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SOX7启动子甲基化对膀胱癌增殖及凋亡的影响
被引量：
10
1
作者
吴元
张文涛
+6 位作者
马文超
王瑞良
郭亚东
刘济
毛士玉
张俊峰
姚旭东
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2019年第12期1285-1290,共6页
目的SOX7基因在多种肿瘤中发挥抑癌作用,而对膀胱癌是否发挥作用报道较少。文中旨在探讨SOX7基因在膀胱癌中的表达情况,研究SOX7启动子甲基化对膀胱癌的调控及意义。方法采用GEPIA,Oncomine,MethHC和cBioPortal数据库预测SOX7在膀胱癌...
目的SOX7基因在多种肿瘤中发挥抑癌作用,而对膀胱癌是否发挥作用报道较少。文中旨在探讨SOX7基因在膀胱癌中的表达情况,研究SOX7启动子甲基化对膀胱癌的调控及意义。方法采用GEPIA,Oncomine,MethHC和cBioPortal数据库预测SOX7在膀胱癌组织中的表达、启动子甲基化等。收集2017年1月至10月在上海市第十人民医院泌尿外科40份尿液标本。其中膀胱癌患者标本20份,正常对照者标本20份。通过甲基化特异性PCR检测尿液标本中SOX7基因的甲基化差异。培养膀胱癌细胞系,T24细胞中加入含有甲基化药物5-氮杂-2′脱氧胞苷(5-aza-dc)的培养基为5-aza-dc组,T24细胞加入同体积的DMSO为对照组。膀胱癌细胞系转染SOX7质粒为质粒组,转染空载质粒为空载组。Western blot检测SOX7在膀胱癌细胞系中的表达情况,通过CCK-8实验、平板克隆实验、流式细胞仪检测膀胱癌细胞去甲基化后的增殖,克隆形成及凋亡变化情况。结果数据库中膀胱癌组织甲基化水平明显高于正常组织(P<0.005)。膀胱癌患者尿液中15份(75%)SOX7甲基化水平增高,而正常人尿液中仅7份(35%),差异有统计学意义(P<0.05)。5-aza-dc组SOX7蛋白的表达量较对照组上调,当浓度达到20μmol/L时,SOX7蛋白表达量相对较高。质粒组SOX7蛋白表达量较空载组上调明显。CCK-8结果显示,第5天,5-aza-dc组的A值较对照组显著降低(P<0.05),质粒组T24细胞A值较空载组明显降低。克隆形成实验发现,5-aza-dc组每孔克隆形成数[(167.33±13.65)个]较对照组[(328.00±20.81)个]明显下降(P<0.05)。质粒组每孔克隆形成数[(136.00±15.00)个]较空载组[(280.67±13.43)个]明显下降(P<0.05)。5-aza-dc组T24细胞的凋亡率(27.89%)较对照组(3.79%)明显升高(P<0.05),质粒组细胞凋亡率(21.28%)较空载组(9.90%)亦明显增高(P<0.05)。结论SOX7在膀胱癌低表达,其表达受启动子甲基化调控,是膀胱癌的潜在生物学标志,在膀胱癌的发生、发展中发挥重要作用。
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关键词
膀胱癌
SOX7
DNA甲基化
凋亡
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职称材料
题名
SOX7启动子甲基化对膀胱癌增殖及凋亡的影响
被引量：
10
1
作者
吴元
张文涛
马文超
王瑞良
郭亚东
刘济
毛士玉
张俊峰
姚旭东
机构
安徽医科大学上海临床学院泌尿外科
上海
市第十人民医
院
泌
尿
外科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2019年第12期1285-1290,共6页
基金
国家自然科学基金(81472389)
上海市科研计划项目(19411967700)
文摘
目的SOX7基因在多种肿瘤中发挥抑癌作用,而对膀胱癌是否发挥作用报道较少。文中旨在探讨SOX7基因在膀胱癌中的表达情况,研究SOX7启动子甲基化对膀胱癌的调控及意义。方法采用GEPIA,Oncomine,MethHC和cBioPortal数据库预测SOX7在膀胱癌组织中的表达、启动子甲基化等。收集2017年1月至10月在上海市第十人民医院泌尿外科40份尿液标本。其中膀胱癌患者标本20份,正常对照者标本20份。通过甲基化特异性PCR检测尿液标本中SOX7基因的甲基化差异。培养膀胱癌细胞系,T24细胞中加入含有甲基化药物5-氮杂-2′脱氧胞苷(5-aza-dc)的培养基为5-aza-dc组,T24细胞加入同体积的DMSO为对照组。膀胱癌细胞系转染SOX7质粒为质粒组,转染空载质粒为空载组。Western blot检测SOX7在膀胱癌细胞系中的表达情况,通过CCK-8实验、平板克隆实验、流式细胞仪检测膀胱癌细胞去甲基化后的增殖,克隆形成及凋亡变化情况。结果数据库中膀胱癌组织甲基化水平明显高于正常组织(P<0.005)。膀胱癌患者尿液中15份(75%)SOX7甲基化水平增高,而正常人尿液中仅7份(35%),差异有统计学意义(P<0.05)。5-aza-dc组SOX7蛋白的表达量较对照组上调,当浓度达到20μmol/L时,SOX7蛋白表达量相对较高。质粒组SOX7蛋白表达量较空载组上调明显。CCK-8结果显示,第5天,5-aza-dc组的A值较对照组显著降低(P<0.05),质粒组T24细胞A值较空载组明显降低。克隆形成实验发现,5-aza-dc组每孔克隆形成数[(167.33±13.65)个]较对照组[(328.00±20.81)个]明显下降(P<0.05)。质粒组每孔克隆形成数[(136.00±15.00)个]较空载组[(280.67±13.43)个]明显下降(P<0.05)。5-aza-dc组T24细胞的凋亡率(27.89%)较对照组(3.79%)明显升高(P<0.05),质粒组细胞凋亡率(21.28%)较空载组(9.90%)亦明显增高(P<0.05)。结论SOX7在膀胱癌低表达,其表达受启动子甲基化调控,是膀胱癌的潜在生物学标志,在膀胱癌的发生、发展中发挥重要作用。
关键词
膀胱癌
SOX7
DNA甲基化
凋亡
Keywords
bladder cancer
SOX7
DNA methylation
apoptosis
分类号
R694 [医药卫生—泌尿科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SOX7启动子甲基化对膀胱癌增殖及凋亡的影响
吴元
张文涛
马文超
王瑞良
郭亚东
刘济
毛士玉
张俊峰
姚旭东
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2019
10
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