期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
人神经生长因子β亚基cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达
被引量：
3
1
作者
刘东海
张更荣
+2 位作者
张乐鸣
张顺
董虹
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期486-489,共4页
目的 :从海马组织提取中国人神经生长因子基因 (NGFβ) ,分析中国人NGFβ序列 ,再克隆成熟肽部分 ,使NGFβ在大肠杆菌中表达。 方法 :提取组织总RNA进行逆转录 ,克隆到PCRⅡ载体 ,得 6 5 0bpDNA片段 ,以PCRⅡ /NGFβ载体为模板 ,扩增C...
目的 :从海马组织提取中国人神经生长因子基因 (NGFβ) ,分析中国人NGFβ序列 ,再克隆成熟肽部分 ,使NGFβ在大肠杆菌中表达。 方法 :提取组织总RNA进行逆转录 ,克隆到PCRⅡ载体 ,得 6 5 0bpDNA片段 ,以PCRⅡ /NGFβ载体为模板 ,扩增C端成熟肽部分 ,并克隆到PG5中 ,转化大肠杆菌BL2 1用异丙基 - β -D -半乳糖苷(IPTG)诱导培养。表达产物提纯、复性后 ,进行活性测定。结果 :NGFβcDNA全序列为 10 4 7bp ,所克隆的蛋白编码部分为 6 36bp ,由 2 12个氨基酸组成 ,序列分析结果与Genebank完全一致 ,成熟肽部分表达后 ,经SDS -PAGE电泳在 14kD左右有 1条明显的新增蛋白带 ,与预期的分子量相符 ,并Western印迹证实 ,rNGF约占菌体蛋白 10 %左右。结论 :通过序列分析证实 ,重组NGFβ在大肠杆菌中获得较高水平的表达 。
展开更多
关键词
人神经生长因子β亚基
CDNA
克隆
大肠杆菌
重组
序列分析
基因表达
在线阅读
下载PDF
职称材料
人绒毛膜促性腺激素β亚基在大肠杆菌中的表达
被引量：
2
2
作者
张乐鸣
刘东海
+1 位作者
董虹
张顺
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第8期415-417,共3页
目的 :以该室克隆的PCRⅡ hCGβ载体为模板 ,亚克隆到表达载体PG5中使hCGβ基因在大肠杆菌中进行高效表达。方法 :改变部分hCGβ序列 ,得到重组PG5 hCGβ载体 ,经序列分析证明 ,再转化到表达菌BL2 1中表达 ,所得包涵体经过柱纯化 ,复...
目的 :以该室克隆的PCRⅡ hCGβ载体为模板 ,亚克隆到表达载体PG5中使hCGβ基因在大肠杆菌中进行高效表达。方法 :改变部分hCGβ序列 ,得到重组PG5 hCGβ载体 ,经序列分析证明 ,再转化到表达菌BL2 1中表达 ,所得包涵体经过柱纯化 ,复性 ,免疫发光分析和动物试验测定其活性。结果 :经SDS PAGE电泳在 18kD左右有一条明显的新增蛋白带 ,与预期的分子量相符 ,并用Western印迹证实 ,rhCGβ约占菌体总蛋白的 10 % ,活性为 7.8U mg。 结论 :重组hCGβ在大肠杆菌中获得了较高水平的表达。且经复性后有较高的免疫活性和生物活性。
展开更多
关键词
人绒毛膜促性腺激素β亚基
序列分析
大肠杆菌
在线阅读
下载PDF
职称材料
RNAi沉默RON基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和耐药性的抑制作用
被引量：
1
3
作者
毛联钢
李克强
+4 位作者
卓文莹
戴晓宇
余永明
冯伟云
乐东海
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期502-507,共6页
目的:探讨RNAi沉默酪氨酸激酶受体RON(recepteur d’origine nantais)基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和对抗肿瘤药物敏感性的影响。方法:构建RON基因的RNAi慢病毒载体Lv-RON-siRNA。Real-time PCR和Western blotting检测RON基因的沉默效率...
目的:探讨RNAi沉默酪氨酸激酶受体RON(recepteur d’origine nantais)基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和对抗肿瘤药物敏感性的影响。方法:构建RON基因的RNAi慢病毒载体Lv-RON-siRNA。Real-time PCR和Western blotting检测RON基因的沉默效率及RON蛋白表达水平;Transwell侵袭实验和ATP-TCA(ATP-tumor chemosensitivity assay)检测RON基因对HT-29细胞侵袭和对药物敏感性的影响。结果:慢病毒载体Lv-RON-siRNA感染HT-29细胞对RON基因的沉默效果达到70%。Lv-RON-siRNA感染后,HT-29细胞侵袭力较对照组明显降低(0.97±0.072 vs 1.29±0.076,P<0.05)。Lv-RON-siRNA感染后,HT-29细胞对5-氟尿嘧啶(5-fluorouraci,5-FU)的IC90值和IC50值分别为(14.28±1.34)、(8.93±1.20)μg/ml,顺铂(cisplatin,DDP)的IC90值和IC50值分别为(1.91±0.22)、(0.64±0.07)μg/ml,均明显低于对照组(P<0.01)。结论:沉默RON基因表达能抑制HT-29细胞的侵袭力,提高细胞对5-FU和DDP的敏感性。
展开更多
关键词
RON基因
HT-29细胞
RNAI
侵袭
耐药
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
人神经生长因子β亚基cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达
被引量：
3
1
作者
刘东海
张更荣
张乐鸣
张顺
董虹
机构
宁波市第二医院肿瘤分子生物学实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期486-489,共4页
基金
宁波市自然科学基金资助项目 (No .982 8)
文摘
目的 :从海马组织提取中国人神经生长因子基因 (NGFβ) ,分析中国人NGFβ序列 ,再克隆成熟肽部分 ,使NGFβ在大肠杆菌中表达。 方法 :提取组织总RNA进行逆转录 ,克隆到PCRⅡ载体 ,得 6 5 0bpDNA片段 ,以PCRⅡ /NGFβ载体为模板 ,扩增C端成熟肽部分 ,并克隆到PG5中 ,转化大肠杆菌BL2 1用异丙基 - β -D -半乳糖苷(IPTG)诱导培养。表达产物提纯、复性后 ,进行活性测定。结果 :NGFβcDNA全序列为 10 4 7bp ,所克隆的蛋白编码部分为 6 36bp ,由 2 12个氨基酸组成 ,序列分析结果与Genebank完全一致 ,成熟肽部分表达后 ,经SDS -PAGE电泳在 14kD左右有 1条明显的新增蛋白带 ,与预期的分子量相符 ,并Western印迹证实 ,rNGF约占菌体蛋白 10 %左右。结论 :通过序列分析证实 ,重组NGFβ在大肠杆菌中获得较高水平的表达 。
关键词
人神经生长因子β亚基
CDNA
克隆
大肠杆菌
重组
序列分析
基因表达
Keywords
Human
Nerve growth factors
DNA, recombinant
Sequence analysis
Gene expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
人绒毛膜促性腺激素β亚基在大肠杆菌中的表达
被引量：
2
2
作者
张乐鸣
刘东海
董虹
张顺
机构
宁波市第二医院肿瘤分子生物学实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第8期415-417,共3页
基金
宁波市自然科学基金!资助项目 (编号 982 7)
文摘
目的 :以该室克隆的PCRⅡ hCGβ载体为模板 ,亚克隆到表达载体PG5中使hCGβ基因在大肠杆菌中进行高效表达。方法 :改变部分hCGβ序列 ,得到重组PG5 hCGβ载体 ,经序列分析证明 ,再转化到表达菌BL2 1中表达 ,所得包涵体经过柱纯化 ,复性 ,免疫发光分析和动物试验测定其活性。结果 :经SDS PAGE电泳在 18kD左右有一条明显的新增蛋白带 ,与预期的分子量相符 ,并用Western印迹证实 ,rhCGβ约占菌体总蛋白的 10 % ,活性为 7.8U mg。 结论 :重组hCGβ在大肠杆菌中获得了较高水平的表达。且经复性后有较高的免疫活性和生物活性。
关键词
人绒毛膜促性腺激素β亚基
序列分析
大肠杆菌
Keywords
hCGβ Sequencing analysis Gene expression Refolding
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
RNAi沉默RON基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和耐药性的抑制作用
被引量：
1
3
作者
毛联钢
李克强
卓文莹
戴晓宇
余永明
冯伟云
乐东海
机构
宁波市第二医院肿瘤分子生物学实验室
宁波市
第二
医院
肛肠科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期502-507,共6页
基金
宁波市自然科学基金资助项目(No.2008A610082)~~
文摘
目的:探讨RNAi沉默酪氨酸激酶受体RON(recepteur d’origine nantais)基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和对抗肿瘤药物敏感性的影响。方法:构建RON基因的RNAi慢病毒载体Lv-RON-siRNA。Real-time PCR和Western blotting检测RON基因的沉默效率及RON蛋白表达水平;Transwell侵袭实验和ATP-TCA(ATP-tumor chemosensitivity assay)检测RON基因对HT-29细胞侵袭和对药物敏感性的影响。结果:慢病毒载体Lv-RON-siRNA感染HT-29细胞对RON基因的沉默效果达到70%。Lv-RON-siRNA感染后,HT-29细胞侵袭力较对照组明显降低(0.97±0.072 vs 1.29±0.076,P<0.05)。Lv-RON-siRNA感染后,HT-29细胞对5-氟尿嘧啶(5-fluorouraci,5-FU)的IC90值和IC50值分别为(14.28±1.34)、(8.93±1.20)μg/ml,顺铂(cisplatin,DDP)的IC90值和IC50值分别为(1.91±0.22)、(0.64±0.07)μg/ml,均明显低于对照组(P<0.01)。结论:沉默RON基因表达能抑制HT-29细胞的侵袭力,提高细胞对5-FU和DDP的敏感性。
关键词
RON基因
HT-29细胞
RNAI
侵袭
耐药
Keywords
RON gene HT-29 cell RNAi invasion drug resistance
分类号
R735.3 [医药卫生—肿瘤]
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人神经生长因子β亚基cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达
刘东海
张更荣
张乐鸣
张顺
董虹
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人绒毛膜促性腺激素β亚基在大肠杆菌中的表达
张乐鸣
刘东海
董虹
张顺
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
RNAi沉默RON基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和耐药性的抑制作用
毛联钢
李克强
卓文莹
戴晓宇
余永明
冯伟云
乐东海
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
