互作用,成功实现了EGFP基因的转录和表达。展开更多
文摘目的探讨趋化因子干扰素诱导蛋白10(IP-10)在系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的表达水平及其对SLE的临床诊断价值。方法采用ELISA法检测96例SLE患者以及30例正常对照组血清中IP-10表达水平,比较分析其与SLE病情活动指数(SLEDAI评分)、疾病活动性指标抗双链DNA(dS-DNA)抗体、抗C1q抗体、补体C3、C4水平、24 h尿蛋白定量(24 h UPQ)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、红细胞沉降率(ESR)的相关性,以及通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素-4(IL-4)来判断其在调节炎症免疫反应中的作用。结果总体SLE患者IP-10水平显著高于正常对照组,疾病活动狼疮肾炎(LN)组IP-10水平明显高于疾病活动非肾损伤组和疾病稳定组,差异有统计学意义(P<0.01),而疾病稳定LN组与疾病活动无肾损伤组间IP-10水平差异无统计学意义。在疾病活动期中,IP-10水平与SLEDAI评分、dS-DNA、hs-CRP呈明显正相关(P<0.01),与C3呈负相关(P<0.01),与C4、24 h UPQ、ESR无相关性,而在SLE肾损伤中,无论是活动期还是稳定期IP-10水平均和C1q呈正相关(P<0.05);SLE患者中IFN-γ、IL-4水平均明显高于正常对照组,IP-10与IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值在疾病活动和稳定时均呈正相关(P<0.01),而与IL-4仅在疾病稳定时呈正相关(P<0.01)。结论 IP-10通过介导Th1型炎症免疫反应在SLE中发挥重大作用,其表达水平与SLE疾病活动性密切相关,尤其对狼疮肾炎及狼疮活动的早期监测具有重要意义。
