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小黄鱼中杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测技术的建立
1
作者
沈宁远
韩明明
+6 位作者
陈琳
詹炜
刘峰
谢庆平
徐万土
陈黎明
楼宝
《浙江海洋大学学报（自然科学版）》
CAS
2023年第2期109-119,共11页
自2015年首次实现小黄鱼全人工育种以来,小黄鱼各项养殖技术获得了长足发展,但病害防治形势依然十分严峻,其中由杀香鱼假单胞菌引发的内脏白点病是小黄鱼养殖过程中的主要病害。为准确预判该病的爆发时间并争取有效预防,建立了一种能高...
自2015年首次实现小黄鱼全人工育种以来,小黄鱼各项养殖技术获得了长足发展,但病害防治形势依然十分严峻,其中由杀香鱼假单胞菌引发的内脏白点病是小黄鱼养殖过程中的主要病害。为准确预判该病的爆发时间并争取有效预防,建立了一种能高效、定量检测杀香鱼假单胞菌的方法。通过在小黄鱼鱼体内分离鉴定获得杀香鱼假单胞菌菌株,将其DNA回旋酶B亚基基因(gyrB)中一特异片段与pClone007 Blunt Vector载体重组得到重组质粒,后者经过转染大肠杆菌感受态细胞、LB-氨苄西林(ampicillin,AMP)选择性培养和测序鉴定,获得能表达gyrB特异片段的阳性质粒的菌落,进一步将阳性菌落进行扩大培养、质粒提取及纯化得到质粒标准品。利用设计合成的特异引物及逐级稀释的质粒标准品建立杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测标准曲线和反应体系。通过验证,运用该技术灵敏度达到10 copies·μL^(-1),并且组内和组间变异系数均小于0.82%。建立的方法实现了对小黄鱼中杀香鱼假单胞菌的快速定量检测,能够精确反映该菌在养殖水体及鱼体内的季节性变化并确立其流行规律,为小黄鱼内脏白点病的早期诊断提供了准确有效工具,同时为建立小黄鱼病害预警系统提供了良好的技术支撑。
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关键词
杀香鱼假单胞菌
荧光定量PCR
小黄鱼
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职称材料
南美白对虾多茬养殖高产试验
被引量：
3
2
作者
刘长军
周志强
吴昌文
《中国水产》
北大核心
2008年第1期57-58,共2页
随着南美白对虾养殖技术的不断提高,传统的单茬养殖模式已经不适应高产高效的需要,积极探索不同养殖模式、提高经济效益成为广大渔业科技人员追求的目标。为此,浙江省象山县水产养殖技术推广站在结合南美白对虾半大棚暂养模式、大小池...
随着南美白对虾养殖技术的不断提高,传统的单茬养殖模式已经不适应高产高效的需要,积极探索不同养殖模式、提高经济效益成为广大渔业科技人员追求的目标。为此,浙江省象山县水产养殖技术推广站在结合南美白对虾半大棚暂养模式、大小池塘配套两茬养殖以及全大棚养殖的基础上,提出了南美白对虾多茬养殖模式,利用大棚保温原理,采取全程大棚三茬养殖,从而提高其产量和经济效益。
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关键词
南美白对虾
多茬养殖
高产试验
养殖技术推广
大棚养殖
养殖模式
经济效益
高产高效
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职称材料
题名
小黄鱼中杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测技术的建立
1
作者
沈宁远
韩明明
陈琳
詹炜
刘峰
谢庆平
徐万土
陈黎明
楼宝
机构
浙江海洋大学
水产
学院
浙江省农业科学院水生生物研究所
宁波市象山县水产技术推广站
象山
港湾
水产
苗种有限公司
出处
《浙江海洋大学学报（自然科学版）》
CAS
2023年第2期109-119,共11页
基金
宁波市科技计划项目(2021S053,2021Z081)
浙江省重点研发计划(2021C02055)。
文摘
自2015年首次实现小黄鱼全人工育种以来,小黄鱼各项养殖技术获得了长足发展,但病害防治形势依然十分严峻,其中由杀香鱼假单胞菌引发的内脏白点病是小黄鱼养殖过程中的主要病害。为准确预判该病的爆发时间并争取有效预防,建立了一种能高效、定量检测杀香鱼假单胞菌的方法。通过在小黄鱼鱼体内分离鉴定获得杀香鱼假单胞菌菌株,将其DNA回旋酶B亚基基因(gyrB)中一特异片段与pClone007 Blunt Vector载体重组得到重组质粒,后者经过转染大肠杆菌感受态细胞、LB-氨苄西林(ampicillin,AMP)选择性培养和测序鉴定,获得能表达gyrB特异片段的阳性质粒的菌落,进一步将阳性菌落进行扩大培养、质粒提取及纯化得到质粒标准品。利用设计合成的特异引物及逐级稀释的质粒标准品建立杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测标准曲线和反应体系。通过验证,运用该技术灵敏度达到10 copies·μL^(-1),并且组内和组间变异系数均小于0.82%。建立的方法实现了对小黄鱼中杀香鱼假单胞菌的快速定量检测,能够精确反映该菌在养殖水体及鱼体内的季节性变化并确立其流行规律,为小黄鱼内脏白点病的早期诊断提供了准确有效工具,同时为建立小黄鱼病害预警系统提供了良好的技术支撑。
关键词
杀香鱼假单胞菌
荧光定量PCR
小黄鱼
Keywords
Pseudomonas plecoglossicida
fluorescence quantitative PCR
Larimichthys polyactis
分类号
S941.429 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
南美白对虾多茬养殖高产试验
被引量：
3
2
作者
刘长军
周志强
吴昌文
机构
浙江省
宁波市
象山县
水产
养殖
技术
推广站
出处
《中国水产》
北大核心
2008年第1期57-58,共2页
文摘
随着南美白对虾养殖技术的不断提高,传统的单茬养殖模式已经不适应高产高效的需要,积极探索不同养殖模式、提高经济效益成为广大渔业科技人员追求的目标。为此,浙江省象山县水产养殖技术推广站在结合南美白对虾半大棚暂养模式、大小池塘配套两茬养殖以及全大棚养殖的基础上,提出了南美白对虾多茬养殖模式,利用大棚保温原理,采取全程大棚三茬养殖,从而提高其产量和经济效益。
关键词
南美白对虾
多茬养殖
高产试验
养殖技术推广
大棚养殖
养殖模式
经济效益
高产高效
分类号
S968.22 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小黄鱼中杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测技术的建立
沈宁远
韩明明
陈琳
詹炜
刘峰
谢庆平
徐万土
陈黎明
楼宝
《浙江海洋大学学报（自然科学版）》
CAS
2023
0
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职称材料
2
南美白对虾多茬养殖高产试验
刘长军
周志强
吴昌文
《中国水产》
北大核心
2008
3
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