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生物医学实验室安全教育及管理策略 被引量:14
1
作者 吴家文 《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第2期120-123,共4页
生物医学实验室是我国很多高校必备实验室,是保障科研成果的基础设施。为了加强生物医学实验室的安全教育,将分别从不同类型的生物医学实验着手,最大范围普及生物医学实验室安全知识,实行多级安全知识培训制度、强制性考试准入制度并加... 生物医学实验室是我国很多高校必备实验室,是保障科研成果的基础设施。为了加强生物医学实验室的安全教育,将分别从不同类型的生物医学实验着手,最大范围普及生物医学实验室安全知识,实行多级安全知识培训制度、强制性考试准入制度并加强各级管理,最大力度实施生物医学实验室安全管理策略,为维护实验室安全提供指导。 展开更多
关键词 生物医学实验室 实验安全 实验管理
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抵当汤含药血清通过PI3K/Akt/mTOR信号通路增强高糖诱导的大鼠肾小球内皮细胞自噬 被引量:2
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作者 董妍妍 张可敬 +1 位作者 储俊 储全根 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第3期461-469,共9页
目的观察抵当汤含药血清通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR信号通路对高糖诱导的大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)自噬的影响,以期为糖尿病肾病(DN)的治疗提供新的思路。方法连续过筛法结合胶原酶法提取... 目的观察抵当汤含药血清通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR信号通路对高糖诱导的大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)自噬的影响,以期为糖尿病肾病(DN)的治疗提供新的思路。方法连续过筛法结合胶原酶法提取与培养原代RGECs,使用第Ⅷ因子免疫荧光法对其鉴定。通过高糖培养基诱导RGECs模拟糖尿病环境下的细胞状态。将细胞分为5组:空白组(正常培养的RGECs)、高糖模型组(使用高糖培养基诱导的RGECs)、抵当汤组(在高糖诱导基础上加入抵当汤含药血清进行干预的RGECs)、3-MA组(在高糖诱导基础上加入自噬抑制剂3-MA进行干预的RGECs)和抵当汤+3-MA干预组(在高糖诱导基础上同时加入抵当汤含药血清和自噬抑制剂3-MA进行干预的RGECs)。CCK-8法筛选最佳造模条件和含药血清干预浓度,利用单丹磺酰卡巴胺(MDC)法观察自噬囊泡荧光强度,RT-qPCR法检测Beclin-1、p62mRNA表达,Western blotting法检测p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin-1、p62、LC3B蛋白表达水平。结果与正常组比较,高糖模型组RGECs自噬荧光信号减少,荧光强度降低,Beclin-1 mRNA表达减少,p62 mRNA表达升高,Beclin-1蛋白表达和LC3Ⅱ/Ⅰ水平下降,P62、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达上升(P<0.01);与高糖模型组比较,抵当汤组RGECs自噬荧光面积与强度明显升高,Beclin-1 mRNA表达上升,p62 mRNA表达下降,Beclin-1蛋白表达上升,p62、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达下降(P<0.01)。结论抵当汤含药血清可通过部分调节PI3K/Akt/mTOR信号通路,增强RGECs的自噬,为糖尿病肾病的治疗提供新策略。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 抵当汤 自噬 PI3K/Akt/mTOR信号通路 肾小球内皮细胞
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多花黄精调控多糖生物合成途径的bHLH转录因子家族鉴定与分析 被引量:1
3
作者 王郅炜 张京晶 +4 位作者 单婷玉 钟欣欣 樊金世博 程卉 吴家文 《生物学杂志》 北大核心 2025年第3期51-58,共8页
为探讨多花黄精bHLH转录因子(PcbHLH)在多糖生物合成途径中的调控作用,研究基于高通量测序对多花黄精的根茎、根、叶和花进行转录组分析,获得235个多花黄精bHLH转录因子,将它们的蛋白序列与拟南芥bHLH构建系统发育树,归类为25个亚家族。... 为探讨多花黄精bHLH转录因子(PcbHLH)在多糖生物合成途径中的调控作用,研究基于高通量测序对多花黄精的根茎、根、叶和花进行转录组分析,获得235个多花黄精bHLH转录因子,将它们的蛋白序列与拟南芥bHLH构建系统发育树,归类为25个亚家族。KEGG代谢通路分析表明,有15个PcbHLH涉及多糖生物合成途径,亚细胞定位分析表明,其中13个PcbHLH蛋白可能定位在细胞核。序列分析显示,α-螺旋和无规卷曲是它们二级结构的主要元件,空间结构上它们都具有2对不相连的[由2个α-螺旋所组成的螺旋-环-螺旋(HLH)]结构。基因表达分析发现15个PcbHLH中有9个在根茎中表达量最高,而蛋白质-蛋白质相互作用结果显示,PcbHLH与多糖生物合成途径中5个关键酶互作程度较高,表明PcbHLH很可能通过调控这些关键酶调节多糖生物合成。研究为进一步探究PcbHLH的结构和功能提供理论依据,为最终揭示bHLH如何调控多花黄精中的多糖生物合成途径奠定实验基础。 展开更多
关键词 多花黄精 转录因子 BHLH 转录组分析 多糖生物合成
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滁菊总黄酮对缺氧/复氧损伤致大鼠脑血管内皮细胞活性、迁移的影响及与VEGFR2的关系
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作者 张星宇 王潇 +2 位作者 吴淼 陈硕 陈志武 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第11期2075-2081,共7页
目的 探讨滁菊总黄酮(total flavonoids of Chuzhou chrysanthemum,TFCC)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤大鼠脑血管内皮细胞活性、迁移的作用,以及TFCC的作用与血管内皮生长因子受体2 (vascular endothelial growth factor... 目的 探讨滁菊总黄酮(total flavonoids of Chuzhou chrysanthemum,TFCC)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤大鼠脑血管内皮细胞活性、迁移的作用,以及TFCC的作用与血管内皮生长因子受体2 (vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)的关系。方法 培养原代大鼠脑血管内皮细胞,构建细胞H/R模型,使用VEGFR2阻断剂SU5416(10μmol·L^(-1))并建立细胞转染模型,用CCK-8法检测细胞活性,细胞划痕法和Transwell法分别检测细胞迁移。结果 TFCC(30、90、270 mg·L^(-1))可明显增加H/R损伤的大鼠脑血管内皮细胞活性及迁移能力,而使用VEGFR2阻断剂SU5416及转染VEGFR2 siRNA可明显抑制TFCC对H/R损伤的大鼠脑血管内皮细胞活性、迁移能力的增强。结论 TFCC促进H/R损伤大鼠脑血管内皮细胞的活性、迁移能力的增强,其作用机制与VEGFR2有关。 展开更多
关键词 滁菊总黄酮 内皮细胞 血管内皮生长因子受体2 缺氧/复氧损伤 活性 迁移
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高磷诱导下肢血管平滑肌细胞成骨分化关键差异表达基因筛选及验证
5
作者 倪英群 杨矛 +7 位作者 杨迪 郭呈林 朱文君 俞雅琴 卢芹 骆金芝 吴春琴 方朝晖 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期620-627,共8页
目的:采用mRNA高通量测序技术筛选高磷诱导下肢血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化差异表达基因(DEGs),分析VSMCs钙化的关键基因及信号通路。方法:将人VSMCs分为对照组和模型组,模型组细胞中加入高磷培养基,对照组细胞采用含10%胎牛血清的DMEM... 目的:采用mRNA高通量测序技术筛选高磷诱导下肢血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化差异表达基因(DEGs),分析VSMCs钙化的关键基因及信号通路。方法:将人VSMCs分为对照组和模型组,模型组细胞中加入高磷培养基,对照组细胞采用含10%胎牛血清的DMEM培养基于相同条件下培养。调整2组稳定转染VSMCs的状态,培养12 d,倒置显微镜下观察细胞形态表现并拍照。采用Hisat2软件筛选DEGs,采用Stringtie软件从生物过程(BP)、分子功能(MF)和细胞成分(CC)3个方面进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。Von Kossa染色法观察各组细胞钙化情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组细胞中碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肿瘤蛋白53(Tp53)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白轻链1(Ftl1)和糖基磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1(GPLD1)mRNA表达水平。结果:与对照组比较,模型组共2 524个DEGs,其中1 368个DEGs表达上调,1 156个DEGs表达下调;2组细胞DEGs聚类分离明显。GO功能和KEGG信号通路富集分析表达上调的DEGs主要参与微管细胞骨架组织的调节、细胞极性、蛋白质定位和细胞周期调控等BP,构建细胞膜部分、微管组织、染色体和着丝粒区等CC,发挥与磷脂酰肌醇磷酸盐、 Rho鸟苷酸三磷酸酶(GTPase)蛋白结合、参与跨膜转运和调节蛋白激酶活性等MF;表达下调的DEGs主要参与细胞质翻译、蛋白质膜定位、mRNA代谢和蛋白质内质网定位等BP,构建核糖体亚单位、细胞膜和自噬体等CC,发挥与单链DNA、核糖核蛋白复合物、生长因子结合、调节蛋白激酶活性和催化作用等MF。差异表达上调的基因富集7条信号通路,其中最为显著的是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的生物合成;差异表达下调的基因富集18条信号通路,其中最为显著的是铁死亡。RT-qPCR法,与对照组比较,模型组细胞中GPX4、Ftl1和Tp53 mRNA表达水平明显降低(P<0.01),GPLD1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与对照组比较,模型组细胞中α-SMA mRNA表达水平明显降低(P<0.01),ALP和BMP2 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。结论:钙化的VSMCs与正常细胞存在DEGs,铁死亡和GPI锚定的生物合成信号途径是高磷诱导下肢VSMCs钙化的关键信号通路,主要由GPX4、Ftl1、Tp53和GPLD1共同介导完成。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 成骨分化 细胞钙化 mRNA测序 铁死亡
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黄大茶与薏苡仁、茯苓复配调节肠道菌群改善营养性肥胖的作用研究 被引量:4
6
作者 胡岳云 谢忠稳 +4 位作者 杨东梅 钱力维 罗胜勇 袁静静 李庆林 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第21期86-94,共9页
该研究考察黄大茶、薏苡仁和茯苓复配物对高脂饮食诱导肥胖改善的作用与机制。采用高脂饮食喂养C57/BL 6 N雄性小鼠12周,同时分别用黄大茶复配物(large-leaf yellow tea formula aqueous extracts,LFAE)、薏苡仁+茯苓水提物(Coix lachry... 该研究考察黄大茶、薏苡仁和茯苓复配物对高脂饮食诱导肥胖改善的作用与机制。采用高脂饮食喂养C57/BL 6 N雄性小鼠12周,同时分别用黄大茶复配物(large-leaf yellow tea formula aqueous extracts,LFAE)、薏苡仁+茯苓水提物(Coix lachrymajobi L.combined with Poria cocos Wolf formula aqueous extracts,CPAE)或黄大茶水提物(large-leaf yellow tea aqueous extracts,LAE)干预处理,每周记录小鼠的体重及能量摄入。饮食干预完成后,检测各组小鼠血脂水平变化,HE染色法检测小鼠肝脏及附睾脂肪组织(epididymal adipose tissue,EAT)的形态变化,采用16S rRNA高通量测序分析各组小鼠肠道菌群的多样性与差异性,Western blotting检测EAT中腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、p-AMPK、甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)、激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)和p-HSL蛋白的表达。结果显示,与高脂组相比,CPAE和LAE组小鼠体重降低均不显著,而LFAE组小鼠的体重、TC、LDL-C、AST、ALT水平和脂质沉积显著降低,肠道菌群中厚壁菌门丰度显著降低,拟杆菌门丰度升高,属水平中阿德勒克罗伊茨菌(Adlercreutzia)、异杆菌属(Allobaculum)、经黏液真杆菌属(Blautia)、狄氏副拟杆菌(Parabacteroides)丰度显著提高,p-AMPK、ATGL和p-HSL蛋白表达均显著上调。此外,与LAE组相比,LFAE组小鼠的体重、TG水平和脂质沉积显著降低,厚壁菌门丰度降低,拟杆菌门丰度升高,Adlercreutzia、Allobaculum、Blautia、Parabacteroides丰度显著提高,ATGL和p-HSL蛋白的表达均显著上调。综上所述,黄大茶、薏苡仁和茯苓复配物能够调节小鼠肠道菌群,促进脂肪组织脂解,协同增效改善高脂饮食诱导的肥胖。 展开更多
关键词 肥胖 黄大茶 薏苡仁 茯苓 高脂饮食 肠道菌群 脂解
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抵当汤含药血清对高糖诱导大鼠肾小球内皮细胞损伤的影响 被引量:3
7
作者 罗宝璐 储全根 +3 位作者 储俊 李飞翔 陈静 王悦琦 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2930-2935,共6页
目的观察抵当汤含药血清对高糖诱导损伤大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)的保护作用。方法大鼠灌胃给予蒸馏水或抵当汤制备空白血清或抵当汤含药血清,CCK8法筛选葡萄糖造模浓度及含药血清给药浓度。将RGECs分为空白组、模型组、抵当汤组(10%... 目的观察抵当汤含药血清对高糖诱导损伤大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)的保护作用。方法大鼠灌胃给予蒸馏水或抵当汤制备空白血清或抵当汤含药血清,CCK8法筛选葡萄糖造模浓度及含药血清给药浓度。将RGECs分为空白组、模型组、抵当汤组(10%抵当汤含药血清)、达格列净组(空白血清+2μmol/L达格列净)、抵当汤+达格列净组(10%抵当汤含药血清+2μmol/L达格列净),药物处理24 h后,RT-qPCR法和Western blot法检测细胞Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达,免疫荧光法检测细胞Nrf2荧光表达,比色法检测细胞SOD活性及MDA水平。结果与空白组比较,模型组RGECs中Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达以及SOD活性降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达以及SOD活性升高(P<0.05,P<0.01),MDA水平降低(P<0.01)。结论抵当汤含药血清可以通过激活Nrf2信号通路从而抑制氧化应激,对高糖损伤的RGECs起到保护作用。 展开更多
关键词 抵当汤 大鼠肾小球内皮细胞(RGECs) 糖尿病肾病 Nrf2信号通路 氧化应激
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抗震止痉方对亚急性帕金森模型小鼠的病程进展干预研究 被引量:1
8
作者 白雪纯 陈硕 +1 位作者 李珊珊 李庆林 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期629-636,共8页
目的:观察中药抗震止痉Ⅰ号方对帕金森模型小鼠病程进展的干预作用,并探讨其神经保护的潜在机制。方法:36只C57BL/6小鼠随机平均分为对照组、模型组、给药组、阳性药组。模型组、给药组及阳性药组采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-... 目的:观察中药抗震止痉Ⅰ号方对帕金森模型小鼠病程进展的干预作用,并探讨其神经保护的潜在机制。方法:36只C57BL/6小鼠随机平均分为对照组、模型组、给药组、阳性药组。模型组、给药组及阳性药组采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-METHYL-4-PHENYL-1,2,3,6-TET-RAHYDROPYRIDINE,MPTP)(30 mg/kg)连续腹腔注射5 d,制备PD小鼠模型。对照组给与等量的生理盐水,给药组采用1.25、2.5、5mg/kg的剂量灌胃中药抗震止痉Ⅰ号,阳性药组采用75mg/kg美多芭灌胃给药。给药结束后第2天进行行为学检测各组小鼠的运动能力。采用免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)、淀粉样前体蛋白(APP)、α-突触核蛋白(α-syn)、溶质载体家族6成员11(SLC6A11)免疫阳性细胞情况;采用Western Blot方法考察各组小鼠TH、APP、α-syn、SLC6A11的蛋白表达情况。结果:抗震止痉Ⅰ号方可以明显改善模型组小鼠体质量减轻现象,缓解模型组小鼠旷场实验自主活动能力减退和爬杆实验及悬挂实验协调能力的下降;提高模型组小鼠脑中TH、SLC6A11的蛋白表达,降低APP、α-syn的蛋白表达。结论:抗震止痉Ⅰ号可以明显改善帕金森模型小鼠的行为学表现,并有效改善神经元递质的丢失。 展开更多
关键词 动物模型 行为学 帕金森 神经保护 神经退行性疾病
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一种氟化纳米给药系统通过抑制阿霉素外排逆转MCF-7/ADR细胞耐药性的研究 被引量:2
9
作者 孙怀涛 林银花 +3 位作者 孙雨蓉 陈乔 陈硕 曹煜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1124-1130,共7页
目的通过合成氟化纳米材料完成对阿霉素(doxorubicin,dox)的高效负载,并实现纳米药物对抗肿瘤耐药的机制研究。方法评估不同氟化程度(PF4和PF8)的纳米药物(nano dox)的理化性能,筛选出更为优良的氟化nano dox;通过细胞毒性、细胞摄取、... 目的通过合成氟化纳米材料完成对阿霉素(doxorubicin,dox)的高效负载,并实现纳米药物对抗肿瘤耐药的机制研究。方法评估不同氟化程度(PF4和PF8)的纳米药物(nano dox)的理化性能,筛选出更为优良的氟化nano dox;通过细胞毒性、细胞摄取、凋亡以及对抗外排泵P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的研究,考察nano dox对抗肿瘤多药耐药以及体外抗肿瘤活性研究。结果通过考察各种理化指标,PF8相对于PF4显示出更优良的负载dox性能;通过细胞毒性实验证明,nano dox的IC 50值只有游离dox IC 50值的1/40,显示出nano dox在对抗耐药性方面优良的体外活性;细胞摄取和凋亡研究说明nano dox可以有效提高耐药MCF-7/ADR细胞对dox的摄取并能成功地进入细胞核内,最终导致凋亡诱导的抗癌活性;P-gp的药物外排研究说明nano dox可以有效绕过P-gp外排泵,达到增加耐药细胞对药物的摄取同时减少外排量的双重作用。结论通过氟化nano dox的设计可以有效绕过P-gp对药物的外排作用,增加药物在耐药肿瘤细胞内的摄取,减少其外排,从而达到有效的对抗肿瘤多药耐药效果。 展开更多
关键词 氟化纳米 药物递送 P-糖蛋白 体外活性 药物外排 多药耐药
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益气活血方基于miR-124调控Wnt通路促进神经再生 被引量:13
10
作者 谭辉 王键 +4 位作者 尹婷婷 何玲 邓勇 李凤 王玉凤 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1047-1053,共7页
目的探讨益气活血方(脑络欣通)对MCAO-R气虚血瘀证大鼠神经再生的影响及可能的作用机制。方法随机数字表法将大鼠分成4组:正常组、模型组、脑络欣通组、通心络组,其中脑络欣通组和通心络组分别用脑络欣通溶液、通心络溶液灌胃。观察各... 目的探讨益气活血方(脑络欣通)对MCAO-R气虚血瘀证大鼠神经再生的影响及可能的作用机制。方法随机数字表法将大鼠分成4组:正常组、模型组、脑络欣通组、通心络组,其中脑络欣通组和通心络组分别用脑络欣通溶液、通心络溶液灌胃。观察各组大鼠生命状态并进行神经功能缺损、气虚证和血瘀证评分,运用激光多普勒仪动态监测局部脑血流量(r CBF),TTC染色检测脑梗死体积,免疫组化结合免疫荧光染色检测脑组织Nestin和Brd U表达,荧光定量PCR检测mi RNA-124水平,Western blotting检测Wnt3a、GSK3β和β-catenin蛋白表达水平。结果脑络欣通和通心络都能改善模型大鼠神经功能,降低气虚证和血瘀证评分,减少脑梗死体积,r CBF提高(P<0.01);脑络欣通和通心络组Brd U表达增强,与正常组比较,其他3组阳性细胞数明显增多(P<0.01),与模型组比较,脑络欣通和通心络组显著增多,Nestin表达明显增强(P<0.01)。脑络欣通能抑制模型大鼠脑组织mi RNA-124和Wnt3a应激性的高表达,同时提高β-catenin的表达水平(P<0.01)。但脑络欣通和通心络对模型大鼠GSK3β蛋白表达均无明显影响(P>0.05)。结论脑络欣通可能通过影响脑组织mi RNA-124的表达而激活Wnt通路,从而发挥对气虚血瘀型脑缺血的神经保护以及神经再生的作用。 展开更多
关键词 气虚血瘀证 脑缺血 脑络欣通 神经再生 miRNA-124 WNT通路
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益气活血中药脑络欣通促进脑缺血气虚血瘀证大鼠脑血管再生及机制 被引量:11
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作者 谭辉 尹婷婷 +3 位作者 邓勇 何玲 李凤 王玉凤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期712-718,共7页
目的探讨脑络欣通对大脑中动脉闭塞缺血再灌注(MCAO-R)气虚血瘀证大鼠脑血管再生的影响及其可能机制。方法随机数字表法将SD大鼠分为正常对照组、模型组、脑络欣通高剂量组[1200 mg/(kg·d)]、脑络欣通中剂量组[800 mg/(kg·d)... 目的探讨脑络欣通对大脑中动脉闭塞缺血再灌注(MCAO-R)气虚血瘀证大鼠脑血管再生的影响及其可能机制。方法随机数字表法将SD大鼠分为正常对照组、模型组、脑络欣通高剂量组[1200 mg/(kg·d)]、脑络欣通中剂量组[800 mg/(kg·d)]、脑络欣通低剂量组[400 mg/(kg·d)],各12只,改良线栓法结合多因素复合模拟建立MCAO-R气虚血瘀证模型。根据模型生物学特征评分量化标准进行神经功能缺损、气虚证和血瘀证评分,运用激光多普勒仪动态监测局部脑血流量(rCBF),HE染色观察缺血脑组织病理变化,实时荧光定量PCR检测缺血脑组织Wnt5a、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)mRNA水平,Western blot法检测β联蛋白(β-catenin)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的蛋白表达。结果脑络欣通能改善模型大鼠神经功能,降低气虚血瘀证评分,恢复rCBF;脑络欣通高、中剂量组病变减轻最为明显,且这两组对Wnt5a mRNA表达的上调作用最为明显,但对模型大鼠GSK-3βmRNA无明显影响;脑络欣通高、中剂量组β-catenin、VEGF、AngⅡ表达显著升高。结论脑络欣通能促进脑血管再生而提高rCBF,可能与激活Wnt通路而影响促血管生成因子的表达有关。 展开更多
关键词 脑络欣通 脑缺血 WNT通路 血管再生 局部脑血流量
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脑络欣通降低局灶性脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质TLR4及TRAF6和TNF-α蛋白的表达 被引量:12
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作者 王丽娜 曹健 +6 位作者 朱国旗 范婧婧 丁玲 贾学锋 梁梦茹 王键 胡建鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期702-707,共6页
目的观察脑络欣通对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达的影响。方法采用改良线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)大鼠右侧脑缺血模型,SD大鼠随机分... 目的观察脑络欣通对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达的影响。方法采用改良线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)大鼠右侧脑缺血模型,SD大鼠随机分为假手术组、模型组、通心络组和脑络欣通组,每组30只;再分为3、7、14 d三个亚组,灌胃给药。Western blot法检测缺血侧额顶叶皮质TLR4、TRAF6的蛋白水平,免疫组织化学染色法检测缺血侧额顶叶皮质缺血半暗带TNF-α的表达。结果与假手术组比较,模型组3、7、14 d,TLR4、TRAF6蛋白水平显著升高;与模型组比较,各治疗组3、14 d的TLR4、TRAF6蛋白水平显著降低,脑络欣通组7 d显著降低;与通心络组比较,脑络欣通组3、7 d的TLR4的蛋白水平降低,14 d的TLR4蛋白水平升高。与假手术组比较,模型组3、7 d的TNF-α蛋白表达的阳性面积显著升高;与模型组比较,脑络欣通组和通心络组7、14 d的TNF-α蛋白表达的阳性面积显著降低,脑络欣通组3 d的TNF-α蛋白表达的阳性面积显著降低;与通心络组比较,脑络欣通组各时间点TNF-α蛋白表达的阳性面积均无明显差异。结论脑络欣通通过降低TLR4、TRAF6、TNF-α蛋白表达,减轻炎症反应,减轻脑缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 脑络欣通 Toll样受体4(TLR4) 肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6) 肿瘤坏死因子α(TNF-α)
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生物信息学分析桑白皮汤治疗慢性阻塞性肺病急性加重的关键靶点和潜在机制 被引量:12
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作者 王坤 朱慧志 +4 位作者 杨磊 徐晴雯 任冯春 刘向国 万磊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期130-137,共8页
目的运用网络药理学探究桑白皮汤治疗慢性阻塞性肺病急性加重期的关键靶点和分子机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库检索桑白皮汤的活性成分,预测其对应靶点;利用基因库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(... 目的运用网络药理学探究桑白皮汤治疗慢性阻塞性肺病急性加重期的关键靶点和分子机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库检索桑白皮汤的活性成分,预测其对应靶点;利用基因库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、药品数据与综合药物靶点信息DrugBank数据库检索慢性阻塞性肺病急性加重疾病相关靶点,利用全球蛋白质资源(Uniprot)数据库将预测靶点和疾病靶点名称标准化后筛选出交集靶点,利用Cytoscape3.6.0绘制并分析中药-成分-靶点网络图。将共同靶点导入检索互作用基因/蛋白质的搜索工具(STRING)数据库获得蛋白质相互作用网络并利用Cytoscape3.6.0 CytoNCA插件筛选出核心靶点。将共同靶点导入富集分析库(Metascape)数据库进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,并利用自动对接工具(Auto Dock Tools)软件进行分子对接。结果桑白皮汤有效活性成分126个,预测对应靶点1351个,疾病相关靶点2296个,主要活性成分为槲皮素、木犀草素、山柰酚、汉黄芩素、β谷甾醇,核心靶点为肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤蛋白p53(TP53)、丝裂原激活蛋白激酶8(MAPK8)、MAPK14。GO富集分析共获得2720条,KEGG富集分析获得信号通路334条,分子对接结果表明主要活性成分可以和核心靶点结合,结合构象稳定。结论桑白皮汤可能通过多种有效成分、多个作用靶点和信号通路发挥抗炎、抗氧化等生物作用,进而具有治疗慢性阻塞性肺病急性加重的作用。 展开更多
关键词 桑白皮汤 慢性阻塞性肺病急性加重 网络药理学 关键靶点 分子机制 分子对接
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益气活血方对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及海马突触可塑性的影响 被引量:7
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作者 李佩佩 时潇 +3 位作者 王瑞 王又闻 王丽娜 胡建鹏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期2249-2257,共9页
目的:探讨益气活血方(YQHXD)对脑缺血再灌注(I/R)大鼠学习记忆功能,海马区突触超微结构及脑源性神经营养因子(BDNF)、突触小泡蛋白(SYN)和突触后致密蛋白95(PSD95)蛋白的影响。方法:采用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)大... 目的:探讨益气活血方(YQHXD)对脑缺血再灌注(I/R)大鼠学习记忆功能,海马区突触超微结构及脑源性神经营养因子(BDNF)、突触小泡蛋白(SYN)和突触后致密蛋白95(PSD95)蛋白的影响。方法:采用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组(I/R组)及YQHXD低、中、高剂量组,并设置假手术(sham)组作为对照,每组12只。YQHXD低、中、高剂量组分别按照4.2、8.4和16.8 g·kg^(-1)·d^(-1)的剂量灌胃,sham组和I/R组给予等体积生理盐水,于用药14 d后采用Longa评分法观察各组大鼠神经功能缺损情况,Morris水迷宫实验评估各组大鼠学习与记忆功能,苏木素-伊红(HE)染色观察缺血侧海马CA1区及齿状回(DG)病理变化,透射电镜观察海马区突触数量、突触后致密物(PSD)厚度和结构变化,Western blot检测海马组织BDNF、SYN和PSD95蛋白表达水平。结果:与sham组比较,I/R组大鼠神经功能缺损评分显著增高(P<0.01),水迷宫逃避潜伏期显著延长(P<0.01),平台穿越次数显著减少(P<0.05),海马CA1区和DG区病理损伤严重,海马区突触超微结构散乱,突触数密度显著减少(P<0.01),PSD厚度显著变薄(P<0.01),BDNF、SYN和PSD95蛋白表达显著下降(P<0.01);与I/R组相比,YQHXD各组均能改善模型大鼠神经功能缺损情况,修复海马区组织病理损伤和突触超微结构;其中YQHXD中、高剂量组能显著减少水迷宫逃避潜伏期(P<0.01),显著提高平台穿越次数(P<0.05),显著增加突触数密度和PSD厚度(P<0.05),同时提高BDNF、SYN和PSD95蛋白表达水平。结论:YQHXD可改善MCAO/R大鼠神经功能,提高学习记忆能力,减轻海马神经元损伤,修复突触结构,提高突触数密度和PSD厚度,其作用机制可能与促进缺血侧海马组织BDNF、SYN和PSD95突触相关蛋白表达,提高突触可塑性有关。 展开更多
关键词 益气活血方 脑缺血再灌注损伤 突触可塑性 学习记忆能力 脑源性神经营养因子
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丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬和死亡的保护作用 被引量:9
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作者 王训翠 朱国旗 +1 位作者 赖桂华 李庆林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1655-1661,共7页
目的研究线粒体自噬在MPP^+损伤SH-SY5Y细胞中的发生及丹皮酚的干预作用。方法以1 mmol·L^(-1) MPP^+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型。采用MTT和LDH法分别检测不同浓度的丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞存活率和损伤度的影响... 目的研究线粒体自噬在MPP^+损伤SH-SY5Y细胞中的发生及丹皮酚的干预作用。方法以1 mmol·L^(-1) MPP^+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型。采用MTT和LDH法分别检测不同浓度的丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞存活率和损伤度的影响;MDC染色荧光显微镜下检测自噬空泡聚集;流式细胞术定量分析细胞内酸性自噬泡的形成;透射电镜观察线粒体自噬现象;激光共聚焦检测溶酶体和线粒体共定位;Western blot检测线粒体自噬相关蛋白parkin、LC3和Beclin-1的表达变化。结果在1~100μmol·L^(-1)浓度范围内,预先加入丹皮酚能拮抗MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞损伤,并呈一定的量效关系;SH-SY5Y细胞经MPP^+处理24 h,观察到自噬现象,出现自噬空泡增多,自噬水平增加,并存在较多的线粒体与溶酶体共定位的现象,LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达增加,parkin表达降低。预先加入丹皮酚后能逆转这些现象。结论丹皮酚抑制MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬的发生,阻止神经细胞的死亡。 展开更多
关键词 丹皮酚 线粒体自噬 MPP^+ SH-SY5Y细胞 细胞死亡 帕金森病
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脑络欣通促进氧糖剥夺/再灌注损伤大鼠的脑微血管内皮细胞血管新生:基于激活caspase-1/Gasdermin D/通路 被引量:5
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作者 李佩佩 胡音琦 +3 位作者 刘佳 王丽娜 吴元洁 胡建鹏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1093-1101,共9页
目的探讨脑络欣通(NLXTD)含药血清对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)焦亡及血管新生的影响和可能作用机制。方法BMECs体外培养,分别经OGD/R诱导、NLXTD含药血清处理及siRNA转染caspase-1,设置Control组:BMECs+10%空... 目的探讨脑络欣通(NLXTD)含药血清对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)焦亡及血管新生的影响和可能作用机制。方法BMECs体外培养,分别经OGD/R诱导、NLXTD含药血清处理及siRNA转染caspase-1,设置Control组:BMECs+10%空白血清;OGD/R组:BMECs+OGD/R+10%空白血清;NLXTD组:BMECs+OGD/R+10%NLXTD含药血清;siRNA-NC组:BMECs转染siRNA-NC+OGD/R+10%空白血清;si-caspase-1组:BMECs转染si-caspase-1+OGD/R+10%空白血清;si-caspase-1+NLXTD组:BMECs转染si-caspase-1+OGD/R+10%NLXTD含药血清。采用CCK-8法、Transwell小室实验、管腔形成实验分别检测细胞增殖、迁移、成管能力;试剂盒测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;ELISA法检测培养液中炎性因子IL-1β、IL-18的含量;Western blot检测细胞焦亡相关蛋白pro-caspase-1、caspase-1、NLRP3、Gasdermin D及血管生成关键蛋白VEGF,VEGFR2的表达。结果BMECs经OGD/R诱导后出现明显的损伤;与OGD/R组比较,10%的NLXTD含药血清能显著提高OGD/R损伤BMECs的存活率、迁移能力及成管能力(P<0.01),降低IL-1β、IL-18的含量以及LDH的释放(P<0.01);Western blot实验结果显示,NLXTD含药血清可上调OGD/R损伤BMECs的VEGF和VEGFR2蛋白表达(P<0.01),并降低pro-caspase-1、caspase-1、NLRP3、Gasdermin D的蛋白表达(P<0.01),加入caspase-1 siRNA后,能进一步促进VEGFR2蛋白表达(P<0.01)。结论NLXTD可以提高OGD/R损伤后的BMECs增殖、迁移、成管能力,促进血管新生,其机制可能与抑制细胞焦亡caspase-1/Gasdermin D通路,减轻BMECs损伤,上调VEGF、VEGFR2水平有关。 展开更多
关键词 脑络欣通 脑微血管内皮细胞 氧糖剥夺/再灌注 血管新生 细胞焦亡 血管内皮生长因子
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痰瘀同治法对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1/Smad3信号通路的影响 被引量:11
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作者 储全根 蔡正银 +3 位作者 储俊 轩云 程婕 王盼 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期708-712,共5页
目的观察痰瘀同治法通过调节TGF-β1/Smad3信号通路对糖尿病大鼠肾脏病变的影响。方法选取SD大鼠随机分为:空白组(NC)、模型组(MC)、痰瘀同治组(RPDBS)、化痰组(RP)、化瘀组(DBS),予以单次注射链脲佐菌素溶液制备糖尿病模型,喂养4周后,R... 目的观察痰瘀同治法通过调节TGF-β1/Smad3信号通路对糖尿病大鼠肾脏病变的影响。方法选取SD大鼠随机分为:空白组(NC)、模型组(MC)、痰瘀同治组(RPDBS)、化痰组(RP)、化瘀组(DBS),予以单次注射链脲佐菌素溶液制备糖尿病模型,喂养4周后,RPDBS组、RP组和DBS组分别予以相应的药物干预8周,麻醉状态下取材。采用HE染色法观察肾脏组织病理学变化;Western blot法和实时荧光定量PCR法检测肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及其信号蛋白Smad3蛋白和基因表达水平。结果与MC组比较,光镜下各治疗组肾小球和肾小管结构和排列改善明显;各治疗组TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白和基因表达水平均明显下调(P<0.05);其中RPDBS组TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白和基因表达水平较RP组和DBS组下调更明显(P<0.05)。结论痰瘀同治可能通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路激活,延缓糖尿病肾病纤维化,发挥肾脏保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 痰瘀同治 TGF-β1/Smad3信号通路
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脑络欣通对神经干细胞增殖分化及β-tubulin Ⅲ/GFAP的影响 被引量:5
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作者 何玲 石晓倩 +2 位作者 徐伟 谭辉 王键 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期964-971,共8页
目的观察脑络欣通对β-tubulinⅢ/GFAP及神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法将NSCs细胞株分为空白模型(MC)组、10%脑络欣通含药血清(NLXT组)、10%脑络欣通含药血清+抑制剂Y27632组(Y-27632组)。采用MTT法检测NSCs细胞活性,Transwell... 目的观察脑络欣通对β-tubulinⅢ/GFAP及神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法将NSCs细胞株分为空白模型(MC)组、10%脑络欣通含药血清(NLXT组)、10%脑络欣通含药血清+抑制剂Y27632组(Y-27632组)。采用MTT法检测NSCs细胞活性,Transwell小室观察NSCs迁移,免疫印迹法观察β-TubulinⅢ、GFAP、MAP-2蛋白表达。免疫荧光标记DCX、NEUN、β-TubulinⅢ表达。结果与MC组比较,1 d和3 d NLXT组、Y-27632组迁移细胞数增多(P<0.05);7 d后NLXT组、Y-27632组细胞存活率及迁移细胞数显著增多(P<0.01)。与MC组比较,第3天、第7天NLXT组和Y-27632组β-tubulinⅢ、MAP2、GFAP蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。NLXT组、Y-27632组脑组织β-tubulinⅢ/GFAP、BrdU/DCX、BrdU/NEUN标记细胞数目较MC组明显增多。结论脑络欣通通过调节β-tubulinⅢ/GFAP促进NSCs增殖、分化。 展开更多
关键词 微管蛋白 胶质纤维酸性蛋白 神经干细胞 脑络欣通
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桃红四物汤增强顺铂化疗对肺腺癌小鼠的抑瘤作用 被引量:4
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作者 李白坤 陈诗雨 +4 位作者 吴晓红 叶明君 朱婷 朱继民 李庆林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期588-593,共6页
目的研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,TSD)增强顺铂(cisplatin,DDP)化疗对肺腺癌移植小鼠的抑瘤作用。方法以鼠源肺腺癌细胞系Lewis制备鼠肺腺癌细胞移植瘤模型,设5组:正常对照、模型、TSD、DDP、TSD+DDP。观察给药后移植瘤体积... 目的研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,TSD)增强顺铂(cisplatin,DDP)化疗对肺腺癌移植小鼠的抑瘤作用。方法以鼠源肺腺癌细胞系Lewis制备鼠肺腺癌细胞移植瘤模型,设5组:正常对照、模型、TSD、DDP、TSD+DDP。观察给药后移植瘤体积变化,称量移植瘤质量,免疫组化法检测移植瘤组织Ki67表达量,荧光染色法检测移植瘤TUNEL表达量,Western blot法检测移植瘤组织Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量,ELISA法测鼠血浆中D-二聚体含量。结果TSD和DDP联用明显抑制移植瘤增长,瘤组织中Ki67表达水平(28.3%±3.1%)低于DDP单用组(40.3%±2.1%)。TSD和DDP联用明显促进移植瘤的凋亡水平,TUNEL阳性率明显高于DDP单用组(41.0%±3.0%vs 30.7%±4.5%),瘤组织中Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量也高于DDP单用组,而Bcl-2表达量则明显低于DDP单用组,且TSD与DDP在4种凋亡蛋白表达量呈现明显的交互作用(P<0.05)。TSD和DDP联用组血浆中D-二聚体含量(188.50±28.46)μg·L^(-1)明显降低,且与DDP单用组(269.80±35.92)μg·L^(-1)间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论TSD可能通过改善肿瘤高凝状态而增强DDP化疗对肺腺癌移植瘤的抑制作用。 展开更多
关键词 肺腺癌 化疗 顺铂 高凝状态 桃红四物汤 小鼠模型
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基于血清代谢组学的偏头痛性别差异研究 被引量:3
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作者 贾元威 王萍 +2 位作者 谢海棠 沈杰 胡容峰 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2021年第9期1331-1332,共2页
偏头痛流行病学统计显示,偏头痛的流行病学、临床特征和病理生理学存在显著性别差异,男女比例约为1∶2-1∶3,对女性群体的危害更大[1-5]。血清代谢组学灵敏度高,检测样本易于获取,常作为疾病早期小分子代谢物变化的重要检测手段[6]。本... 偏头痛流行病学统计显示,偏头痛的流行病学、临床特征和病理生理学存在显著性别差异,男女比例约为1∶2-1∶3,对女性群体的危害更大[1-5]。血清代谢组学灵敏度高,检测样本易于获取,常作为疾病早期小分子代谢物变化的重要检测手段[6]。本研究构建硝酸甘油型实验性偏头痛大鼠模型,基于SCIEX TripleTOF 5600 LC-Q/TOF-MS分析技术,采用血清代谢组学,探索偏头痛性别差异机制。 展开更多
关键词 性别差异 偏头痛 Sprague Dawley大鼠 血清代谢组学 LC-Q/TOF-MS 差异代谢物
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